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多功能降解菌Pseudomonas putida KT2440-DOP的构建与降解特性研究
,何健,黄星,贾开志,李顺鹏
微生物学报 , 2006,
Abstract: 三唑磷水解酶基因为研究发现的一个新的广谱有机磷水解酶基因,通过PCR从有机磷降解菌株Ochrobactrum sp. Mp4总DNA扩增了tpd,将tpd定向克隆到pBBRMCS5载体上,构建重组质粒pTPD,在辅助质粒pRK2013 的帮助下,通过三亲接合将pTPD转移到模式菌株Pseudomonas putida KT2440中,获得的工程菌Pseudomonas putida KT2440DOP可以降解多种有机磷农药及芳香烃化合物;KT2440DOP的有机磷水解酶活较出发菌株MP4提高了一倍左右,且遗传性状稳定。
久效磷降解菌的分离及其酶促降解特性研究
贾开志,李晓慧,何健,,马吉平,李顺鹏
环境科学 , 2007,
Abstract: 从某农药厂废水处理池的污泥中分离到1株久效磷高效降解菌株M-1,经过对其形态特征、生理生化、以及16SrDNA序列分析,该菌株初步鉴定为Paracoccussp..M-1能以久效磷作为唯一碳源生长,24h对100mg·L-1久效磷的降解效率为92.47%.久效磷降解酶定域表达试验表明该酶为胞内酶,组成表达.久效磷酶促降解的最适反应pH为8.0,最适反应温度为25℃;其米氏常数(Km)为0.29μmol·mL-1,最大降解速率(Vmax)为682.12μmol·(min·mg)-1.久效磷降解酶热稳定性差,碱性条件下能够保持较高降解活性.
南阳牛igf-ir、capnⅱ和ucp3基因多态性与生长性状的相关分析
张润,陈宏,,严镇钧,,徐平
农业生物技术学报 , 2010,
Abstract: ?对南阳牛胰岛素样生长因子-ⅰ受体(igf-ir)、钙激活中性蛋白ⅱ(capnⅱ)和解偶联蛋白3(ucp3)3个位点pcr-rflp与生长性状进行相关分析。在所研究群体中,igf-ir/taqⅰ多态位点上bb型个体仅检测到2头,igf-ir/taqⅰ位点等位基因a和capnⅱ/hhaⅰ位点等位基因b为优势等位基因。南阳牛在igf-ir/taqⅰ和capnⅱ/hhaⅰ位点处于hardy-weinberg平衡状态,在ucp3/bglⅰ位点偏离hardy-weinberg平衡状态。相关分析表明,igf-ir/taqⅰ位点不同基因型对南阳牛生长性状影响不显著。capnⅱ/hhaⅰ位点对6月龄的生长性状影响显著(p<0.05);对不同生长阶段的体协长和胸围影响显著(p<0.05或p<0.01)。ucp3/bglⅰ位点对6月龄的体重、体高和体协长,24月龄体高、体协长和胸围影响显著(p<0.05)。在capnⅱ/hhaⅰ和ucp3/bglⅰ位点上,南阳牛ab型个体生长性状表现最好。capnⅱ/hhaⅰ和ucp3/bglⅰ多态可以作为南阳牛早期选育的有效标记。
甲磺隆水解酶酶促反应体系的建立与特性研究
黄星,孙纪全,潘继杰,,孙笑非,李顺鹏
农药学学报 , 2005,
Abstract: 在室内控制条件下对甲磺隆降解菌s113(methylopilasp.)的水解酶进行了研究,发现该酶为胞内酶、非诱导酶。建立了甲磺隆水解酶的酶促反应体系:2830μlna2hpo4-nah2po4缓冲液(0.2mol/l,ph7.0),150μl甲磺隆(1000mg/l),20μl粗酶液(约1.2μg粗蛋白),30℃水浴30min。甲磺隆水解酶ph值稳定范围为6~9,最适ph值为8.0。水解酶热不稳定,45℃处理30min,酶活下降59.22%,70℃处理30min可完全灭活。测定了8种金属离子对水解酶的作用,发现1mmol/l的ca2+对酶活有促进作用。
基于有害干扰的中国省域森林生态安全评价
刘心竹?,,张爽?,娟?,艳红?,张大红?
