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基于四氧杂四烯衍生物荧光增强的苯酚传感器
龙立平,王柯敏,杨荣华,小海
分析化学 , 2002,
Abstract: 苯酚对固定在增塑的聚氯乙烯(PVC)敏感膜中的2,2,7,7,12,12,17,17-八甲基-21,22,23,24-四氧杂四烯(TOE)有可逆荧光增强作用,据此研制了测定水溶液中苯酚含量的荧光化学传感器.该敏感膜最佳组成为:50mgPVC、100mg癸二酸二异辛脂(DOS)、1.5mgTOE.该传感器在pH7.4的Tris/HCl缓冲溶液中,对苯酚的线性响应范围为4.47×l0-6~4.17×10-3mol/L;检出限为6.30×l0-7mol/L;其响应时间小于30s.该传感器具有良好的重现性、可逆性和选择性,常见阴离子和阳离子不干扰测定.该传感器应用于工业废水中苯酚含量的测定,结果满意.
荧光熄灭的苦味酸光化学传感器
龙立平,王柯敏,杨荣华,小海
分析化学 , 2003,
Abstract: 苦味酸对固定于聚氯乙烯(PVC)膜中的N,N′-二苄基-3,3′,5,5′-四甲基联苯二胺(TMBD)有可逆荧光猝灭作用,据此研制成测定苦味酸浓度的荧光化学传感器.该传感器敏感膜最佳组成为:50mgPVC、100mg癸二酸二异辛脂(DOS)和6.0mgTMBD.在0.12mol/LH2SO4底液中测定苦味酸,其线性响应范围为2.10×10-7~4.00×10-4mol/L,检出限为7.8×10-8mol/L,其响应时间小于40s.该传感器具有良好的重现性、可逆性和选择性,其它常见阴离子和阳离子不干扰测定.本方法用来直接测定合成水样中的苦味酸及间接测定药物辛可宁的含量,结果与文献方法一致.
基于分子信标定量检测肿瘤细胞p21mRNA表达变化
刘斌,小海,王柯敏,谭蔚泓
化学学报 , 2010,
Abstract: 根据p21基因序列设计合成特异性检测p21mRNA的分子信标,发展了一种体外快速、定量检测p21mRNA的新方法,将其用于肿瘤细胞p21mRNA表达水平的检测.结果发现抑制p53表达引起CNE2细胞中p21mRNA表达水平降低,转染ING1诱导MCF-7细胞中p21mRNA表达上调,5-氟尿嘧啶处理MCF-7细胞后p21mRNA表达水平呈浓度和时间相关性变化.这种特异性强、操作快速、简便的新方法有望广泛用于各类样品中p21mRNA表达水平检测.
基于自组装多层膜的葡萄糖表面等离子体共振传感器
小海,黎振华,王青,王柯敏
化学学报 , 2007,
Abstract: 利用伴刀豆球蛋白A和糖类的特异性相互作用,研制了葡萄糖表面等离子体共振传感器.传感器的敏感膜是构建于金膜表面的伴刀豆球蛋白A/葡聚糖自组装多层膜.在葡萄糖的存在下,该自组装多层膜被分解,引起表面等离子体共振信号的显著变化,信号变化的大小与葡萄糖的浓度相关.结果表明,利用该传感器可以选择性地检测0.1~50mmol?L-1浓度范围内的葡萄糖,且敏感膜可以多次再生使用.
一维微流控微珠阵列芯片用于肿瘤转移相关基因表达谱检测
文建辉,小海,王柯敏,左新兵,张何
科学通报 , 2007,
Abstract: 基于一维微流控微珠阵列芯片,通过在微珠表面进行核酸功能化修饰,发展了一种新型的肿瘤转移相关基因检测平台.该芯片灵敏度高(DNA检测下限为0.02nmol/L),无需扩增即可直接对多种基因mRNA进行同时检测.以来源于同一病人大肠腺癌的原发癌和转移癌细胞为研究对象,成功地对两种癌细胞中多个肿瘤转移相关基因转录水平的表达进行了检测,并用RT—PCR验证了该芯片的检测结果.结果表明,该芯片具有样品及试剂消耗极小、灵敏度高、分析速度快、成本低等优点,并且可以实现高通量分析,在肿瘤转移早期诊断及机理研究等方面具有重要的应用价值.
