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维生素D3和他莫西芬对乳腺癌细胞凋亡影响
海滨,糜漫天
中国公共卫生 , 2008, DOI: 10.11847/zgggws2008-24-04-32
Abstract: ?目的研究受1,25二羟维生素D3调控的雌激素受体α表达载体联合他莫西芬对雌激素受体阴性乳腺癌细胞凋亡的影响及其机制。方法将本室构建的含有4个拷贝维生素D反应元件(VDRE)和胸苷激酶启动子(Tk)的VDRE-Tk-ERα表达载体转染到MDA-MB-231细胞中,利用免疫荧光法检测1,25二羟维生素D3对雌激素受体α(ERα)的诱导表达并通过末端原位法检测1,25二羟维生素D3联合他莫西芬诱导转染该表达质粒的MDA-MB-231凋亡诱导效应。用免疫印迹(Westernblot)法检测细胞核因子κB(NFκB)P65活性亚单位表达以及核转位情况的变化。结果1,25二羟维生素D3能够有效诱导MDA-M-231VDRE-ERα细胞内ERα的表达,在此基础上与他莫西芬联合作用较对照和单独作用组能够有效诱导该乳腺癌细胞发生凋亡。与此同时,NFκBP65活性亚单位的表达以及核转位均受到不同程度的抑制。结论利用1,25二羟维生素D3可通过靶控外源性雌激素受体α的表达进而调控NFκBP65活性亚单位的表达及活性,从而诱导细胞发生凋亡并最终恢复乳腺癌细胞对他莫西芬的化疗敏感性。
1,25二羟维生素D3靶控VDRE-ERα表达载体对MDA-MB-231细胞周期的影响
海滨,糜漫天
第三军医大学学报 , 2008,
Abstract: 目的探讨1,25二羟维生素D3靶控的雌激素受体α表达载体(VDRE-Tk-ERα)对雌激素受体阴性的MDA-MB-231乳腺癌细胞周期进程的影响及其机制。方法利用MTT法检测1,25二羟维生素D3联合他莫西芬对转染VDRE-Tk-ERα表达载体的MDA-MB-231细胞增殖能力的影响,通过流式细胞仪法检测1,25二羟维生素D3联合他莫西芬对转染该表达质粒的MDA-MB-231细胞周期相的分布。用RT-PCR、Westernblot和免疫沉淀法检测细胞Rb及其磷酸化水平、CyclinD1、CDK4的表达以及CyclinD1/CDK4激酶复合物的结合力变化。结果1,25二羟维生素D3联合他莫西芬能够有效抑制转染该质粒的MDA-MB-231细胞的增殖活性并将其细胞周期进程阻遏于G0/G1期。与此同时,CyclinD1的表达则显著降低,其与CDK4的结合力亦显著降低。Rb的表达虽无显著变化,但其磷酸化水平显著下降。结论1,25二羟维生素D3可通过靶控MDA-MB-231细胞内外源性雌激素受体α的表达进而对G1/S期相关分子的表达和活性进行调控从而阻止雌激素受体α阴性的乳腺癌细胞的周期进程并恢复对他莫西芬的化疗敏感性。
1,25二羟维生素D3联合他莫西芬对转染VDRE-Tk-ERα表达载体的MDA-MB-231细胞周期和凋亡的影响
海滨,糜漫天
第三军医大学学报 , 2006,
Abstract:
牛磺酸与大鼠视网膜代谢型谷氨酸受体基因表达
许红霞,糜漫天,朱俊东,海滨
中国公共卫生 , 2005, DOI: 10.11847/zgggws2005-21-07-19
Abstract: ?目的探讨膳食添加牛磺酸大鼠在光照和暗环境中视网膜代谢型谷氨酸受体6亚型(mGluR6)的mRNA表达的相互关系。方法36只断乳大鼠随机分为3组:对照组、牛磺酸低剂量组及牛磺酸高剂量组(分别在饲料中添加0.3%和0.6%的牛磺酸),营养干预4周后,再随机分为光照组和暗环境组,继续喂养3d。用RTPCR技术检测光照和暗环境下大鼠视网膜mGluR6的mRNA表达。结果暗环境下mGluR6的mRNA表达显著高于光照环境。在光照及暗环境中牛磺酸高、低剂量组mGluR6的mRNA表达均较对照组增加,以光照状态下的增加更为明显;光照时,高剂量组的mRNA表达明显高于低剂量组;暗环境下,高、低剂量组之间差异无统计学意义。结论在光照及暗环境中,牛磺酸可明显增加大鼠mGluR6的mRNA表达,有助于其参与调节视网膜的视杆信号传递。
胆固醇缺乏对Jurkat细胞蛋白酪氨酸激酶活性的影响
周东明,糜漫天,海滨,许红霞
中国公共卫生 , 2001, DOI: 10.11847/zgggws2001-17-04-06
Abstract: ?目的探讨胆固醇缺乏抑制Jurkat细胞增殖的分子机理.方法用间接免疫荧光法、3HTdR掺入及流式细胞术等方法,观察其对蛋白酪氨酸激酶(PTKs)信号传递系统的影响.结果经去脂血清培养基培养的Jurkat细胞加lovastatin处理3天后,3HTdR掺入率明显下降,细胞增殖受抑,细胞受阻于G0/G1期,细胞内酪氨酸磷酸化蛋白含量明显下降,加入LDL可以部分逆转上述变化.结论无论是内源性还是外源性胆固醇的缺乏都能使Jurkat细胞蛋白酪氨酸激酶活性下降,推测这一变化与细胞G0/G1期阻滞及细胞增殖受抑有关.
