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拟南芥Mg2+转运蛋白AtMGT10的原核表达及多克隆抗体制备
Prokaryotic expression and polyclonal antibody preparation of magnesium transporter AtMGT10 in Arabidopsis thaliana 

,,,,
- , 2017,
Abstract: 【目的】在大肠杆菌系统中原核表达拟南芥叶绿体Mg2+转运蛋白AtMGT10,通过免疫健康成年家兔,获得针对AtMGT10蛋白的多克隆抗体,为研究AtMGT10蛋白在植物生长发育中的功能奠定基础。【方法】利用PCR技术克隆AtMGT10基因编码区187~786 bp的cDNA片段,连接到pET-28a中构建原核表达载体pET-28a-AtMGT1063-262,转化大肠杆菌BL21(DE3)菌株,经IPTG诱导表达带有His标签的His-AtMGT1063-262截短重组蛋白。用镍柱亲和纯化后的重组蛋白作为抗原皮下注射免疫家兔,制备针对AtMGT10蛋白的多抗血清。提取拟南芥野生型叶片总蛋白,用AtMGT10多抗血清进行蛋白免疫印迹检测。【结果】经PCR扩增获得了600 bp的AtMGT10基因cDNA片段,成功构建原核表达载体pET-28a-AtMGT1063-262,在大肠杆菌系统中表达出His-AtMGT1063-262蛋白,经亲和纯化后免疫家兔获得了Anti-AtMGT10多抗血清。在拟南芥野生型总蛋白中用Anti-AtMGT10经免疫印迹检测到大约50 ku的蛋白条带,利用抗原竞争试验进一步证明检测到的信号就是拟南芥内源AtMGT10蛋白。【结论】原核表达了His-AtMGT1063-262蛋白,成功制备了特异性较强的AtMGT10蛋白多克隆抗体。
【Objective】The objective of this study was to heterologously express Arabidopsis thaliana magnesium transporter10 (AtMGT10) in Escherichia coli and to generate polyclonal antibody against AtMGT 10 in rabbits using recombinant AtMGT10 as the antigen.This work would lay foundation for the study of AtMGT10’s role in plant growth and development.【Method】Partial AtMGT10 cDNA fragment (187-786 bp) was cloned into pET-28a vector.The resulted product,pET-28a-AtMGT1063-262,was transformed into E.coli strain BL21 (DE3) for expression of the recombinant protein His-AtMGT1063-262.His-AtMGT1063-262 was then purified via nickel affinity chromatography and used to immune rabbits to obtain antiserum against AtMGT10.Total proteins were also extracted from wild type Arabidopsis leaves and subjected to western blot analysis to test whether endogenous AtMGT10 can be detected by AtMGT10 antibody.【Result】AtMGT-10-cDNA fragment (187-786 bp) was cloned and used to construct pET-28a-AtMGT1063-262 expression vector.His-AtMGT1063-262 was successfully expressed in E.coli BL21 (DE3) and purified to immune rabbits.Anti-AtMGT10 antiserum was obtained and used to detect endogenous AtMGT10 in wild type leaf protein samples.Competition test confirmed that a 50 ku band in Arabidopsis total protein samples detected by Anti-AtMGT10 was the endogenous AtMGT10 protein.【Conclusion】His-AtMGT1063-262 was expressed and the polyclonal antibody against AtMGT10 protein was prepared successfully
蛋白质过瘤胃保护增强植物外啡肽对山羊生长代谢的调节作用
孙镇平,,朱王,
牲畜兽医学报 , 2004,
Abstract:
电喷雾萃取电离质谱法用于掺假白酒的快速分析
欧阳永中,李操,,
化学学报 , 2013, DOI: 10.6023/A13070738
Abstract: 采用自行研制的电喷雾萃取电离源(EESI)与LTQ-XL质谱仪耦合,并结合主成分分析(PCA)和聚类分析(CA),建立了一种能在无需样品预处理的条件下直接、快速、准确鉴别茅台等八种掺假白酒(混掺水和工业酒精,且通过酒精计调控掺假酒的酒精度与真酒保持一致)的新方法.同时,利用串联质谱能够对目标组分进行准确鉴定.研究结果表明,EESI-LTQ-MS检测单个样品的时间小于1min,且重现性好,PCA区分正确率高达96.5%.通过设置未知样分析进一步验证了该方法的可行性.此外,还结合单光子电离飞行时间质谱法(SPI-TOF-MS)对检测谱图进行对比分析.阐述了EESI和SPI两种电离技术在挥发性有机物分析上具有各自的优势,且两种检测手段具有互补的特点.为市场上酒类饮品真假的快速鉴别及品质鉴定建立了一个综合的分析方法,对于快速筛选伪劣酒类产品具有非常重要的应用价值.
