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人工合成的黑曲霉NRRL3135菌株植酸酶基因在毕赤酵母系统中的高效表达
,,杨林,,,
生物工程学报 , 2001,
Abstract: 本文以黑曲霉(Aspergillus niger)NRRL3135菌株植酸酶基因为对象,通过基因人工合成的方法去除了该基因的内含子与信号肽编码序列,换用在毕赤酵母(Pichia pastoris)中使用频率较高的密码子以优化其表达。该人工合成植酸酶基因(PhyA-as)以N端融合的方式正确插入到毕赤酵母表达载体pPICZαA。通过电击将重组表达载体整合入酵母染色体DNA中得到重组转化子。SDSPAGE结果与表达产物酶学性质研究表明植酸酶得到分泌表达,且与天然产物性质基本一致。筛选得若干株高产基因工程菌,其中SPANⅢ菌株达到了在摇床培养条件下,每毫升发酵液产生165000u植酸酶的水平,基本满足工业化生产的要求。
人工合成的黑曲霉nrrl3135菌株植酸酶基因在毕赤酵母系统中的高效表达
* 杨林
生物工程学报 , 2001,
Abstract: 本文以黑曲霉(aspergillusniger)nrrl3135菌株植酸酶基因为对象,通过基因人工合成的方法去除了该基因的内含子与信号肽编码序列,换用在毕赤酵母(pichiapastoris)中使用频率较高的密码子以优化其表达。该人工合成植酸酶基因(phya-as)以n端融合的方式正确插入到毕赤酵母表达载体ppiczαa。通过电击将重组表达载体整合入酵母染色体dna中得到重组转化子。sdspage结果与表达产物酶学性质研究表明植酸酶得到分泌表达,且与天然产物性质基本一致。筛选得若干株高产基因工程菌,其中spanⅲ菌株达到了在摇床培养条件下,每毫升发酵液产生165000u植酸酶的水平,基本满足工业化生产的要求。
两纯系鸡胃肠道黏膜细菌l6srdna的pcr-dgge分析比较
张洁,容庭,刘志昌,,林海丹,,
牲畜兽医学报 , 2013,
Abstract: ?以1日龄纯系的优质肉鸡a系(♂,a组)和惠阳胡须鸡(♂,b组)为实验动物,研究比较两纯系鸡1~28日龄胃肠道黏膜细菌微生物丛组成与动态变化特点。采用l6srdnav3pcrdgge的方法,分析第1、3、7、14、21、28日龄2组鸡胃肠道黏膜细菌基因组dna。dgge图谱中显示,28日龄2组鸡回肠泳道的条带数差异明显,嗉囊、腺胃及盲肠黏膜菌群结构的相似性均大于70%,十二指肠与空肠的相似性分别为40%和44%,回肠仅18%;21~28日龄2组鸡回肠黏膜菌群结构发生变化的程度不同,a组的动态变化值(%change)为70%,而b组仅11%。优质肉鸡a系和惠阳胡须鸡28日龄回肠黏膜菌群结构存在明显差异,这种差异可能是宿主遗传的影响所致,同时也是影响肉鸡生产性能的可能原因。
应用兔抗大熊猫免疫球蛋白g血清探讨大熊猫的分类地位
希成,显川,,郑昌学,,叶掬群
兽类学报 , 1989,
Abstract: ?从大熊猫血清中纯化出免疫球蛋白(igg),以此作为抗原免疫家兔,获得兔抗大熊猫igg血清。以黑熊、小熊猫、狗、猫等动物血清为抗原,兔抗大熊猫igg血清为抗体.进行了免疫扩散和微量免疫电泳实验。实验结果表明,收集的食肉目动物:黑熊、小熊猫、狗、猫的血清都可与兔抗大熊猫gig血清进行沉淀反应,其中尤以黑熊的反应最强且与大熊猫的反应沉淀线完全融合;小熊猫、狗、猫反应较弱且融入大熊猫反应沉淀线后形成树板状。从此看出大熊猫lgg与黑熊的igg最相似,从亲缘关系上讲,二者更为接近,大熊猫反应属熊科。
黄牛同期发情和超数排卵及取卵时间的研究
,, 徐少甫 , , 杜福良 ,
扬州大学学报(农业与生命科学版) , 1991,
Abstract: ????本地黄牛24头,利用二次PG(15-甲基前列腺素F2a)调整,进行同期发情,3个不同剂量组的效果表明:中等剂量每次5支(7.2mg)的效果较好达87.5%。不同年龄组比较发现:2.5~4.5岁黄牛同期发情效果(89%)明显高于4.5~8.5岁黄牛(57%)。进一步利用PMSG(孕马血清)超排处理表明:反应良好、一般,无反应各占1/3,且以3~5岁牛超排效果好;分析超排牛的排卵规律发现:排卵5个以上的牛排卵相对集中,排卵持续时间约在24h左右。进一步对卵子发育情况加以分析,发现要取到原核期前的受精卵,取卵时间宜在最后一次PG后74~76h或出现发情后的26~40h。且以后者推算为佳。