生态学报 , 2014,
Abstract: 近年来随着经济社会不断发展,森林生态系统受到各种有害干扰越来越多,在以可持续发展为目标和“建设生态城市,推进城市森林建设,保障城市生态安全”的背景下,研究我国各省森林生态安全状况,成为关乎我国各省城市健康发展的重要课题。在对森林生态安全与森林健康概念辨析的基础上,基于有害干扰角度,运用宏观数据,应用spss、stata、matlab等软件,采用理论分析与实证分析、定性分析与定量分析相结合的研究方法。通过主成分分析、聚类分析、模糊评价等手段对2011年我国31个省级行政区域的森林生态安全水平进行实证分析和评价。评价结果表明:在2011年研究所涉及的31个省份中,16个省级行政区域的森林生态安全水平较高,森林生态系统受有害干扰较小,整体水平较为乐观,但仍有近一半的省份森林生态系统处于不安全状态。在深入探讨评价结果和影响我国各省森林生态安全主要干扰因子的基础上,为如何维护我国森林生态安全提出了对策建议。
同源重组法构建多功能农药降解基因工程菌研究
蒋建东 孙纪全 代先祝 文阳 李顺鹏*
生物工程学报 , 2005,
Abstract: 构建遗传稳定的多功能农药降解基因工程菌可以为农药污染的生物修复提供良好的菌种资源,然而,构建遗传稳定且不带入外源抗性的基因工程菌是一个难点。通过以受体菌的16srdna为同源重组指导序列、sacb基因为双交换正筛选标记构建同源重组载体,二亲结合的方法将甲基对硫磷水解酶基因(mpd)整合到呋喃丹降解菌sphingomonassp.cds1染色体的16srdna位点,分别成功构建了含1个和2个mpd基因插入到rdna位点且不带入外源抗性的基因工程菌株cdsmpd和cds-2mpd。同源重组单交换的效率为3.7×10-7~6.8×10-7。通过pcr和southern杂交的方法验证了同源重组事件。基因工程菌遗传稳定,能同时降解甲基对硫磷和呋喃丹。甲基对硫磷水解酶(mph)的比活在各生长时期均高于原始出发菌株,比活最高达6.22mu/μg。
检测致畸物的gfp基因工程菌的构建
,蒋建东,何健,黄星,贾开志,李顺鹏
应用与环境生物学报 , 2007,
Abstract: 摘要reca与uvra是细胞sos系统中重要的修复蛋白,在细胞dna损伤后诱导表达.将报告基因绿色荧光蛋白基因(gfpmut3a)分别置于reca和uvra启动子调控下,构建成质粒precagfp和puvragfp,并转化e.colidh5α,构建成检测菌株ers101和eus101.试验发现,菌株ers101和eus101在致畸物吖啶橙处理后,gfp的表达量增高,菌悬液经507nm的蓝光激发后产生的绿色荧光明显增强,且与吖啶橙的浓度具有一定的相关性,即使在0.5μgml-1的吖啶橙诱导下也能检测到荧光增强效应.对硝基酚等多种致畸物处理后的检测菌株均有荧光增强效应.图4表1参9
台湾地区输入木质包装材料中吉拉尼伞滑刃线虫的鉴定
李鸿,,李红梅,,何洁
南京农业大学学报 , 2015, DOI: 10.7685/j.issn.1000-2030.2015.04.008
Abstract: [目的]从广东口岸输入的台湾地区木质包装材料中截获到一种伞滑刃属(Bursaphelenchus)线虫,本文对其进行了形态学和分子生物学特征鉴定,旨在为我国口岸植物检疫提供理论依据。[方法]采用形态特征描述、形态测计值比较,核糖体DNA(rDNA)的ITS-RFLP酶切图谱分析,以及基于rDNA 18S区、28S D2/D3区以及ITS区构建系统发育树的方法对截获线虫群体进行鉴定。[结果]确定该截获群体为松材线虫组(xylophilus group)成员之一――吉拉尼伞滑刃线虫(B.gillanii),其主要形态鉴别特征是:唇区缢缩明显,口针长约13 μm,口针基部球小;侧线4条;雌虫阴门盖显著,长约12~15 μm;雌虫尾锥形,腹面较背面更显著弯曲,如鸟喙状,尾尖突与尾几乎连续,长5~7 μm;雄虫交合刺弓形,中弧线长26~32 μm;交合刺基顶小而圆,喙突长而尖,远端有盘状突;尾乳突7个,交合伞呈铲状。ITS-RFLP酶切图谱分析揭示该截获群体与吉拉尼伞滑刃线虫原始描述群体一致,系统发育分析揭示其与松材线虫(B.xylophilus)和拟松材线虫(B.mucronatus)的亲缘关系最近。[结论]松材线虫不仅是中国特别关注的重要植物检疫性线虫,也是国际多数国家或地区关注的检疫性有害生物,作为其形态学和系统进化相似种的吉拉尼伞滑刃线虫,应引起相关检疫部门的重视。该线虫属全国口岸首次截获。
