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氧载体对L-天冬酰胺酶发酵过程影响的研究
刘红,东芝
生物工程学报 , 1998,
Abstract: 以抗癌药物L-天冬酰胺酶生产为应用背景,针对发酵过程中存在严重耗氧问题,研究了氧载体对发酵过程的影响。通过对几种氧载体的筛选,认为正十二烷最适合于该发酵过程。随后以产物L-天冬酰胺酶活性、菌体浓度以及溶氧水平为主要指标,考察了氧载体在发酵过程中的作用.实验表明,发酵基质中5%正十二烷的添加量为最佳浓度,这种氧载体的加入,明显地提高了发酵介质中的溶氧水平,改善了供氧条件,增加了菌体浓度,提高了L-天冬酰胺酶发酵水平,在优化条件下,可使发酵液最终酶活提高21%左右。
非水相酶促酯交换反应生产类可可脂
刘伟雄,东芝
华东理工大学学报 , 1999,
Abstract: 对利用固定化脂肪酶催化乌桕脂与硬脂甲酯进行酯交换生产类可可脂作研究了。考察了无机、水活度、温度以及有要溶剂等因素对酯交换反应的影响,进行了产物分离和性能检测以及固定化脂肪酶的稳定性实验。结果显示:CaSO4显著促进脂肪酶酯交换活力;最适水活度为0.35-0.45;在正己烷溶剂中的酯交换反应最佳温度为60℃,乌桕脂:硬脂酸甲酯(CVT:SME)=1:3(m/m),每克底物加入正己烷1.0mL,固定化
谷胱甘肽合成酶在大肠杆菌中的高效表达及性质
沈立新,东芝
华东理工大学学报 , 2000,
Abstract: 在成功构建了谷脱甘肽(GSH)合成酶基因表达质料(pTrc-gsh)的基础上,对不同大肠杆蓖突主菌进行了比较,筛选出高效、稳定表达GSH合成酶的工程菌并进行了最佳酶表达条件的研究。结果表明:重组工程菌E.coliBL21(pTrc-gsh)表达量最高,质粒稳定性好;以5%接各量于37℃、pH7.2培养至OD550=0.5左右,加入诱导剂IPTG(0.mmol/L),同时切换培养条件为34℃、pH6
氧载体对l-天冬酰胺酶发酵过程影响的研究
刘红 东芝
生物工程学报 , 1998,
Abstract: 以抗癌药物l-天冬酰胺酶生产为应用背景,针对发酵过程中存在严重耗氧问题,研究了氧载体对发酵过程的影响。通过对几种氧载体的筛选,认为正十二烷最适合于该发酵过程。随后以产物l-天冬酰胺酶活性、菌体浓度以及溶氧水平为主要指标,考察了氧载体在发酵过程中的作用.实验表明,发酵基质中5%正十二烷的添加量为最佳浓度,这种氧载体的加入,明显地提高了发酵介质中的溶氧水平,改善了供氧条件,增加了菌体浓度,提高了l-天冬酰胺酶发酵水平,在优化条件下,可使发酵液最终酶活提高21%左右。
非水介质中酶促酯化反应机制及醇抑制动力学
崔玉敏,东芝
华东理工大学学报 , 1999,
Abstract: 以非极性大孔吸附树脂吸附固定化脂肪酶在异辛烷/四氯化碳混合溶剂中选择性催化S-2(6-甲氧基-2-萘基)丙酸与正辛酯化为反应模型,对非常规溶剂中酶催化反应机制及动力学进行了初步研究。结果表明:在有机溶剂中该脂肪酶催化萘普森与正辛醇的酯化反应同样符合米氏方程,此酯化反应符合双底物乒乓反应机制,但值得提出的是酰基受体的过量存在会对酯化产生竞争性抑制作用。
固定化酵母细胞生物合成谷胱甘肽的研究
赵旭东,东芝
华东理工大学学报 , 2000,
Abstract: 利用酵母细胞自身GSH合成酶和糖酵解途径再生的ATP能够合成GSH,在含葡萄糖0.7mol/L,硫酸镁10mmol/L,0.3mol/L磷酸钾缓冲液和谷氨酸、半胱氨酸、甘氨酸各20mmol/L的10mL反应液中,加入10g(湿重)固定化酵母细胞,30℃振荡反应8h产生0.91g/L的GSH。加入腺苷会降低GSH的产量;当腺苷开始转化生成ATP时加入前体,可明显提高GSH的产量。实验结果初步表明:A
反义核酸对肿瘤细胞多药抗性的抑制:作用靶点及作用方?…
钱江潮,东芝
华东理工大学学报 , 2000,
Abstract: 为了用反义寡聚DNA调控要霉素肿瘤细胞KB-A-1的多药抗性,对反义核酸的预作用位点、作用方式和硫代化类似物进行了研究。筛选得到两段对应于翻译起始区(3)和P-糖蛋白ATP结合位点(9)的20聚反义片段,发现反义核酸的使用次数对结果的检测有很大影响,采用5μmol/L5μmol/L的反义片段9连续处理4d,实现了将近50%抑制效果,而其正义和错义链在10μmol/L沈度的同样处理条件下则没有检测到
靶序列三链DNA对质粒pBR322的Amp^r基因表达的抑制
李军生,东芝
华东理工大学学报 , 2000,
Abstract: 利用CaCl2法成功地将寡核苷酸导入大肠杆菌JM109细胞。质粒pBR322转化结果表明,寡革酸片段5’-AGCGGGAATAAGGGAA-3’在转化前(或后)与靶序列结合均能抑制β-内酰胺酶基因的表达,细菌生长受到抑制。体外聚丙烯酰胺凝胶电泳结果表明,该片段能与靶序列形成三链结构。这些结果表明多聚嘌呤寡核苷酸是通过与靶序列形成三链DNA来抑制β-内酰胺酶基因的表达。
半乳糖寡糖的生物活性
王筱兰,东芝
华东理工大学学报 , 1999,
Abstract: 对利用固定化β-半乳糖苷酶连续合成的半乳糖寡糖进行了有关生物活性的研究。通过双歧杆蓖培养实验和动物试验证实了半乳糖寡糖具有高效,专一地促进双歧杆菌生长,改善动物肠道内菌群分布,促进钙的吸收,提高食物的转化率,降低血清胆固醇含量及盲肠内pH等生物活性。
MTT法测定人表皮癌细胞的抗药性
钱江潮,东芝
华东理工大学学报 , 2000,
Abstract: 在用MTT测定细胞存活性率以研究人表皮细胞KB-3-1及其抗阿霉素细胞株KB-A-1对化疗药物阿霉素,长春花碱和秋水仙碱的多药抗性时,发现培养基中血清浓度的变化对MTT法测定结果有影响,吸光值在血清浓度为w=0.02时最高,w=0.30时最低,w=0.05-0.20之间波动不大。而不加血清使甲溶解困难而产生误差。培养基中的血清(常为w=0.10)不影响MTT法的结果,在完全培养基中用MTT法测定
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