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酿酒酵母3-磷酸甘油脱氢酶的诱导、提纯和性质

菌物学报 , 1996,
Abstract: 在YEPD培养基中添加NaCl,可以诱导酿酒酵母(Saccharomycescerevisiae)细胞内3-磷酸甘油脱氢酶的形成,当NaCl浓度达5%时,酶比活从0.05U/mg提高到0.5U/mg;若再限制培养基中葡萄糖浓度在100mg/L以下,酶比活可达到0.89U/mg。酶比活与培养基中的NaCl浓度的函数关系式为:Sa-0.129C3-0.038C2+0.034C+0.063(O≤C≤5%)。粗酶液经SephadexG一25凝胶过滤,BlueSepharose亲和层析以及MonoQ离子交换等步骤,提纯123.6倍,得纯酶液。经SDS一凝胶电泳测得分子量为45000±2000。酶的最适温度为51℃,最适pH值为6.8。保温30分钟的半失活温度(t1/2)为41℃。NADH和DHAP的Km(mmol/L)值分别为:0.0177和0.134。
INDUCED FORMATION, PURIFICATION AND PROPERTIES OF GLYCEROL-3-PHOSPHATE DEHYDROGENASE FROM SACCHAROMYCES CEREVISIAE
酿酒酵母3-磷酸甘油脱氢酶的诱导、提纯和性质

Cai Jingmin,

菌物学报 , 1996,
Abstract: 在YEPD培养基中添加NaCl,可以诱导酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)细胞内3-磷酸甘油脱氢酶的形成,当NaCl浓度达5%时,酶比活从0.05U/mg提高到0.5U/mg;若再限制培养基中葡萄糖浓度在100mg/L以下,酶比活可达到0.89U/mg。酶比活与培养基中的NaCl浓度的函数关系式为:Sa-0.129C3-0.038C2+0.034C+0.063(O≤C≤5%)。粗酶液经Sephadex G一25凝胶过滤,Blue Sepharose亲和层析以及Mono Q离子交换等步骤,提纯123.6倍,得纯酶液。经SDS一凝胶电泳测得分子量为45 000±2 000。酶的最适温度为51℃,最适pH值为6.8。保温30分钟的半失活温度(t1/2)为41℃。NADH和DHAP的Km(mmol/L)值分别为:0.0177和0.134。
海洋真菌LD8岩藻多糖酶的固态发酵条件研究
吴茜茜,,吴克,秦松
海洋科学 , 2004,
Abstract:
微生物代谢环境难降解性有机物的酶学研究进展
吴克?,潘仁瑞?,,刘斌?
生物工程学报 , 2009,
Abstract: 随着人类社会的快速发展,工业化水平不断提高,产生大量的污染物并排放到环境中,给人类的生活和身体健康造成了严重的影响。这些污染物中包含种类繁多的难降解有机物,如多芳香烃(pahs)、环硝胺类物质(rdx、hmx和cl-20)、多氯联苯(pcbs)及烷烃类化合物等,对自然界的污染危害大。微生物可以消除它们对污染的影响,研究结果表明微生物的代谢或共代谢活动是降解这些物质的有效途径,降解起始阶段需要一些关键酶的参与活动,以氧化还原酶为主。这些氧化还原酶一般与细胞膜上其他的活性组分在一起,形成一个氧化还原系统氧化底物。被氧化的中间物质再通过一系列酶催化继续氧化成三羧酸中间代谢产物被微生物所利用。以下综述了与这些物质降解相关的代谢途径和关键的酶,展望今后在开展这类研究工作时要加强降解微生物的筛选和相关酶学的研究,进一步研究这些污染物的代谢或共代谢途径和机理,为工程化治理环境污染提供依据。
XYLANASE PREPARATION AND PROPERTIES FROM ASPERGILLUS NIGER
黑曲霉A3菌株木聚糖酶粗酶制剂的制备和性质

