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单季稻小麦轮作区灰飞虱发生规律

应用昆虫学报 , 2013,
Abstract: 为了明确单季稻-小麦轮作区灰飞虱的发生规律,采用灯诱法、盘拍法、盘刮法、黄盘诱集法对灰飞虱周年发生,特别是在寄主转移时的消长规律进行了系统研究。结果表明:灰飞虱主要在适宜藏匿的场所越冬,其中常规耕翻田主要在田边田头的禾本科枯死杂草或其它密生植物、稻套麦田主要在田中稻残桩中,灰飞虱的越冬效率为50%~60%。稻套麦田灰飞虱夏冬寄主间的转移效率约为10%是常规耕翻麦田的20倍,其冬后基数分别是机械浅旋耕和常规耕翻田的35倍和77倍。灰飞虱周年只有一个迁移扩散高峰期,与小麦收割时间基本吻合。移栽后水稻上灰飞虱数量锐减,大田前期灰飞虱主要来源于秧苗带入的未孵化卵块。通过比较发现稻套麦优化了灰飞虱的越冬环境,是近年来灰飞虱大发生和水稻条纹叶枯病大流行的主要原因。根据上述研究结果提出了使用机械浅旋耕技术等耕作方法压低灰飞虱越冬基数是水稻条纹叶枯病、水稻黑条矮缩病等灰飞虱传病毒病能有效治理的前提这一新观点。
稻瘟病菌生理小种离体接种鉴定和致病性人工诱变研究
周益军 , 范永坚 , 吴淑华 , 陆振晓 ,
扬州大学学报(农业与生命科学版) , 1999,
Abstract: ????稻瘟病菌品种专化性致病型(即生理小种)严重分化,给抗病育种及病害控制带来了许多困难。因此研究其生理小种变化是目前发展所必需。本试验对稻瘟病菌生理小种的致病性人工诱变研究前期工作进行了探讨,并初步掌握了产孢的技术、水稻离体培养和接种技术、菌株诱变的条件以及获得致病性突变菌株。
两种麦类土传花叶病毒外壳蛋白叶绿体离体跨膜运输
任春梅,,魏利辉,范永坚,周益军
麦类作物学报 , 2012, DOI: 10.7606/j.issn.1009-1041.2012.01.030
Abstract: 根据Banerjees等(1992)的方法,建立了中国小麦花叶病毒(CWMV)和大麦黄花叶病毒(BaYMV)外壳蛋白(CP)叶绿体离体跨膜运输体系,研究了孵育时间、CP浓度对跨膜运输效率的影响。结果表明,CWMVCP和BaYMVCP可分别快速进入离体的小麦与大麦叶绿体中,其跨膜运输所需的孵育时间均最低为5min,孵育时间超过15min后进入叶绿体中CP的量不受影响;加入跨膜体系中CP的浓度与跨膜后进入叶绿体的CP浓度呈正相关,能够实现跨膜的最低CWMVCP和BaYMVCP浓度分别为4.2和37.8μg·mL-1。
一种快速同步检测小麦黄花叶病毒和中国小麦花叶病毒的方法
缪倩,季英华,任春梅,魏利辉,周益军,
麦类作物学报 , 2013, DOI: 10.7606/j.issn.1009-1041.2013.03.033
Abstract: 针对小麦黄花叶病毒(WYMV)和中国小麦花叶病毒(CWMV)在症状、传播途径、发生规律等方面高度相似、难以用常规手段鉴定的问题,根据两种病毒基因序列的异同点设计了三条引物CWWYR2、CW1F2和WY1F2,以植物总RNA为模板、CWWYR2为引物反转录合成cDNA。通过优化建立了一种同步检测两种病毒的反应体系:cDNA1.6μL,引物(10μmol·L-1)各0.4μL,10×PCRBuffer(不含Mg2+)2μL,dNTPs(10mmol·L-1each)0.4μL,TaqDNA聚合酶(5U·μL-1)0.8μL,MgCl2(25mmol·L-1)0.8μL,ddH2O13.2μL,合计20μL;PCR反应条件:94℃预变性5min,94℃50s,50℃50s,72℃90s,共30个循环,72℃延伸10min。WYMV和CWMV的PCR扩增预期目的片段分别为508和918bp。利用该方法对江苏高邮、扬州和大丰的样本进行检测,它们分别为WYMV、WYMV、CWMV单一侵染,证明该方法准确性较高,可用于两种病害同步检测。
