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一株紫杉醇产生菌发酵条件的初步研究
,
化工进展 , 2010,
Abstract: 研究了一株内生真菌FusariummaireiUH23发酵产紫杉醇的工艺条件。实验结果表明最佳培养条件为温度26℃,发酵起始pH值7.0,接种量5%,装液量250mL三角瓶装液60mL,发酵周期12天。筛选出最佳碳源为葡萄糖,最佳氮源为硝酸铵。在上述条件下发酵,紫杉醇产量达(286.4±20.3)μg/L,较优化前提高10.2%。
Bacillus pumilus WL-11木聚糖酶A的纯化、鉴定及其底物降解方式
许正宏,
生物工程学报 , 2005,
Abstract: 对一株Bacilluspumilus WL_11木聚糖酶的纯化、酶学性质及其底物降解模式进行了研究。经过硫酸铵盐析、CM_Sephadex及SephadexG_75层析分离纯化,获得一种纯化的WL_11木聚糖酶A ,其分子量为26.0kD ,pI值9.5 ,以燕麦木聚糖为底物时的表观Km 值为16.6mg mL ,Vmax值为12.63μmol (min·mg)。木聚糖酶A的pH稳定范围为6 0至10 4 ,最适作用pH范围则在7.2至8.0之间,是耐碱性木聚糖酶;最适作用温度为45℃~55℃,在37℃、45℃以下时该酶热稳定性均较好;50℃保温时,该酶活力的半衰期大约为2h ,在超过50℃的环境下,该酶的热稳定较差,55℃和60℃时的酶活半衰期分别为35min和15min。WL_11木聚糖酶A对来源于燕麦、桦木和榉木的可溶性木聚糖的酶解结果发现,木聚糖酶A对几种不同来源的木聚糖的降解过程并不一致。采用HPLC法分析上述底物的降解产物生成过程发现木聚糖酶A为内切型木聚糖酶,不同底物的降解产物中都无单糖的积累,且三糖的积累量都较高;与禾本科的燕麦木聚糖底物降解不同的是,木聚糖酶A对硬木木聚糖降解形成的五糖的继续降解能力较强。采用TLC法分析了WL-11粗木聚糖酶降解燕麦木聚糖的过程,结果表明燕麦木聚糖能够被WL-11粗木聚糖酶降解生成系列木寡糖,未检出木糖,这说明WL-11主要合成内切型木聚糖酶A,同时发酵液中不含木糖苷酶,适合用来酶法制备低聚木糖。
~(60)Coγ射线诱变黑曲霉菌株产植酸酶的研究
杨平平,王燕,
核农学报 , 2004,
Abstract: 研究了60Coγ射线对黑曲霉44792菌种产植酸酶的诱变效应,筛选出产植酸酶较高的A.niger4961菌株,并初步分析了其植酸酶的基本性质。
致命鹅膏菌毒素对DMBA/巴豆油诱导小鼠皮肤肿瘤的治疗作用
舒畅,,周荼
菌物学报 , 2007,
Abstract: 研究了致命鹅膏中的毒素在安全剂量下抑制小鼠皮肤肿瘤的效果,并对此毒素的药用安全性进行初步评价。采用经典的DMBA/巴豆油诱导小鼠皮肤乳头状瘤形成的二阶段致癌模型,观察和评价致命鹅膏毒素在不同剂量下抑制肿瘤的效果,并且通过测定血清中氨基己糖的含量来判断对肝损伤的情况。结果表明,致命鹅膏毒素在某一低剂量下对DMBA/巴豆油诱导小鼠皮肤乳头状瘤有较好的治愈效果,且对小鼠肝脏无损伤,证明了致命鹅膏毒素可以较好地治疗皮肤癌。
UV-B辐射增强的环境植物学效应研究
梁婵娟,,周 青
中国生态农业学报 , 2004,
Abstract: 从植物生理生化(微观)、个体生长发育(中观)及生态系统(宏观)3个层面综述了紫外辐射增强的环境植物学效应,并提出减少植物紫外辐射伤害的对策。
内生真菌培养液对东北红豆杉细胞生长及紫杉醇合成的影响
李永成;
植物学报 , 2008,
Abstract: ?产紫杉醇的内生真菌(Fusariummairei)先培养在B5液体培养基中,然后制备成内生真菌培养液。在东北红豆杉(Taxuscuspidata)细胞悬浮培养的不同阶段(5、10和15天),用不同剂量的内生真菌培养液(2、4和6mL)分别进行处理。结果表明,在用4mL内生真菌培养液处理的植物细胞中可获得最高的紫杉醇产量(5.88mg.L-1)与释放率(67%),分别是对照的1.9倍与5.6倍。添加时间方面,在植物细胞培养周期的第5天添加4mL内生真菌培养液,可获得最佳效果,紫杉醇产量与释放率分别为6.1mg.L-1与75%,分别是对照的2倍与6.8倍。与其它诱导子相比,4mL内生真菌培养液不仅可提高紫杉醇的释放率,而且不会引起东北红豆杉细胞膜的明显伤害,说明内生真菌发酵液激活了紫杉醇主动运输过程中的相关酶类。