Wu Ke Cai,Jingmin Pan Renrui,
吴克
,,潘仁瑞

微生物学通报 , 1997,
Abstract: The production process of xylanase of solid-state fermentation from Aspergillus nigerwas studied. The maximum enzyme activity can be obtained when the fungus wat cultured for 3days. The ratio between the solid culture and the extracting agent was about 1:7(w / v). Thesaturation condition of (NH4)2SO4 is the range from 6O%~65%. Two kinds of xylanase enzymepowder were obtained by both freezer drying and at 40C heating drying, and the rate of recovery71% and 51% were respectively. The highest xylanase activity has about l5400u / g by freeerdrying, 15395u / g by heating drying. The related properties of enzyme were analysed. the optimaltemperature is 55t and pH is 4.6. Th tempetatUre for 1oss half achvity(t l / 2) in a hour is 54t.Among the four kinds of hemicellulose, the strongest and the weakest hydrolytic affinity ofxylanase are wheat bran and rice straw respectively.
龟裂链霉菌原生质体的形成和再生
王金发,陆军,武文,,李能树,周渝梅
遗传 , 1986,
Abstract: 微生物原生质体形成、再生和融合技术已广泛用于遗传学研究和工业微生物杂交育种。1978年,Batlz进行了弗氏链霉菌和灰褐链霉菌的原生质体融合,得到了稳定的重组体;1982年Thomspon等通过原生质体转化,将载有抗性及营养基因的重组DNA片段在链霉菌中进行了克隆。近年来,我国在这方面的研究也取得了一些进展。
黑曲霉A3木聚糖酶酶学性质研究*
吴克,,刘斌,丁佐龙,张洁,潘仁瑞,钱芳
菌物学报 , 2000,
Abstract: 黑曲霉A3(AspergillusnigerA3)的固体培养物浸出液,经过多步分离纯化后,获得三个组份的木聚糖酶,称为xⅠ、xⅡ和xⅢ。经7%凝胶浓度的盘状电泳分析均为单一组份。经等电聚焦电泳测xⅠ、xⅡ和xⅢ的等电点分别为6.8、5.5和6.1。SDS-PAGE测得亚基分子量(Da)分别为xⅠ,42000;xⅡ,20000;xⅢ,3000。三个酶组份的最适反应温度分别为xⅠ,40℃I;xⅡ,50℃;xⅢ,50℃。最适反应pHxⅠ,3.5;xⅢ,4.5;xⅢ,5.0。保温一个小时后,酶的半失活温度分别为xⅠ,55.6℃;xⅡ,54.8℃;xⅢ,46.6℃。金属离子Ag+、Hg2+、Ni2+和脲对不同的酶组份具有一定的影响。
海洋真菌Fusarium sp.LD8岩藻多糖酶的液态发酵条件研究
吴茜茜,吴克,张洁,谭建新,潘仁瑞,
菌物学报 , 2006,
Abstract: 通过对海洋真菌Fusarium sp.LD8产岩藻多糖酶发酵培养基组成及工艺条件的研究,得到较优培养基配方为:麸皮5%,海带粉2%,(NH4)2SO40.8%。以人工海水代替蒸馏水,接种量为3%,在恒温振荡器中以180r/min的速度振荡培养,岩藻多糖酶活可达2.10IU/mL。
木霉菌株T6木聚糖酶固态发酵条件和酶学性质研究*
吴克,,刘斌,张洁,潘仁瑞
菌物学报 , 2001,
Abstract: 研究了碳源和氮源、起始pH、接种量及温度等条件对一野生型木霉Trichoderma sp.T6菌株固态发酵产木聚糖酶的影响。在28℃培养4d后,酶活力可达1918IU/g干培养物。酶的最适反应温度为50℃,最适反应pH4.5。不同温度保温1h后,测定酶的半失活温度为47.7℃,酶的pH稳定性也进行了研究。
固态混合发酵提高木聚糖酶和纤维素酶活力的研究
胡奎娟,吴克,潘仁瑞,刘斌,
菌物学报 , 2007,
Abstract: 研究了接种比例、接种时间、碳源、氮源等因素对木霉和黑曲霉混合发酵产木聚糖酶和纤维素酶的影响。试验结果表明,当木霉和黑曲霉按4:6同时接种,以玉米芯3.75g、麸皮3.75g、葡萄糖37.5mg为混合碳源,Mandels营养盐11.5mL、添加NH4NO37.5mg为氮源,在84h产纤维素酶活力达到230IU/g干物质,木聚糖酶活力达到1308IU/g干物质,与两菌纯培养相比,纤维素酶活力提高163%,木聚糖酶活力提高79.5%。
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