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磷酸化蛋白质组学分析和定量技术的研究进展
,王京兰?,蔡 耘?,钱小红?
生物化学与生物物理进展 , 2007,
Abstract: 蛋白质的磷酸化是一种可逆性的蛋白质翻译后修饰,在生物体内起着极为重要的作用.近年来蛋白质翻译后修饰日益成为蛋白质组研究的热点之一.定量磷酸化蛋白质组学方法和技术的快速发展为研究蛋白质磷酸化时空动态变化,更好地了解生物学功能调节网络奠定了坚实的基础.作为蛋白质组学研究的一个重要组成部分,定量磷酸化蛋白质组学因其磷酸化蛋白质所具有的独特特征,在技术和方法研究方面将面临更为严峻的挑战.综述了磷酸化蛋白质组学定量的一些分析技术和方法的发展现状、优缺点以及未来的发展趋势.
基于强阳离子交换色谱与等电聚焦的磷酸化蛋白质组学分离策略比较
,董俊军,王京兰,蔡耘,钱小红
分析化学 , 2012, DOI: 10.3724/SP.J.1096.2012.10222
Abstract: 比较分析了强阳离子交换(SCX)与等电聚焦(IPG-IEF)技术在磷酸化蛋白质组学中的应用。采用3种标准磷酸化蛋白对SCX与IPG-IEF两种技术对磷酸化肽段富集的有效性进行考察。以HepG2细胞为复杂样本,考察SCX与IPG-IEF在实际样本中的应用情况。对SCX与IPG-IEF技术在18O标记的磷酸化蛋白质组定量研究中的应用情况进行考察。蛋白鉴定采用高准确度、高灵敏度、高分辨率的LTQ-FTICR-MS/MS质谱仪。实验表明:SCX和IPG-IEF在大规模磷酸化肽段分离过程中均有效;在复杂样本中,SCX技术的分离效果优于IPG-IEF;IPG-IEF的重复性好于SCX;在磷酸化蛋白质组定量分析结果表明,IPG-IEF技术的稳定性优于SCX。本研究为根据不同实验目的而选择适当的磷酸化蛋白质组预分离技术提供了有用信息。
等电聚焦分离与18O稳定同位素标记联用的磷酸化蛋白质组学定量方法研究
,王京兰,贾伟,卢庄,刘金风,宋丽娜,蔡耘,钱小红
分析化学 , 2008,
Abstract: 磷酸化蛋白质组学定量分析,要对磷酸化修饰富集技术和定量技术进行研究.基于此,本研究采用18O稳定同位素标记技术对胰蛋白酶酶解肽段混合物进行标记,并对其标记时间和标记后胰蛋白酶的变性条件进行优化.结果表明:在pH=4~5的KH2PO4缓冲体系中,37℃,标记反应持续19~24h,除了C-端肽之外,几乎所有的肽段都可达到100%标记;采用TCEP可以有效地抑制16O-18O回标现象.建立了与18O标记技术兼容性良好的IPG-IEF技术对磷酸化肽段进行选择性富集,富集后共从HepG2细胞中鉴定到491个磷酸化位点、362个磷酸化肽段和356个磷酸化蛋白,表明IPG-IEF在大规模磷酸化肽段分离富集中是有效的;最后与高准确度高灵敏度高分辨率的LTQ-FTICR质谱仪联用,建立了基于18O-IPG-IEF-LTQ-FTICR的磷酸化蛋白质组定量技术.实验结果表明,该技术可以实现磷酸化肽段的有效定性和定量.本研究为磷酸化蛋白质组学定量研究提供了实用技术.
氯化血红素催化氧化巯基形成二硫键
葛巍巍,陈静,宗良,李建,,吴为辉,张鸣,董俊军
- , 2017,
Abstract: 摘要 对氯化血红素催化氧化巯基形成二硫键的反应进行了研究,发现N,N-二异丙基乙胺(DIEA)的加入可以提高氯化血红素的催化活性,并降低其在氧化过程中的自聚现象.在室温及少量DIEA存在下,将氯化血红素和巯基乙酸甲酯按摩尔比1∶4混合于pH=8.0的水溶液中,敞口搅拌反应20 min,可以催化空气氧化90%的巯基乙酸甲酯形成相应的分子间二硫键产物.该催化氧化体系还可应用于多肽合成中,在相同条件下,只需2 h即可完成还原型催产素和利那洛肽的氧化环合,生成高产率的催产素和利那洛肽环肽.与传统的氧化方法相比,氯化血红素催化氧化的方法具有高效、环保的优点,为多肽合成中二硫键的形成提供了一种新方法
用于肽合成的肟铯盐裂解剂的制备及性能
宗良,董俊军,陈静,李建,,魏一飞,张鸣
- , 2016,
Abstract: 摘要 以获得侧链全保护的多肽为总目标,选择接入溴乙酰基把手的Wang树脂作为固相载体,采用多肽固相合成法制备了3种模型肽,将其用于对具有弱碱性和强亲核性的肟盐类裂解剂的研究;设计并制备了5种不同结构的肟铯盐,将其用于模型肽的裂解,并选择综合效果最好的2-吡啶甲醛肟铯盐进行裂解条件的优化.结果表明,肟铯盐类裂解剂可以温和、高效地裂解模型肽,得到侧链全保护的多肽
Phosphopeptide enrichment strategy based on strong cation exchange chromatography
基于强阳离子交换色谱分离的磷酸化肽段富集策略

