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酵母三杂交系统的应用研究进展
张浩?,王全立?,
生物化学与生物物理进展 , 1999,
Abstract: 介绍了酵母三杂交系统的原理、应用、前景和存在的不足.在酵母双杂交基础上发展起来的酵母三杂交系统,将应用范围扩大到研究蛋白质-蛋白质、蛋白质-rna、蛋白质-小分子药物间的相互作用.
HCV特异性反义RNA表达载体的构建及活性评价
王小红,王升启,管伟,
生物工程学报 , 2001,
Abstract: 反义RNA是反义技术的一个重要领域,为探索丙型肝炎病毒治疗新途径及验证转基因细胞模型HepG2.9706的有效性,设计了一条互补于HCV 5′NCR及翻译起始区(39713核苷酸)的反义RNA序列,将其插入pGL3载体SV40启动子下游,构建了HCV特异性的反义RNA真核表达载体(pHCV-asR)。通过PCR扩增、酶切反应及序列分析进行了初步鉴定,并将其转染HepG2细胞,通过RTPCR方法检测其在细胞中的表达并将pHCV-asR转染转基因细胞模型HepG2.9706,评价其对HCV 5′NCR的抑制活性。结果表明,构建的反义RNA表达载体插入序列正确,并能在HepG2细胞中表达;pHCV-asR在HepG2.9706中对HCV 5′NCR调控荧光素酶基因表达具有特异性的剂量依赖性抑制活性,最高抑制率可达57%。
丙型肝炎病毒5'NCR转基因细胞模型及在反义核酸药物筛选和评价中的应用
王小红,王升启,管伟,
自然科学进展 , 2001,
Abstract: 为了进行以基因为靶的抗丙型肝炎病毒(HCV)药物的筛选及评价,将HCV5'NCR-C基因与荧光素酶基因的融合基因片段插入pCI-neo表达载体,通过PCR扩增、酶切反应及荧光素酶瞬间表达活性鉴定,获得HCV5'NCR调控荧光素酶的稳定表达质粒pHCV-ne04,将其转染HepG2细胞,经GA18筛选,从150个克隆中获得一个高荧光素酶活性表达的细胞株HepG2.9706.该株细胞内HCV片段的DNA及mRNA检测均呈阳性,转基因拷贝数为140.利用该细胞株,通过脂质体介导,对3条针对HCV调控基因的反义寡核苷酸(ASODNs)即HCV363,HCV349,HCV279进行了活性评价,结果显示,三种ASODNs均具有特异性的剂量依赖性抑制活性,浓度在0.5μmol/L时,三者对HCV5'NCR调控荧光素酶表达抑制率分别为61%,55%及48%.该研究提示反义寡核苷酸有可能成为治疗HCV的新途径.
hcv特异性反义rna表达载体的构建及活性评价
王小红 王升启* 管伟
生物工程学报 , 2001,
Abstract: 反义rna是反义技术的一个重要领域,为探索丙型肝炎病毒治疗新途径及验证转基因细胞模型hepg2.9706的有效性,设计了一条互补于hcv5′ncr及翻译起始区(39713核苷酸)的反义rna序列,将其插入pgl3载体sv40启动子下游,构建了hcv特异性的反义rna真核表达载体(phcv-asr)。通过pcr扩增、酶切反应及序列分析进行了初步鉴定,并将其转染hepg2细胞,通过rtpcr方法检测其在细胞中的表达并将phcv-asr转染转基因细胞模型hepg2.9706,评价其对hcv5′ncr的抑制活性。结果表明,构建的反义rna表达载体插入序列正确,并能在hepg2细胞中表达;phcv-asr在hepg2.9706中对hcv5′ncr调控荧光素酶基因表达具有特异性的剂量依赖性抑制活性,最高抑制率可达57%。
肝细胞靶向pH敏脂质体介导的硫代反义寡核苷酸对HCV5′NCR基因表达的抑制作用
王小红,王升启,文思远,管伟,
生物工程学报 , 2001,
Abstract: 反义寡核苷酸是一种阴离子大分子物质 ,细胞生物利用度较低且易被细胞溶酶体酶降解 ,为了增强反义药物在病变靶细胞内的有效浓度 ,根据受体介导的内吞作用原理 ,针对肝细胞专一性表达的去唾液酸糖蛋白受体 ,设计及制备了一种肝靶向性脂质体 ,这种脂质体同时具有pH敏性。采用竟争抑制实验及鸡红细胞溶血实验分析了其肝细胞靶向性及pH敏性 ;应用肝靶向pH敏脂质体作为药物运载工具 ,介导反义寡核苷酸HCV3 63作用于转基因细胞HepG2 .970 6细胞 ,通过荧光素酶活性检测 ,观察了硫代反义寡核苷酸对HCV 5′NCR调控功能的抑制活性。结果显示 ,不同浓度半乳糖溶液对 5 % 18 gal脂质体有一定的抑制作用 ,浓度超过 2 0mmol L时 ,达到饱和 ,最大抑制率为 3 8% ;溶血实验显示脂质体与红细胞膜融合作用有显著的pH值依赖性 ,pH <6时 ,血红素释放量明显增加 ;肝靶向pH敏性脂质体介导的HCV3 63对HepG2 .970 6细胞中HCV 5′NCR调控基因具有显著的剂量依赖性抑制作用 ,浓度为 1 0 μmol L时 ,抑制率达 86%。综上 ,所制备的脂质体具有一定的肝细胞靶向性及显著的p…
抗T细胞单克隆抗体(211-1)清除骨髓中T细胞的实验研究
卜风荣,劳妙芬,,董波,吴祖泽
生物工程学报 , 1986,
Abstract: 本文报告应用抗T淋巴细胞单克隆抗体(211—1)和幼兔补体,体外处理骨髓细胞对GM-cFuc生成率无不良影响,并能清除骨髓中98%以上的T细胞。淋巴细胞转化试验也证明,211—1单克隆抗体可以清除骨髓中T细胞。
肝细胞靶向ph敏脂质体介导的硫代反义寡核苷酸对hcv5′ncr基因表达的抑制作用
王小红, 王升启*, 文思远, 管伟,
生物工程学报 , 2001,