赫赛汀及9-顺式视黄酸对乳腺癌联合抑制作用
海滨,糜漫天,朱俊东
中国公共卫生 , 2008, DOI: 10.11847/zgggws2008-24-03-29
Abstract: ?目的探讨赫赛汀联合9-顺式视黄酸对ErbB2阳性乳腺癌细胞周期进程及分布的影响及其相应的分子机制。方法利用流式细胞仪检测经赫赛汀、9-顺式视黄酸单独和联合作用后,癌基因(ErbB2/neu)阳性的MDA-MB-453乳腺癌细胞周期进程和分布的变化。在此基础上,利用免疫印记和半定量PCR法对CDK2、CyclinE、P27的表达进行检测,同时利用免疫沉淀法检测CyclinE/CDK2结合力的变化。结果与对照组比较,一定剂量的赫赛汀和9-顺式视黄酸可将MDA-MB-453细胞的周期进程阻遏于G0/G1期从而抑制其增殖活性。经2者联合作用后,CyclinE、CDK2的表达较对照组均有所下降,其中以CDK2的变化最为明显,而P27蛋白表达则明显升高。同时,2者联合作用还能有效降低CyclinE/CDK2的结合能力。结论赫赛汀和9-顺式视黄酸可在体外分别通过改变CyclinE、CDK2和P27的表达和活性起到协同抑制HrbB2/neu阳性乳腺癌的目的。
三羟异黄酮对小鼠辐射损伤后造血功能的影响
周永,糜漫天,朱俊东,海滨
第三军医大学学报 , 2007,
Abstract: 目的探讨三羟异黄酮(genistein,GEN)对辐射损伤造血功能的影响。方法6.0Gyγ射线一次全身照射BALB/c雄性小鼠复制出造血损伤模型。照射前24h给予GEN灌胃(160mg/kg体质量),分别观察照射后1、3、7、14、21、30d不同时相点小鼠血清对粒单系集落形成单位(colony-formingunit-granulocyte/macrophage,CFU-GM)和红系集落形成单位(colonyformingunit-erythroid,CFU-E)的支持或抑制活性。结果辐射前24h给予GEN,辐射后该组小鼠血清造血刺激活性显著增加,使正常小鼠骨髓有核细胞CFU-GM、CFU-E形成数量明显增多,而且对CFU-GM的刺激活性较CFU-E强。同时,该组小鼠照后血清对CFU-GM、CFU-E的抑制活性明显降低,但对CFU-E和CFU-GM的抑制活性差异不明显。结论提高辐射损伤后小鼠血清刺激活性可能是GEN防护放射性造血损伤、促进受损造血系统重建的分子机制之一。
赫赛汀和9-顺式视黄酸联合用药对HER2阳性荷瘤鼠乳腺癌细胞的抑制效应
海滨,糜漫天,朱俊东
第三军医大学学报 , 2008,
Abstract: 目的探讨赫赛汀和9-顺式视黄酸单独和联合用药对HER2阳性乳腺癌细胞周期进程的体内协同抑制效应及其分子机制。方法将处于对数生长期的MCF-7HER2细胞皮下注射到BALB/c裸鼠体内,用赫赛汀和9-顺式视黄酸分别单独和联合处理裸鼠移植瘤模型20d,测量各组裸鼠移植瘤的体积大小。利用免疫印记法检测移植瘤细胞HER2、P27、CyclinE和CDK2蛋白的表达变化。结果赫赛汀和9-顺式视黄酸联合作用组较对照和单独作用组能显著减小HER2阳性乳腺癌细胞裸鼠移植瘤的体积,二者联合运用还能在体内显著改变荷瘤鼠癌细胞HER2、P27、CyclinE和CDK2的表达。结论联合应用赫赛汀和9-顺式视黄酸可在体内通过对细胞周期相关蛋白的表达进行调控从而达到协同抑制HER2阳性乳腺癌细胞的作用。
Herceptin和9-顺式视黄酸对MDA-MB-453乳腺癌细胞协同抑制作用的研究
柴雅明,糜漫天,海滨
第三军医大学学报 , 2006,
Abstract:
牛磺酸影响视网膜谷氨酸、γ-氨基丁酸含量
黄国荣,糜漫天,许红霞,海滨,周东明
中国公共卫生 , 2003, DOI: 10.11847/zgggws2003-19-12-16
Abstract: ?目的探讨在不同光照状态及膳食添加牛磺酸时,血浆及视网膜牛磺酸、谷氨酸(Glutamate,Glu)、γ-氨基丁酸(γ-aminobutyric,GABA)含量的变化。方法将断乳大鼠随机分为3组:对照组、牛磺酸低剂量组、牛磺酸高剂量组,在大鼠饲料中添加牛磺酸,营养干预4周后,用氨基酸分析仪检测光照及暗适应时血浆及视网膜中牛磺酸、Glu、GABA的含量。结果暗适应后,视网膜牛磺酸含量下降,Glu含量升高,GABA含量无改变。膳食添加牛磺酸后,血浆及视网膜牛磺酸含量升高,光照时的视网膜Glu含量增加,暗适应时的视网膜Glu含量下降;光照及暗适应时的视网膜GABA含量均增加。结论视网膜牛磺酸、Glu含量与光照状态有关,GABA含量与光照状态无关,牛磺酸可能通过调节视网膜Glu、GABA含量而调制视网膜信号传递
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