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hbx-egfp-tlm融合蛋白表达载体的构建、蛋白表达纯化及活性检测
史晓燕?,张莹莹?,周晓巍?,,郭泽坤?,黄培堂?
生物工程学报 , 2011,
Abstract: 乙型肝炎病毒x蛋白(hbx)具有广泛的转录激活作用,但是由于细胞类型和实验条件的差异,外源启动子介导的hbx瞬时表达水平常表现出不均一性,为其功能的研究带来困难。为了解决hbx研究过程中遇到的这些难题,利用pcr扩增获得hbx及含转导肽tlm的egfp编码序列,经酶切后插入pgex-4t-1原核表达载体,成功构建重组质粒pgex-hbx-egfp-tlm和pgex-egfp-tlm。重组质粒转化大肠杆菌bl21(de3)感受态细胞,融合蛋白经iptg诱导表达,采用?ktatmpurifier蛋白纯化系统纯化并进行sds-page和westernblotting分析,确定为目的蛋白。将纯化后的融合蛋白分别与aml12和smmc-7721细胞共孵育,westernblotting和激光共聚焦显微镜检测证实tlm转导肽能够介导hbx-egfp和egfp进入细胞,同时进入细胞的hbx-egfp-tlm能够发挥转录激活活性,为hbx功能的深入研究奠定了基础。
Expression, purification, and bio-activity analysis of fusion protein HBx-EGFP-TLM
HBx-EGFP-TLM融合蛋白表达载体的构建、蛋白表达纯化及活性检测

Xiaoyan Shi,Yingying Zhang,Xiaowei Zhou,Jiansheng Lu,Zekun Guo,Peitang Huang,
史晓燕
,张莹莹,周晓巍,,郭泽坤,黄培堂

生物工程学报 , 2011,
Abstract: Hepatitis B virus X protein (HBx) has various functions and plays a crucial role in the development of hepatocellular carcinoma (HCC). However, due to different transfection efficiency levels and experimental approaches, it is difficult to correlate the exact functions of HBx to HBV-associated HCC. In this study, we constructed two prokaryotic expression vectors, pGEX-HBx-EGFP-TLM and pGEX-EGFP-TLM, which expressed HBx-EGFP-TLM and EGFP-TLM fusion proteins respectively. Both vectors contained a coding sequence of TLM transduction motif derived from the PreS2-domain of Hepatitis B Virus surface antigens. In addition, EGFP was expressed as a reporter reflecting the transduction efficiency of TLM. The fusion protein HBx-EGFP-TLM or EGFP-TLM purified from Escherichia coli BL21(DE3) by ?KTATM Purifier system was incubated with AML12 and SMMC-7721 cells. Both Western blotting and laser confocal results indicated that the translocation motif TLM could lead HBx-EGFP and EGFP into the cytoplasm. Dual-Luciferase Reporter Assay revealed that the activity of mEZH2 promoter could be up-regulated by the recombinant HBx. In conclusion, we expressed a cell-permeable HBx, which could provide a new method to study the functions of HBx.
麦乳精常见缺陷的浅析

食品科学 , 1984,
Abstract: ??<正>麦乳精系采用含有蛋白质、脂肪、碳水化合物、矿物质、维生素等动植物制品为原料,通过调制、乳化、脱气浓缩、真空干燥、轧粒、包装等工艺制成,为一种具有疏松多孔性的扁平颗粒和部分细粉产品,易溶于热水中,加水复原,即成为一种具有独特风味,并含有一定营养的饮料。
浅谈儿童食品宝宝乐的营养价值及其制造工艺

食品科学 , 1984,
Abstract: ??<正>为了更好地满足城乡人民物质生活的日益提高,解决儿童营养不良症,最近我厂在有关单位的大力协助下,试制成功了一种新颖的儿童高级营养饮料——宝宝乐。
新疆南部地区黑鹳种群密度及其繁殖
马鸣,
动物学研究 , 1993,
Abstract: 黑鹳(Ciconia nigra)为国家Ⅰ级保护动物。国内主要繁殖地见于山西(刘焕金等,1985,1990;苏化龙等,1989)、陕西(禹瀚,1963)、吉林(张兴录,1983)、新疆(魏顺德等,1990;马鸣等,1991) 等省区。笔者自1985-1989年多次前往新疆南部对黑鹳的分布及数量进行了调查,1989-1992年又在塔里木河流域的沙雅县帕满水库(41°00′N,83°10′E)定点观察黑鹳的集群和繁殖生态。发现了目前国内最大的黑鹳群栖地和重要的繁殖种群。
我国雁鸭类生态学研究的发展和展望
张志光,
动物学杂志 , 1987,
Abstract:
鱼类分类多样性估算方法在长江河口区的应用
张衡,
华东师范大学学报(自然科学版) , 2007,
Abstract: 2004~2006年采用各种网具对长江河口区进行鱼类调查,查阅了当前所有在该水域进行的鱼类调查资料,系统整理了长江河口区鱼类总名录,并计算了其分类多样性.结果表明,长江河口区鱼类共有305种,隶属2纲28目101科215属.其中,软骨鱼纲共5目12科14属22种;硬骨鱼纲共23目89科201属283种.依据总名录计算出其平均分类差异指数Δ+(79.9)和分类差异变异指数Λ+的理论平均值及95%置信漏斗曲线,Δ+值比黄海、渤海和东海鱼类均稍高.
能量生态学(五):维持生命运动能量的组分及估算

生态学杂志 , 1988,
Abstract: ?
能量生态学(一):绪论

生态学杂志 , 1987,
Abstract: ?
能量生态学(二):生物与其环境的热交换

生态学杂志 , 1987,
Abstract: ?
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