富营养化水体异味物质的臭氧氧化研究
缪恒锋,
环境科学 , 2008,
Abstract: 使用臭氧氧化技术,对无锡太湖富营养化水体中GC-MS检测到的6种目标异味化合物进行去除研究.结果表明,异味化合物臭氧化反应符合一级动力学反应方程,反应速率由不同化合物的化学性质和结构特点决定,由高到低排列为:β-紫罗兰酮(3.3×10-3s-1)>β-柠檬醛(2.8×10-3s-1)>2,4-癸二烯醛(2.7×10-3s-1)>香叶基丙酮(2.2×10-3s-1)>土味素(1.4×10-3s-1)>2-甲基异莰醇(5.6×10-4s-1).臭氧化反应产生一系列小分子醛、酮类物质和少量醇、酯类化合物.进一步研究发现,重碳酸盐可以阻碍臭氧氧化过程中的自由基反应途径,从而对臭氧氧化异味化合物产生抑制作用;水体中的溶解性有机物也能通过和臭氧的竞争性反应机制降低异味化合物的臭氧化反应速率.
bacilluspumiluswl-11木聚糖酶a的纯化、鉴定及其底物降解方式
许正宏, ??*
生物工程学报 , 2005,
Abstract: 对一株bacilluspumiluswl_11木聚糖酶的纯化、酶学性质及其底物降解模式进行了研究。经过硫酸铵盐析、cm_sephadex及sephadexg_75层析分离纯化,获得一种纯化的wl_11木聚糖酶a,其分子量为26.0kd,pi值9.5,以燕麦木聚糖为底物时的表观km值为16.6mgml,vmax值为12.63μmol(min·mg)。木聚糖酶a的ph稳定范围为60至104,最适作用ph范围则在7.2至8.0之间,是耐碱性木聚糖酶;最适作用温度为45℃~55℃,在37℃、45℃以下时该酶热稳定性均较好;50℃保温时,该酶活力的半衰期大约为2h,在超过50℃的环境下,该酶的热稳定较差,55℃和60℃时的酶活半衰期分别为35min和15min。wl_11木聚糖酶a对来源于燕麦、桦木和榉木的可溶性木聚糖的酶解结果发现,木聚糖酶a对几种不同来源的木聚糖的降解过程并不一致。采用hplc法分析上述底物的降解产物生成过程发现木聚糖酶a为内切型木聚糖酶,不同底物的降解产物中都无单糖的积累,且三糖的积累量都较高;与禾本科的燕麦木聚糖底物降解不同的是,木聚糖酶a对硬木木聚糖降解形成的五糖的继续降解能力较强。采用tlc法分析了wl-11粗木聚糖酶降解燕麦木聚糖的过程,结果表明燕麦木聚糖能够被wl-11粗木聚糖酶降解生成系列木寡糖,未检出木糖,这说明wl-11主要合成内切型木聚糖酶a,同时发酵液中不含木糖苷酶,适合用来酶法制备低聚木糖。
mdr1真核表达载体的构建及鉴定
赵福广,陈军,
吉林农业大学学报 , 2005,
Abstract: ?采用pcr技术扩增mdr1基因全长序列及胞外区约1kb片段,并定向克隆到pcdna3质粒载体cmv启动子序列下游的bamhⅰ和xhoⅰ限制性内切酶酶切位点之间。重组体经转化e.colijm109后可大量扩增,提取该重组体进行限制性内切酶分析,得到预期的目的片段,并且以重组体为模板,用特异性引物可扩增出mdr1基因的1kb片段。
响应面法在紫杉醇产生菌发酵前体优化中的应用
,,程龙
中国生物工程杂志 , 2007,
Abstract: 采用响应面法对美丽镰刀菌(fusariummaireik178)发酵合成紫杉醇途径中一些可能的前体进行优化研究。首先采用plackett-burman法对8个因素进行了筛选,结果表明,苯丙氨酸,苯甲酸钠和乙酸钠三个因素对紫杉醇产量影响较大。在此基础上,再通过box-behnken设计,利用design-expert软件进行二次回归分析,得到各因素的最佳浓度为:苯丙氨酸2.8mg/l,苯甲酸钠31.8mg/l,乙酸钠3.3g/l。在优化条件下紫杉醇的产量达到242.6μg/l,较前体单因素实验最高值提高15.6%。
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