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人工合成的黑曲霉NRRL3135菌株植酸酶基因在毕赤酵母系统中的高效表达
,陈庄,杨林,廖玲,王棻章,蒋宗勇
生物工程学报 , 2001,
Abstract: 本文以黑曲霉(Aspergillus niger)NRRL3135菌株植酸酶基因为对象,通过基因人工合成的方法去除了该基因的内含子与信号肽编码序列,换用在毕赤酵母(Pichia pastoris)中使用频率较高的密码子以优化其表达。该人工合成植酸酶基因(PhyA-as)以N端融合的方式正确插入到毕赤酵母表达载体pPICZαA。通过电击将重组表达载体整合入酵母染色体DNA中得到重组转化子。SDSPAGE结果与表达产物酶学性质研究表明植酸酶得到分泌表达,且与天然产物性质基本一致。筛选得若干株高产基因工程菌,其中SPANⅢ菌株达到了在摇床培养条件下,每毫升发酵液产生165000u植酸酶的水平,基本满足工业化生产的要求。
两纯系鸡胃肠道黏膜细菌l6srdna的pcr-dgge分析比较
张洁,容庭,刘志昌,王刚,林海丹,,陈庄
牲畜兽医学报 , 2013,
Abstract: ?以1日龄纯系的优质肉鸡a系(♂,a组)和惠阳胡须鸡(♂,b组)为实验动物,研究比较两纯系鸡1~28日龄胃肠道黏膜细菌微生物丛组成与动态变化特点。采用l6srdnav3pcrdgge的方法,分析第1、3、7、14、21、28日龄2组鸡胃肠道黏膜细菌基因组dna。dgge图谱中显示,28日龄2组鸡回肠泳道的条带数差异明显,嗉囊、腺胃及盲肠黏膜菌群结构的相似性均大于70%,十二指肠与空肠的相似性分别为40%和44%,回肠仅18%;21~28日龄2组鸡回肠黏膜菌群结构发生变化的程度不同,a组的动态变化值(%change)为70%,而b组仅11%。优质肉鸡a系和惠阳胡须鸡28日龄回肠黏膜菌群结构存在明显差异,这种差异可能是宿主遗传的影响所致,同时也是影响肉鸡生产性能的可能原因。
人工合成的黑曲霉nrrl3135菌株植酸酶基因在毕赤酵母系统中的高效表达
* 陈庄 杨林 廖玲 王棻章 蒋宗勇
生物工程学报 , 2001,
Abstract: 本文以黑曲霉(aspergillusniger)nrrl3135菌株植酸酶基因为对象,通过基因人工合成的方法去除了该基因的内含子与信号肽编码序列,换用在毕赤酵母(pichiapastoris)中使用频率较高的密码子以优化其表达。该人工合成植酸酶基因(phya-as)以n端融合的方式正确插入到毕赤酵母表达载体ppiczαa。通过电击将重组表达载体整合入酵母染色体dna中得到重组转化子。sdspage结果与表达产物酶学性质研究表明植酸酶得到分泌表达,且与天然产物性质基本一致。筛选得若干株高产基因工程菌,其中spanⅲ菌株达到了在摇床培养条件下,每毫升发酵液产生165000u植酸酶的水平,基本满足工业化生产的要求。
重组毕赤酵母植酸酶N-糖基化位点质谱鉴定
Identification of N-glycosylation sites of recombinant phytases from Pichia pastoris by mass spectrometry

张 琪,吴秀菊,俞 婷,王志林,崔百元,朱庆锋,
ZHANG Qi
,WU Xiuju,YU Ting,WANG Zhilin,CUI Baiyuan,ZHU Qingfeng,BEI Jinlong

- , 2018,
Abstract: 为系统评估重组毕赤酵母植酸酶的N-糖基化充分性,建立了一种通过联用高效液相色谱-串级质谱来分析植酸酶氨基酸序列及N-糖基化位点的技术.分别发酵了3株基因组已整合不同植酸酶基因的毕赤酵母.发酵液上清经离子交换与凝胶过滤后获得纯化的植酸酶.使用PNGase F或Endo H脱糖基化酶处理植酸酶后,用胰蛋白酶消化脱糖基化产物.通过纳升级高效液相色谱分离胰蛋白酶切产生的肽段混合物.并在联用的串级质谱上进行肽段测序与N-糖基化位点鉴定.结果显示3种植酸酶蛋白的可检测序列覆盖率均在69%以上,且与文献报道不同,均存在糖基化位点修饰不充分的现象.本实验结果证明了高效液相色谱-串级质谱联用法检测植酸酶N-糖基化位点的有效性,并为植酸酶的糖基化研究提供了新的基础.
铅蓄电池厂污染土壤中重金属铅的清洗及形态变化分析
,,苗明升
环境科学 , 2013,
Abstract: 以我国西南某铅蓄电池厂区内不同污染负荷的铅污染土壤为研究对象,对其中铅含量和形态进行分析,并利用不同清洗剂清洗进行筛选.对不同pH条件下铅的清洗效率和铅形态进行分析,并对不同粒径土壤进行不同时间清洗以确定最佳清洗时间.结果表明,厂区内A和B点土壤污染严重,分别达到15703.22mg·kg-1和1747.78mg·kg-1,活动态铅比例较大,残渣态仅占17.32%、11.64%、14.6%和10.2%.EDTA、盐酸、柠檬酸、鼠李糖脂和SDS这5种清洗剂中EDTA和盐酸的提取效果最好.酸性条件下的清洗不仅能有效地提取铅总量并能有效地减小铅活动态的环境风险,建议pH4~7最为合适.粗沙粒和细沙粒的清洗效果较好,清洗粉黏粒建议改进工艺,清洗时间定为240min效果最好.
山东沂沭地区幔源矿物中的流体和稀有气体地球化学研究