西咪替丁对0.7Gy照射小鼠嗜多染红细胞微核的保护作用
张俊,何颖,庆蓉,李娜,定文,侯登,刘玉明,,刘琼,李珂娴,,李佳媚,沈先荣
解放军医学杂志 , 2015,
Abstract: [摘要] 目的 选择辐射敏感指标(骨髓嗜多染红细胞微核率)评价西咪替丁对单次低剂量照射小鼠的损伤防护作用。方法 健康雄性C57BL/6小鼠48只,随机分为正常对照组、模型对照组、200mg/kgWR2721组(阳性药组)及7.5、15、30mg/kg西咪替丁组(n=8)。西咪替丁组于照射前2h腹腔注射给药1次,阳性药组照射前连续腹腔注射给药2d,每日1次。单次照射剂量为0.7Gy,剂量率为5.83mGy/min。照射后24h检测小鼠外周血象,血清和肝脏中的SOD活力与MDA含量,骨髓DNA含量和骨髓嗜多染红细胞微核率。结果 与正常对照组比较,照后24h小鼠外周血白细胞显著降低(P<0.01),嗜多染红细胞微核率显著升高(P<0.01),除15mg/kg西咪替丁组外,其余各组小鼠骨髓DNA含量显著降低(P<0.01,P<0.05)。照后24h各组小鼠SOD活性和MDA含量无明显变化。与模型对照组比较,西咪替丁各剂量组外周血白细胞和骨髓DNA含量均无明显变化;7.5mg/kg西咪替丁组嗜多染红细胞微核率为0.027‰,明显低于模型对照组(P<0.01),且剂量减低系数(DRF)值达到3.338。结论 西咪替丁对0.7Gy单次低剂量照射小鼠嗜多染红细胞微核有较好的保护作用。
富铈混合稀土对压铸AZ81合金组织和性能的影响
朱志兵,思远,,德平,慧敏
重庆大学学报 , 2007, DOI: 10.11835/j.issn.1000-582X.2007.02.006
Abstract: 为开发铸造性能优越、成本低廉、中温性能略有改善,并能满足摩托车曲轴箱服役环境的新型镁合金提供材料基础,通过往AZ81合金中添加富铈混合稀土,考查稀土对压铸镁合金AZ81组织和性能影响.结果表明:少量加入稀土能起晶粒细化和固溶强化作用;随加入量增大,稀土以晶界和穿晶条状脆性相存在,对合金强度的损伤作用大于强化作用.因此,压铸AZ81的常温和150℃抗拉强度和屈服强度随稀土加入量的增加先略有提高,然后持续降低;室温延伸率随稀土加入量增加而连续下降,对150℃温度下的延伸率无明显影响;但富铈混合稀土的加入显著提高合金的蠕变抗力.
大尺寸螺线管线圈的磁轴控制技术
代志,树清,刘云龙,谢宇彤,永伟,,
强激光与粒子束 , 2013,
Abstract: ?从匀场环结构参数优化设计、线圈线包材料规格的选择、绕制工艺探索、超大幅面二极校正线圈研制、全新准直方法的磁轴检测技术等多方面研究大尺寸螺线管线圈的磁轴控制技术。突破了磁轴倾斜小于等于1mrad的技术指标,成功研制出磁轴倾斜小于等于0.5mrad的大尺寸聚焦线圈,解决了其中的关键单元部件研制的核心技术问题。
不同肥料对酸浆产量和品质的影响
 ,欣梅,, 典
北方园艺 , 2010, DOI: 10.11937/bfyy.201017020
Abstract:
伪狂犬病病毒鄂a株囊膜蛋白gd基因在杆状病毒载体系统中的表达研究
陈新华?,杨林,綮新?,,曲侯?,洪文洲?,焕春?
生物化学与生物物理进展 , 2002,
Abstract: 克隆了伪狂犬病病毒鄂a株囊膜蛋白gd基因并进行了序列分析,与国际标准毒株rice株相比,两者之间核苷酸序列同源性为98%,推导氨基酸序列同源性为97%.利用杆状病毒gst融合载体系统对其进行了高效表达,sds-聚丙烯酰胺凝胶电泳及蛋白质印迹均证明了表达产物为71ku的gst-gd融合蛋白,其产量占细胞不溶蛋白量的20%左右.以gst-gd融合蛋白作为抗原进行小鼠免疫保护实验,结果表明表达的gst-gd融合蛋白具有较好的免疫原性,不仅能诱导小鼠产生血清抗体(1∶128),还能部分地保护小鼠免受伪狂犬病病毒su强毒株的攻击.
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