SUI Shaohui,WANG Jinglan,LU Zhuang,CAI Yun,ZHANG Yangjun,YU Wenfeng,QIAN Xiaohong,
,王京兰,卢庄,蔡耘,张养军,蔚文峰,钱小红

色谱 , 2008,
Abstract: The routine analysis of phosphoproteomics needs effective and specific enrichment methods. The strong cation exchange chromatography (SCX) separation conditions, including the buffer solution and the separation gradient, were studied to enrich the phosphopeptides in a short time. Firstly, the tryptic peptides of standard protein mixtures (bovine alpha-casein and beta-casein, chicken egg ovalbumin) were used to optimize the SCX strategy. Then, this method was applied to the complicated samples, the tryptic peptides from yeast. The experimental results showed that the phosphopeptides were eluted before 30 min in the optimized SCX systems with less interference from nonphosphopeptides. Phosphopeptides were successfully separated in a short time, and the ion signals corresponding to phosphopeptides were accordingly increased during mass spectrometric analysis. It was indicated that the optimized SCX separation system could be used as a simple enrichment method for the separation of phosphopeptides, especially for phosphopeptides in the complex real samples, in a short time, and to increase the relative abundance of phosphopeptides in the detection fraction. This study provides the pragmatic technique for phosphoproteomics analysis on a large-scale.
安庆铜矿富水炮孔导爆索起爆冲击波分析
汪洪涛,
金属矿山 , 2013,
Abstract: 安庆铜矿的VCR采矿法大直径深孔采用导爆索起爆。爆破过程中,通常会遇到一些地下水丰富的炮孔即使在装药前用高压风去处理孔内的积水,然而吹完后很快又出现积水,因此需要采用水孔爆破技术。借助ANSYS有限元数值软件模拟导爆索在空气中和水中起爆,由计算结果可知:导爆索爆炸后在水中产生冲击波的超压值要比在空气中爆炸后产生的冲击波超压值显著加大,起爆后在炮孔内经过反复反射与叠加,使冲击波的超压最大值及作用时间都提高,使爆破效果更好。
冬瓜山铜矿隔离矿柱开采方法及稳定性分析
汪洪涛,
金属矿山 , 2013,
Abstract: 叙述了冬瓜山铜矿采用大直径深孔嗣后充填开采法进行多个采场同时开采,嗣后一次全尾胶结填充采空区的做法;同时通过数值计算软件模拟3种采场结构参数,分析采场的稳定性。计算结果表明:当采场长度越长,采场宽度越大时,围岩里面的最大主应力越大;当采场宽是14m,长是28m,永久矿柱厚度是4m时,采场塑性区范围最小;此组参数被定为隔离矿柱的最终采场结构参数,实现了隔离矿柱的安全高效开采。
巴氏毕赤酵母表达系统的特点及其研究进展
,陈松林
生物技术通报 , 2004,
Abstract: 巴氏毕赤酵母表达系统具有真核生物表达的特点。本文综述了巴氏毕赤酵母菌及其表达载体的特点以及外源基因在该系统中表达存在的一些问题。
正态分布下多个方差转变点的检测与方法探讨
A Method of Detecting Multiple Change Point for Normal Distribution Process
 [PDF]


Advances in Applied Mathematics (AAM) , 2016, DOI: 10.12677/AAM.2016.53040
Abstract: 经济系统数学模型中含有多个转变点的结构模型问题,本文对在均值相同情况下,方差多个转变点的检测方法采取的是将贝叶斯方法和极大似然方法结合起来,利用贝叶斯方法消去多余参数,极大似然方法可以回避转变点个数的先验分布信息未知的问题,给出有效的检测方法。
The problem of structure model occurs multiple change points in the economic system of mathe-matical models. In this paper, we give the detection method for change point problems about the variance changes. We combine the Bayesian method with the maximum likelihood method on the detection about the variance multiple change points in the same mean. The elimination extra pa-rameters can make use of Bayesian method; the maximum likelihood method can avoid the un-known problems of the prior distribution information of the change points number. It is a practical method.
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