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慢性砷中毒1例
潘靖,
北京大学学报(医学版) , 2004,
Abstract:
来自中国北方部分地区33株孢子丝菌菌株的表型和基因型鉴定
谭静文,刘伟,万喆,
菌物学报 , 2013,
Abstract: 孢子丝菌病是一种临床常见的真菌感染疾病,近期有研究认为其致病菌是由多个同形种构成的复合体。为明确我国孢子丝菌病致病菌的生理学以及分子生物学方面的特点,对33株分离自我国孢子丝菌病患者组织的病原菌进行了研究,首先检测其在37℃是否生长以及PDA培养基上生长21d的菌落直径,其次检测其糖同化特点,最后对其钙调蛋白(Calmodulin,CAL)基因进行PCR扩增、序列测定以及系统进化分析。结果显示,这些菌株全部为球形孢子丝菌Sporothrixglobosa,说明我国孢子丝菌病的病原菌可能以球形孢子丝菌为主。
根癌农杆菌介导的尿嘧啶缺陷烟曲霉转化是基因敲除的有效方法
乔建军,刘伟,马彦,万喆,
北京大学学报(医学版) , 2008,
Abstract: ?目的:探讨用嘧啶营养缺陷作为筛选标记、根癌农杆菌介导的转化方法敲除烟曲霉基因.方法:以pyrg作为筛选标记,在双元载体pdht/sk上分别构建烟曲霉fapi,和shoi基因的打靶序列.构建好的质粒分别转化入根癌农杆菌.24℃条件下,含打靶质粒的根癌农杆菌与烟曲霉在不含尿嘧啶和尿苷的诱导培养基上共培养48h;然后将培养物转移到37℃,筛选转化子.结果:根癌农杆菌介导的烟曲霉转化同源重组率较高,fapi基因为44%(7/16)、shoi基因为35%(7/20).结论:以pyrg作为筛选标记、根癌农杆菌介导的转化方法能高效敲除烟曲霉基因,为烟曲霉基因功能研究提供了有效方法.
烟曲霉sho1基因对渗透压传导的作用和抗真菌药物敏感性的影响
马彦*,乔建军,刘伟,
北京大学学报(医学版) , 2009,
Abstract: ?目的:克隆烟曲霉sho1基因,并构建烟曲霉sho1基因突变株,了解该基因在烟曲霉应对环境变化中的作用。方法:通过基因同源性比对,在烟曲霉基因组中找出与酿酒酵母sho1基因同源的基因,pcr扩增烟曲霉sho1基因及其上、下游各约1.0kb的dna片段,并将其重组到质粒pdht/sk2中,再利用pyrg作为筛选标记构建重组质粒。将重组质粒转化烟曲霉af293.1得到烟曲霉△sho1。观察烟曲霉△sho1和烟曲霉af293(野生株,wt)在mm、cm、bhi这3种培养基上的生长速度,测定烟曲霉△sho1在含有氯化钠、丙三醇这两种渗透压物质培养基上的生长情况,并比较烟曲霉△sho1和wt对常用抗真菌药物的敏感性。结果:烟曲霉△sho1在cm、mm、bhi这3种培养基上的生长速度均慢于wt;△sho1在含渗透压物质小于1mol/l的培养基上菌落直径没有明显变化,在含渗透压物质大于1mol/l的培养基上菌落直径明显变小;烟曲霉△sho1和wt对抗真菌药物的敏感性没有差异。结论:sho1基因影响烟曲霉的生长速度,与培养基类型没有明显关系。烟曲霉sho1基因介导渗透压传导。sho1基因对烟曲霉的抗真菌药物敏感性没有影响。
烟曲霉rRNA基因ITS区的克隆测序分析*
骆志成,王端礼,孔繁荣,冬梅,,世荫
菌物学报 , 2000,
Abstract: 对烟曲霉rRNA基因内转录间区(ITS区)进行了克隆测序,并将之与其他几种常见曲霉的相应序列进行了比较。发现3株烟曲霉的ITSⅠ区完全相同,而其中1株烟曲霉的ITSⅡ区与一条已知相应序列仅有2个碱基的变异。提示烟曲霉rRNA基因的两个ITS区序列均十分保守,而且与黄曲霉、黑曲霉、土曲霉及构巢曲霉的相应序列相比较,均有一定程度的变异。
烟曲霉rRNA基因ITS区的克隆测序分析*
骆志成,王端礼,孔繁荣,冬梅,,世荫
菌物学报 , 2000,
