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蛋白激酶TTK与CENP-E相互作用并共定位于人细胞的动粒
张洁,符传孩,缪勇,窦震,姚雪彪
科学通报 , 2002,
Abstract: 纺锤体检验点(spindlecheckpoint)是一个重要的细胞分裂生化调节通路,监督染色体正确分离和传代,其信号传导主要通过两个蛋白激酶Mps1和Bub1/BubR1来调控.近期的研究发现动粒马达蛋白CENP-E与BubR1相互作用并参与纺锤体调控点的作用.为阐明纺锤体检验点分子调控机理,利用动粒蛋白质组学技术剖析人细胞动粒的蛋白质组成时发现了TTK蛋白——人细胞Mps1.揭示了TTK蛋白激酶定位于动粒,并与CENP-E相互作用,可能参与监控人细胞分裂过程中的染色体分离.
纺锤体检验点的功能与染色体不稳定性
姚健晖,郑宇鹏,姚雪彪
科学通报 , 2002,
Abstract: 细胞生长和个体发育均依赖于母细胞将遗传物质(染色体)精确地分配给两个子细胞.在染色体分离过程中,纺锤体检验点起到了举足轻重的作用.染色体的正确分离是遗传信息稳定性的保证,而异常分离则产生染色体不稳定性,继而直接或间接地导致了一些疾病的发生,如先天愚型综合症和癌症等.动粒及其调控蛋白构成了纺锤体检验点,决定细胞有丝分裂过程中染色体分离的时空可调性.
纺锤体检验点的功能与染色体不稳定性
姚健晖,郑宇鹏,姚雪彪
科学通报 , 2002,
Abstract: 细胞生长和个体发育均依赖于母细胞将遗传物质(染色体)精确地分配给两个子细胞。在染色体分离过程中,纺锤体检验点起到了举足轻重的作用。染色体的正确分离是遗传信息稳定性的保证,而异常分离则产生染色体不稳定性,继而直接或间接地导致了一些疾病的发生,如先天愚型综合症和癌症等。动粒及其调控蛋白构成了纺锤体检验点,决定细胞有丝分裂过程中染色体分离的时空可调性。
α粒子诱发细胞癌变的纺锤体检测点功能分析
隋建丽,孙敬芬,周平坤,吴德昌
癌变·畸变·突变 , 2003,
Abstract: ?目的:通过分析人支气管上皮细胞bep2d和其α粒子诱发的癌变细胞系berp35t1和berp35t4的纺锤体检测点功能,探讨纺锤体检测机制变化在辐射致癌中的作用。方法:用噻氨酯哒唑药物破坏细胞的微管结构,导致纺锤体形成受阻,在光学显微镜下计数有丝分裂细胞。结果:本实验观察的辐射诱发癌变细胞系中有的染色体数目相对稳定,有的不稳定,其中表现为多倍体细胞比例增高。通过分析纺锤体检测点机制,发现染色体数目异常(多倍体)比例高的癌变细胞berp35t4(40%)在噻氨酯哒唑药物作用后12~24h,有丝分裂指数(mi)明显低于亲本bep2d细胞和另一癌变细胞系berp35t1,后二者细胞的多倍体率较低(5%)。结论:纺锤体检测点机制异常与α粒子照射诱发恶性转化细胞berp35t4的染色体不稳定性相关。
纺锤体检查点蛋白BubR1在肝癌组织和肝癌细胞株HepG2中的表达
刘斌,王箭,翁亚光,蔡燕,刘子杰,李素彦
第三军医大学学报 , 2008,
Abstract: 目的观察纺锤体检查点蛋白BubR1在人类肝癌组织、正常肝组织以及肝癌细胞系(HepG2)、正常肝细胞系(LO2)有丝分裂期表达水平的差异,以探讨BubR1蛋白在肝癌发生中的作用。方法用荧光定量PCR和Westernblot检测BubR1基因在肝癌组织、正常肝组织,以及在2种细胞中用Nocodazole处理前后的mRNA和蛋白的表达水平。结果BubR1基因在正常组织中的表达高于肝癌组织,在Nocodazole处理前2种细胞中表达无显著差异,在处理后2种细胞中表达均增高,但在LO2细胞中上调水平大于HepG2细胞。结论BubR1基因低表达可能在肝癌的发生过程中起重要作用。
6-溴异香兰素诱发人宫颈癌上皮细胞纺锤体损伤及有丝分裂灾变死亡
张博,张士猛,关华,王豫,刘晓丹,徐勤枝,周平坤
科技导报 , 2010,