中国科学 地球科学 中国科学 地球科学 , 2005,
Abstract: ?幔源物质中的流体和稀有气体是地幔信息的重要示踪剂.利用热爆裂法和熔融法分别测试了山东沂沭地区新生代玄武岩中二辉橄榄岩包体的流体和稀有气体同位素组成,结果表明,其流体组成以CO2、CO、H2等为主,三者约占流体总量的90%以上,与中国东部其他地区幔源包体的研究结果类似;3He/4He比值主要介于0.82~2.74Ra,40Ar/36Ar=299.5~758.8,均远低于大洋中脊玄武岩等典型上地幔样品值,主要反映了大气和部分放射成因组分的影响.沂沭地区幔源矿物的C/3He=(27.6~1050)×109,N2/Ar=927~56612,N2/3He=(2.5~27)×109,与受板块俯冲影响的美国西部、新西兰等地区幔源流体类似,在多种综合图解上均位于地幔-地壳-大气源区之间,反映大气和富有机组分的地壳物质的影响.上述结果表明,研究区幔源矿物流体和稀有气体同位素的组成可能反映了岩浆喷出过程或喷出后的变化,也可能与古俯冲板块对该区陆下地幔的影响有关.
地球观测数据卫星分发系统发展综述

地球科学进展 , 2012, DOI: 10.11867/j.issn.1001-8166.2012.07.0712
Abstract: 地球观测数据卫星分发系统(GEONETCast)借助通信卫星,把从地面站点、航空和航天平台获取的观测数据、产品传送给广大的用户。GEONETCast当前由CMACast,EUMETCast和GEONETCastAmericas3个区域系统组成,作为地球观测组织(GEO)提出的全球综合地球观测系统(GEOSS)的全球地球观测数据和信息卫星分发系统,旨在满足9个社会受益领域的用户需求。GEONETCast建立在现有区域系统之上,利用GEO的协调机制,共同确定GEONETCast系统的整体计划和要求。各区域系统在科研项目和业务建设的支持下,不断发展完善。未来要保障GEONETCast健康、良性和可持续的业务运行,还需要加强4个方面的工作①区域系统之间的互相通信;②保持GEONETCast的开放性和动态性,发展更多的数据提供者提供地球观测数据;③发展更多的数据使用者;④数据政策。
日本氢能源技术发展动向及启示

全球科技经济瞭望 , 2015,
Abstract: 本文分析了氢能源技术优势和发展前景以及目前面临的困难和问题;阐述、对比了日本及一些发达国家推进氢能源技术研究与应用的做法;对日本大力推进氢能技术研发与应用的背景和原因进行了分析和概括;提出了应由国家主导、加大投入、加强国际合作、通过官民共同努力,推进我国氢能源技术研发与推广的建议。
日本下一代汽车技术研发新动向

全球科技经济瞭望 , 2014,
Abstract: 目前,被称为下一代汽车终极车型――零排放燃料电池车和综合运用 IT系统的自动驾驶技术是日本重点推进的领域。2013年以来,由于政府的支持和几大汽车厂家的通力协作,日本燃料电池车技术研究与推广呈现全面加速的新动向:汽车厂家对燃料电池车的研发由“各自为政”转向“合作创新”,燃料电池催化剂研发取得新进展,丰田、日产和本田均筹划在 2015年前后推出燃料电池车,政府在税收、基础设施建设、技术标准等方面倾力支持,自动驾驶技术研发取得阶段性突破。日本政府与其汽车企业通力协作的做法,值得我们借鉴。
日本治理大气污染的主要做法及其启示

全球科技经济瞭望 , 2013,
Abstract: 通过分析、阐述日本治理人为大气污染源的具体做法和措施,以及介绍日本大气质量监测管理体 系和信息发布情况,可以了解到:日本政府坚持污染治理原则,严格执法,加强技术开发,推动全社会共同参与,实现了污染治理和经济增长的同步发展。日本治理大气污染的成功经验,值得借鉴和吸收。
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