[Objectives]A Bursaphelenchus population was intercepted in packaging wood from Taiwan district at Guangdong Port,China. The population was identified by morphological and molecular methods and the study will provide technical support for Chinese plant quarantine services. [Methods]The intercepted population was identified using the morphological observation,the morphometrics comparison,the analysis of ITS-RFLP of ribosomal DNA(rDNA)and the phylogeny trees constructed on basis of sequences of 18S,28S D2/D3 and ITS region of rDNA. [Results]The population was identified as B.gillanii,which is one of the members of xylophilus group. The morphological characters of the intercepted population were mainly as follows:the lip region offset,stylet about 13 μm long with small basal swellings;four lateral lines;female with long vulval flap,about 12-15 μm long;female tail conoid,more strongly curved dorsally than ventrally,resembling beak of a bird,mucro of tail terminus appearing as a continuation of tail,5-7 μm long;male spicules paired,strongly arcuate,26-32 μm long as measured along the curved median line;condylus small and rounded,rostrum elongated and pointed,cucullus distinct disc-like;tail region with 7 papillae and terminus with shovel bursa. The ITS-RFLP analysis revealed that the intercepted population was identical to the original described population. The phylogenetic analyses revealed that the intercepted population was closest to B.xylophilus and B.mucronatus. [Conclusions]Pine wood nematode B.xylophilus was paid attention to as an important quarantine pest not only by China,but also by the most of other countries and regions in the world. Due to their similar morphological characters and close phylogenetic relationship,B.gillanii should be paid great attention to by the Chinese quarantine services. This is the first report for the interception in China
在1,2,2,6,6-五甲基哌啶醇的光稳定作用过程中N-氧化-1,2,2,6,6-五甲基哌啶醇的生成

科学通报 , 1982,
Abstract: 近年来,人们对四甲基哌啶型受阻胺光稳定剂的稳定机理开展了深入研究,已提出受阻胺的光稳定机理主要包括捕获活性自由基;分解氢过氧化物(ROOH)以及猝灭单线氧和激发态分子三种作用,但对受阻胺的另一类重要衍生物——含五甲基哌啶基的稳定剂很少研
高电荷与高电荷密度组份在储能光催化电子转移反应中的作用及其发展展望

分子催化 , 1987,
Abstract: Ⅰ 引言 光电子转移(ET)反应分解水受到广泛重视,虽然要实现大规模太阳能储存还有很多问题待解决;但近年进展很大。在光解硫化氢、光还原二氧化碳、光助电解水等方面也有进展。虽然光敏催化体系的成本降低、稳定性和循环数的提高也待解决,但众所关注的还是如何提高能量转化效率。没有较高的能量转化效率就难以和其他利用太阴能的途径相竞争。
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