钢骨-圆钢管高强混凝土组合柱偏心受压力学性能 Mechanical properties of circular steel tube filled with steel reinforced high strength concrete composite column under eccentric compression
金松,,,
- , 2017,
Abstract: 为研究钢骨-圆钢管高强混凝土组合柱偏心受压力学性能,采用有限元软件ABAQUS对14根钢骨-圆钢管高强混凝土组合柱偏心受压试件进行非线性分析,研究了荷载-侧向挠度曲线特征、不同受力阶段的应力分布规律及破坏模态,进行参数分析,讨论不同参数对组合柱偏心受压力学性能的影响.提出组合柱偏心受压承载力简化计算公式,并将简化公式计算结果与试验结果及有限元计算结果进行对比.编写了钢骨-圆钢管高强混凝土组合柱偏心受压数值分析程序.结果表明组合柱的偏心受压承载力随着偏心距、长细比以及径厚比增大而不断减小,随着配骨指标增大不断提高.简化计算公式计算结果及数值计算结果,与试验结果及有限元模拟结果吻合良好
Effects of Soil Types on Contents of Scutellarin and Caffeates in Erigeron breviscaps
土壤类型对短葶飞蓬灯盏乙素和咖啡酸酯积累的影响

苏文华,,张光,鸿
植物科学学报 , 2009,
Abstract: 在相同栽培管理条件下,分别以黑色石灰土、红色石灰土、红壤、黄红壤、紫色土和腐殖土为生长介质对短葶飞蓬(Erigeron breviscapus)进行了人工栽培试验.结果显示,生长在不同土壤类型的短葶飞蓬植株体内总咖啡酸酯和灯盏乙素含量有显著的差异.红色石灰土、紫色土及黄红壤生长的植株总咖啡酸酯和灯盏乙素含量最高,黑色石灰土和腐殖土的最低.相同土类的不同亚类土壤生长植株间2种次生代谢产物含量的差异程度,会超过不同土类间的.植株总咖啡酸酯和灯盏乙素含量与土壤P和K含量没有显著相关关系,但与土壤速效N含量及植株含N量则都有极显著负相关关系.不同土壤生长植株叶片的最大光能转换效率(Fv/Fm)值与灯盏乙素和总咖啡酸酯含量都表现出极显著负相关关系.土壤类型对短葶飞蓬次生代谢影响规律与碳素/营养平衡假说(CNB)及资源获得假说(RA)的预测一致.