粳稻品种对水稻条纹叶枯病的抗性鉴定及抗病品种镇稻88的遗传分析
周彤,周益军,,杨荣明,吉健安
植物保护学报 , 2007,
Abstract: 采用田间小区鉴定方法研究27份粳稻品种对水稻条纹叶枯病的抗性表现,并在此基础上选择抗性表现强的镇稻88与高感品种武育粳3号构建F2分离群体进行遗传分析。结果表明,粳稻品种对水稻条纹叶枯病的田间抗性表现在不同年份和不同地区间存在一定的差异,但镇稻88、连粳4号、徐稻3号等9个品种在鉴定试验中均表现为抗病和高抗,可作为抗病品种在江苏地区推广应用。镇稻88与武育粳3号的F2群体抗感表型分离比例符合3∶1,表明镇稻88对条纹叶枯病的抗性受一对显性核基因的控制,将其作为抗病亲本使用可大大加快育种进程。研究同时发现在灰飞虱不引发虫害的条件下,有效接种虫量与感病对照发病率相关性达显著水平,当其值在0.8×106~3.6×106/hm2范围内时可作为水稻条纹叶枯病田间抗性鉴定有效的参考指标。
江苏水稻品种抗稻瘟病遗传多样性研究
陈志石,陈夕军,熊如意,林玲,徐敬友,
南京农业大学学报 , 2008, DOI: 10.7685/j.issn.1000-2030.2008.03.015
Abstract: 根据已知的不同抗病基因保守区域设计引物,通过在水稻基因组DNA中扩增和分离有相似序列的DNA片段,可以快速鉴定出候选抗病基因。选择3对扩增条带多样性较高的引物XLRRfor/XLRRrev、S1/AS3和Ptokin1/Ptokin2,对江苏27个水稻品种进行抗病基因同源序列PCR分析(resistancegeneanalog-PCR,RGA-PCR)。结果显示,3对引物共扩增出清晰可辨的谱带127条,其中多态性带101条,占总数的79.53%。根据聚类分析,3对引物对或引物组合扩增的RGA图谱可将品种分为多种类型,这些RGA图谱类型与稻瘟病菌7个生理小种接种鉴定的抗病表型没有完全的对应关系。
灰飞虱来源的水稻条纹病毒病害特异性蛋白基因遗传多样性
任春梅,,季英华,熊如意,范永坚,周益军
华北农学报 , 2010, DOI: 10.7668/hbnxb.2010.06.025
Abstract: 对来自江苏、云南、山东、河北等地灰飞虱来源的21个水稻条纹病毒分离物的病害特异性蛋白(sp)基因进行了遗传多样性分析研究。序列测定表明,所有分离物的sp基因大小相同,均由537个核苷酸组成,编码178个氨基酸和1个终止密码子。采用DNAStar软件进行分析,21个RSV分离物核苷酸和推导的编码蛋白氨基酸序列同源性分别为96.1%~100%和95.5%~100%。与已报道水稻来源的27个RSV分离物一起进行序列同源性比较和系统进化树分析,结果表明,RSV-sp基因核苷酸序列变异相对较大,除灰飞虱来源的或者云南来源的分离物相对独立成组外无明显的规律性。从功能上分析,其遗传多样性首先与寄主相关,从寄主角度可以划分为灰飞虱和水稻两个寄主群;其次与地缘相关,在灰飞虱寄主群中可以分成中国云南及云南以外的两个地理亚群,在水稻寄主群中可以划分为中国云南和云南以外的多个地理亚群。
中国小麦花叶病毒(cwmv)单克隆抗体制备及其检测应用
刘欢,李娜,周雪平,任春梅,,吴建祥
农业生物技术学报 , 2015,