Abstract: 反义寡核苷酸是一种阴离子大分子物质,细胞生物利用度较低且易被细胞溶酶体酶降解,为了增强反义药物在病变靶细胞内的有效浓度,根据受体介导的内吞作用原理,针对肝细胞专一性表达的去唾液酸糖蛋白受体,设计及制备了一种肝靶向性脂质体,这种脂质体同时具有ph敏性。采用竟争抑制实验及鸡红细胞溶血实验分析了其肝细胞靶向性及ph敏性;应用肝靶向ph敏脂质体作为药物运载工具,介导反义寡核苷酸hcv363作用于转基因细胞hepg2.9706细胞,通过荧光素酶活性检测,观察了硫代反义寡核苷酸对hcv5′ncr调控功能的抑制活性。结果显示,不同浓度半乳糖溶液对5%18gal脂质体有一定的抑制作用,浓度超过20mmoll时,达到饱和,最大抑制率为38%;溶血实验显示脂质体与红细胞膜融合作用有显著的ph值依赖性,ph<6时,血红素释放量明显增加;肝靶向ph敏性脂质体介导的hcv363对hepg2.9706细胞中hcv5′ncr调控基因具有显著的剂量依赖性抑制作用,浓度为10μmoll时,抑制率达86%。综上,所制备的脂质体具有一定的肝细胞靶向性及显著的p…
抗t细胞单克隆抗体(211-1)清除骨髓中t细胞的实验研究
卜风荣 劳妙芬 董波 吴祖泽
生物工程学报 , 1986,
Abstract: 本文报告应用抗t淋巴细胞单克隆抗体(211—1)和幼兔补体,体外处理骨髓细胞对gm-cfuc生成率无不良影响,并能清除骨髓中98%以上的t细胞。淋巴细胞转化试验也证明,211—1单克隆抗体可以清除骨髓中t细胞。
《界面电化学》专辑序言
Special Issue on Interfacial Electrochemistry


- , 2016, DOI: 10.13208/j.electrochem.160560
Abstract: 摘要 界面电化学是以研究电极-电解液界面的结构和性质以及各种电极过程为特点的电化学科学的重要方向. 随着能源科学的迅猛发展,围绕各种复杂电化学界面、探讨其在能源电化学过程中的特殊作用显得十分重要,而发展和运用各种原位和非原位表征方法研究复杂界面的结构和性能关系也日益受到关注. 本专辑收录论文9篇,包括7篇研究论文和2篇综述,侧重于锂基电池、电催化和离子液体电化学体系中的界面问题,反映我国学者在电化学界面基础和应用研究方面所取得的最新进展,并评述有关能源电化学界面所存在的问题、挑战和解决策略.希望籍此促进我国电化学研究的进一步发展. 在此,谨对所有为本专辑撰稿的作者所给予的大力支持和贡献表示诚挚谢意! 同时对审稿人及编辑部工作人员为本专缉的出版所付出的辛勤劳动表示衷心感谢!
Interfacial electrochemistry is an area of electrochemical science featuring investigations on structures and properties of electrode-electrolyte interfaces at which diverse electrode processes take place. With rapid development of energy sciences, understanding the roles of complex electrochemical interfaces in energy electrochemical processes becomes increasingly important, while development and employment of in-situ and ex-situ techniques to characterize the interfacial structure and property, as well as their correlation are indispensible. This special issue emphasizes on lithium-based batteries, electrocatalysis and ionic liquid electrochemistry, and comprises nine papers, including seven research articles and two review articles, which reflect the latest progresses in fundamental and applied researches, and provide reviews on the problems, challenges and solution strategies in energy electrochemistry. It is hoped that the publication of this special issue will promote further development of electrochemistry in our country. Herein, sincere thanks are extended to all the authors for their contributions and great support to the special issue. Heartfelt thanks also go to the reviewers and editorial staff for their efforts in processing and publication of the issue
一种新的基于Dijkstra算法的QoS组播树启发式算法
,
重庆邮电大学学报(自然科学版) , 2006,
Abstract: 基于Dijkstra算法和MCP-IA算法,提出了一种耗费受限的最短时延路径算法(CCLDA)并将其应用于时延和时延差异受限的算法(DDVCA),并给出了算法实现的伪代码,不仅满足了时延和时延差异限制,而且降低了最终所得的组播树的耗费,更能满足现实需要。
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