Abstract: 对烟曲霉rRNA基因内转录间区(ITS区)进行了克隆测序,并将之与其他几种常见曲霉的相应序列进行了比较。发现3株烟曲霉的ITSⅠ区完全相同,而其中1株烟曲霉的ITSⅡ区与一条已知相应序列仅有2个碱基的变异。提示烟曲霉rRNA基因的两个ITS区序列均十分保守,而且与黄曲霉、黑曲霉、土曲霉及构巢曲霉的相应序列相比较,均有一定程度的变异。
随机扩增多态性对白色念珠菌分型的估价
冬梅,王瑞礼,,朱衡,朱立煌
菌物学报 , 1995,
Abstract: 利用随机扩增多态性(RAPD-PCR)的方法对48株白念珠菌Candidaalbicans(Ro-bin)Berkh进行了分析。由初步试验中,随机选用了18种引物,筛选出OPA-14引物,该引物扩增的带型清晰可辨,不同菌株之间扩增的带数6—12条不等,共有6条主带。扩增片段的长度粗略估计在300—2000bp左右。除个别菌株的带型相同以外,大多数菌株之间呈多态性分布,其带型的数目和扩增的片段存在差异。对简单的DNA制备方法,以及RAPD—PCR在临床应用和流行病学调查中的可行性进行了初步探讨。
甄氏外瓶霉的核糖体基因分型研究
东明,,王晓红,万喆,马圣清,王端礼
北京大学学报(医学版) , 2005,
Abstract: ?目的:应用核糖体基因(rdna)序列对甄氏外瓶霉进行分型研究.方法:试验菌株包括甄氏外瓶霉及其变种20株(模式株、标准株、临床及自然分离株),丛梗孢外瓶霉8株,威尼克外瓶霉1株(标准株及临床和环境分离株),疣状瓶霉1株.煮沸冷冻法提取dna,常规pcr扩增核糖体基因及其转录间隔区,应用dna多序列分析等方法进行研究.结果:甄氏外瓶霉核糖体基因及其转录间隔区变异较大,dna序列分析显示,不同来源、不同致病性的甄氏外瓶霉可分为7型,个别菌种与其他甄氏外瓶霉的遗传距离较大.结论:甄氏外瓶霉核糖体基因及其转录间隔区序列变异较大,个别菌株的归属有待于进一步研究.
分子生物学技术在病原真菌鉴定和真菌感染诊断中的应用
,东明,余进,刘伟,冀朝辉,王端礼
北京大学学报(医学版) , 2004,
Abstract:
A Brief Introduction to Several Novel Antifungal Drugs
几种新型抗真菌药物简介

LIU Wei,LI Ruo-Yu,
刘伟
,

微生物学通报 , 2007,
Abstract: The introduction of lipid-formula Amphotericin B,Voriconazole,and Echinocandins,including Caspofungin and Micafungin,reflect the trend that the antifungal drugs are being developed along to a direction with high effect,broad spectrum,and low toxicity.These drugs undoubtedly provide novel useful approaches to the treatment of invasive fungal infections.Compared to the traditional antifungal drug,such as amphotericin B and Fluconazole,these drugs have the character of good effect and low adverse effect,which will be very important to prophylaxis and treatment for systemic fungal infections.The information concerning for these issues is being reviewed in this paper.
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