硫代修饰分子信标用于活细胞内mRNA的检测
唐红星,小海,王柯敏,谭蔚泓,李伟
科学通报 , 2008,
Abstract: 采用细胞成像的方式,使用硫代修饰分子信标对转染GFP基因前后活细胞内靶GFPmRNA进行了实时检测.结果表明,硫代修饰既可保持分子信标高选择性、高灵敏度以及无需对多余探针洗脱的优点,同时也可提高其抵御核酸酶降解的能力.因此,分子信标进行细胞内mRNA研究时,硫代修饰可有效消除假阳性信号的产生,提高检测结果的准确性.
一维微流控微珠阵列芯片用于肿瘤转移相关基因表达谱检测
文建辉,小海,王柯敏,左新兵,张何
科学通报 , 2007,
Abstract: 基于一维微流控微珠阵列芯片,通过在微珠表面进行核酸功能化修饰,发展了一种新型的肿瘤转移相关基因检测平台.该芯片灵敏度高(DNA检测下限为0.02nmol/L),无需扩增即可直接对多种基因mRNA进行同时检测.以来源于同一病人大肠腺癌的原发癌和转移癌细胞为研究对象,成功地对两种癌细胞中多个肿瘤转移相关基因转录水平的表达进行了检测,并用RT-PCR验证了该芯片的检测结果.结果表明,该芯片具有样品及试剂消耗极小、灵敏度高、分析速度快、成本低等优点,并且可以实现高通量分析,在肿瘤转移早期诊断及机理研究等方面具有重要的应用价值.
基于聚合物修饰的温度敏感金纳米通道阵列膜
小海,吴迎奔,王青,王柯敏,王胜锋
科学通报 , 2007,
Abstract: 通过在金纳米通道阵列膜上修饰聚N-异丙基丙烯酰胺(PNIPAm)分子,发展了一种温度敏感的纳米通道阵列膜.以荧光素钠和水溶性量子点为探针,考察了这种膜在不同温度下的渗透性.结果表明,该PNIPAm分子修饰的膜能够可逆地响应外界温度的变化,使纳米通道的孔径大小被改变,进而影响膜的渗透性.当温度为25℃(LCST)时,荧光探针的渗透明显加快,这是因为PNIPAm分子呈现紧缩构象使通道尺寸变大所致.这种温度敏感的金纳米通道阵列膜的渗透性可以被可逆地调控,有望用于纳米级阀门等装置.
基于分子信标荧光增强速率检测活细胞内p21mRNA表达
唐红星,小海,王柯敏,谭蔚泓,刘斌,何丽芳,王炜
科学通报 , 2007,
Abstract: 根据肿瘤抑制基因p21序列设计合成分子信标,通过显微操作将其注入p21表达水平存在差异的两种鼻咽癌细胞内,以活细胞成像方式动态检测了分子信标进入鼻咽癌细胞后荧光信号的变化.p21分子信标注入两种细胞后,荧光信号均逐渐增强,约15min后达到最大值;注入细胞后4min内,细胞间荧光增强速率存在明显差异,该差异反映了p21mRNA表达水平的变化趋势,与常规逆转录PCR(RT-PCR)结果相符.在使用分子信标进行活细胞内mRNA表达水平的研究中,通过分析荧光增强速率的变化,可有效降低细胞内的酶的影响,提高检测结果的准确性.
基于生物荧光纳米颗粒的新型荧光标记方法及其在细胞识别中的应用
何晓晓,王柯敏,谭蔚泓,肖丹,李军,小海
科学通报 , 2001,
Abstract: 以荧光染料(联吡啶钌配合物)为核,二氧化硅为外壳制备了大小均匀的荧光纳米颗粒.结合纳米技术、生物技术与荧光标记技术,建立了一种基于生物荧光纳米颗粒的新型荧光标记方法.与传统的荧光标记方法比较,该方法在稳定性、灵敏度、应用范围等方面都有重要突破.应用这一新型荧光标记方法成功地识别了人外周血中SmIgG+B淋巴细胞.
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