Abstract: 研究香兰素衍生物中的6-溴异香兰素(6-溴-5-羟基-4-甲氧基苯甲醛,BVAN08)对人宫颈癌上皮(HeLa)细胞纺锤体结构、有丝分裂的影响,及杀死癌细胞的相关机制,为开发新的抗癌药物提供理论依据。研究发现BVAN08对体外培养的人HeLa细胞具有剂量依赖性致死效应。通过抗?琢-微管蛋白抗体和抗?茁-微管蛋白抗体免疫荧光标记和激光共聚焦显微镜观察发现其机制是BVAN08对细胞纺锤体结构造成破坏,诱发产生大量的多中心体细胞,使细胞阻滞在有丝分裂期。异常多极纺锤体细胞的百分率与BVAN08呈浓度依赖效应关系。荧光染料Hoechst33258染色观察到多微核或细胞核割裂和染色质凝集现象,也证实BVAN08诱发Hela细胞有丝分裂灾变死亡。同时免疫印迹实验还发现,BVAN08可导致细胞周期转录调节因子FoxM1(Forkheadbox)及其下游靶分子CyclinB1的降解,参与有丝分裂的FoxM1蛋白失活,这表明BVAN08通过抑制FoxM1蛋白的表达是导致细胞纺锤体装配异常、细胞发生有丝分裂灾变死亡的分子机制之一。研究结果提示BVAN08诱发Hela细胞新的死亡方式,具有被开发为新型抗癌药物的潜力。
在致突变试验中应重视对纺锤体毒物的检测 Be Stressed on the Screening of Spindle Poisons in Mutagenesis Tests
高沛永GAO,Pei-Yong
遗传 , 1993,
Abstract:
烟草NtCDC48基因的克隆及功能分析
陈志玲,虞沂,刘丽娜,夏桂先
自然科学进展 , 2006,
Abstract: 利用裂殖酵母(Schizosaccharomyces pombe)系统从烟草BY-2悬浮细胞中分离得到了NtCDC48 cDNA序列, 全长2729bp,包括74bp的5′端非翻译区,2427bp的开放阅读框以及228bp的3′端非翻译区,可读框编码808个氨基酸,推导蛋白含有两个典型的ATPase模块(aa:245—374;518—646). 在烟草悬浮细胞中过量表达NtCDC48能显著提高烟草BY-2细胞的有丝分裂指数,并导致纺锤体微管列阵的两极结构由相对集中转换为极端弥散状态. NtCDC48GFP融合蛋白在细胞周期M期的亚细胞定位结果表明,NtCDC48随细胞周期进程发生有规律的变化.这些结果表明NtCDC48在植物细胞有丝分裂进程中发挥着重要作用.
牙鲆(Paralichthys olivaceus)与大菱鲆(Scophthalmus maximus)受精前期微管骨架的免疫荧光观察
海洋与湖沼 , 2008, DOI: 10.11693/hyhz20080231031
Abstract: 利用免疫荧光显微技术研究观察了牙鲆和大菱鲆正常二倍体受精卵从胚盘形成到4-细胞期微管骨架的动态变化过程,获得了一系列中心体、纺锤体及核的变化图像.牙鲆和大菱鲆正常发育的受精卵中微管骨架结构-纺锤体和中心体的动态变化过程基本相似,纺锤体及微管的形态结构也基本相似,大部分受精卵的微管骨架结构随卵裂呈现明显的周期性变化.在相同培育温度下,大菱鲆受精卵的胚盘形成时间要比牙鲆受精卵的胚盘形成时间晚10min左右,这与解剖镜下现场观察的结果相一致.首次利用免疫荧光显微技术从分子细胞生物学角度对牙鲆和大菱鲆进行细胞学观察,为进一步对其进行染色体操作提供分子细胞学依据.
纺锤体流量计流场的数值模拟
明晓,钟伟
科技导报 , 2005,
Abstract: 介绍了一种新型的节流式差压流量计——纺锤体流量计,推导了差压式流量计的一般理论以及用于纺锤体流量计的具体形式,并对纺锤体流量计的流动特性进行了数值模拟。结果表明,在来流规则和畸变情况下,纺锤体等直径段部分均能很好地形成环形槽道流动,使测量重复性和精确度得到大幅提高成为可能;同时,由于完全避免了流动分离,与孔板流量计相比,压力损失与所得差压之比小得多,在高雷诺数下尤为明显。实验结果验证了数值模拟的可靠性。
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