Abstract: ?中国小麦花叶病是引起小麦(triticumaestivum)严重减产的中国小麦花叶病毒(chinesewheatmosaicvirus,cwmv)造成的。本研究旨在以制备的抗cwmv特异性单克隆抗体(monoclonalantibody,mab)为核心建立检测cwmv的血清学方法,为该病毒病的诊断和科学防控提供技术支撑。用cwmv提纯病毒免疫小鼠(musmusculus),经细胞融合、培养基筛选培养、阳性细胞的检测与单克隆化后,共获得4株能分泌抗cwmv单克隆抗体的杂交瘤细胞株5h5、7c2、9a7和12e5,并注射入balb/c小鼠(musmusculus)腹腔制备单抗腹水;间接酶联免疫吸附实验(enzymelinkedimmunosorbentassay,elisa)表明,4种单抗腹水效价均达到10-7,抗体类型及亚类均为igg1、kappa链。westernblot分析表明,4株单克隆抗体均能与cwmv的外壳蛋白亚基有特异性反应。利用制备的单抗建立检测田间小麦样品中cwmv的抗原包被酶联免疫吸附实验(antigencoatingplateenzyme-linkedimmunosorbentassay,acp-elisa)和斑点酶联免疫吸附实验(dot-enzyme-linkedimmunosorbentassay,dot-elisa),结果表明,该两种血清学方法检测感染cwmv小麦植物组织粗提液呈特异性阳性反应,而检测感染小麦黄花叶病毒(wheatyellowmosaicvirus,wymv)的小麦、感染大麦黄花叶病毒(barleyyellowmosaicvirus,baymv)的大麦(hordeumvulgare)和健康小麦均呈阴性反应,说明建立的两种方法能特异性地检测小麦植物中的cwmv。灵敏度分析表明,以5h5和12e5单抗为核心建立的acp-elisa方法检测小麦病叶的灵敏度达到1∶81920(w/v,g/ml),而以7c2和9a7单抗为核心建立的acp-elisa方法检测小麦病叶灵敏度达到1∶40960(w/v,g/ml)倍稀释;以12e5和5h5单抗为核心建立的dot-elisa方法检测小麦病叶的灵敏度达到1∶2560倍稀释(w/v,g/ml),而以7c2和9a7单抗为核心建立的dot-elisa方法的检测灵敏度达到1∶1280倍稀释(w/v,g/ml)。田间样品检测结果表明,建立的acp-elisa、dot-elisa方法能准确、可靠地用于小麦中cwmv病毒的检测,且进一步证明该病毒病在江苏和山东流行。cwmv单克隆抗体的制备及其血清学检测方法的建立为中国小麦cwmv的诊断、预测预报及科学防控提供了物质和技术支撑。
稻瘟病菌基因组重复倒位单元pot2的相关性状研究
熊如意,白娟,,黄建丽,周益军
农业生物技术学报 , 2005,
Abstract:
一个与水稻条纹叶枯病抗性基因紧密连锁的分子标记的鉴定
周彤,王磊,,陈洁,范永坚,周益军
农业生物技术学报 , 2009,
Abstract: ?针对水稻条纹叶枯病粳型(oryzasativassp.japonica)抗源镇稻88尚无可供育种利用的分子标记的现状,以镇稻88和感病品种武育粳3号配组构建f2作图群体。在采用单分蘖鉴定和苗期接种鉴定方法对f2群体和f2:3家系分别进行抗性遗传分析的基础上,通过标记分析表明,rapd标记opo11与镇稻88中抗性基因紧密连锁,表现为共分离。使用该标记对徐稻3号等3个镇稻88衍生抗性品种进行分析,结果表明,rapd标记opo11可应用于镇稻88与武育粳3号组合及其衍生组合的分子标记辅助选择。
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