EFFECTS OF NITROGEN AVAILABILITY IN SOIL ON THE CONTENTS OF FLAVONOIDS AND CAFFEATES IN A MEDICINAL PLANT, ERIGERON BREVISCAPUS
短葶飞蓬黄酮及咖啡酸酯的含量与土壤氮供应量的关系

苏文华,张光,鸿,
植物生态学报 , 2009,
Abstract: 通过对短葶飞蓬(Erigeron breviscapus)不同产地的44个种群植株的总黄酮、灯盏乙素和总咖啡酸酯含量与产地土壤全氮(N)和速效N含量的相关分析, 探讨了产地间土壤N含量变化在药用植物短葶飞蓬植株次生代谢有效成分含量变化中的作用机制。结果显示: 土壤全N含量与种群植株中总黄酮含量呈显著的负相关(r=–0.391, p<0.01), 而与总咖啡酸酯和灯盏乙素关系不显著; 土壤速效N含量与种群植株中总黄酮(r=–0.528, p<0.01)、灯盏乙素(r=–0.490, p<0.01)和总咖啡酸酯含量(r=–0.471, p<0.01)都表现出更高的极显著负相关关系。全部44个种群中, 有效N供应量变化只能解释次生代谢产物含量的17%~30%的变化。非石灰土壤与石灰土壤的种群分开进行线性回归, 可解释总黄酮含量产地间约80%的变化, 以及灯盏乙素和总咖啡酸酯含量约60%的变化。植株总黄酮、灯盏乙素和总咖啡酸酯含量都与植株含N量存在显著的负相关关系。研究表明: 土壤丰富的有效N供应不利于黄酮和咖啡酸酯的合成积累, 与“碳素/营养平衡假说”的预测一致; 土壤有效N对植物次生代谢产物的影响会受到植物体内外因素的影响。不同产地的短葶飞蓬的黄酮等酚类次生代谢产物含量的差异, 可能是产地间不同的土壤N供应量和其他生态因子及遗传变异共同作用的结果。
全国资源环境承载能力监测预警(2014版)学术思路与总体技术流程
樊杰,,汤青,
地理科学 , 2015,
Abstract: 建立资源环境承载能力监测预警机制,是全面深化改革的一项创新性工作。从资源环境承载能力的科学内涵出发,以区域可持续发展为指向,探究资源、环境等构成的承载体——自然基础同承载对象——人类生产生活活动之间形成的“压力-状态-响应”过程,提出资源环境承载能力预警是从资源环境约束上限或人口经济合理规模等关键阈值开展的超载预警,以及从自然基础条件变化或资源利用和环境影响变化态势开展的过程预警的学术思路。在探讨承载能力预警指标体系选取原则的基础上,构建陆域和海域差异化的预警指标体系和总体技术流程。采用土地资源压力、水资源利用强度、环境胁迫程度、植被盖度变化作为基础指标进行地域全覆盖评价;针对城市化地区、农业地区、牧业地区、生态地区,分别选择灰霾污染程度、耕地面积增减状况、草蓄平衡指数、生态环境质量变化状态作为专项指标,确定各类专项指标的关键阈值并进行分类评价;最后进行复合,形成在鲜明主体功能定位指向下的差别化评价方法、取得具有一致性表达的评价结果,并开展资源利用效率和环境污染压力两方面的过程评价,以辅助反映中国资源环境承载能力和可持续发展能力预警状态,为提出限制性措施建议和完善监测预警机制提供科学依据。
以成都地区博物馆为例的文博旅游体验设计研究
,费凌峰,黄霞,
包装工程 , 2013,
Abstract: 以成都地区博物馆为案例考察对象,将用户体验设计的用户研究方法针对性应用于文博旅游研究。关注参观者和旅游者在参观游览全过程中的体验与感受,通过用户访谈法和角色体验法的结合,发现与挖掘用户的显性与潜在的参观需求点,提升当前文博旅游的游览体验感和满意度。
土壤类型对短葶飞蓬灯盏乙素和咖啡酸酯积累的影响
苏文华,,张光,鸿
植物科学学报 , 2009,
Abstract: ?在相同栽培管理条件下,分别以黑色石灰土、红色石灰土、红壤、黄红壤、紫色土和腐殖土为生长介质对短葶飞蓬(Erigeronbreviscapus)进行了人工栽培试验。结果显示,生长在不同土壤类型的短葶飞蓬植株体内总咖啡酸酯和灯盏乙素含量有显著的差异。红色石灰土、紫色土及黄红壤生长的植株总咖啡酸酯和灯盏乙素含量最高,黑色石灰土和腐殖土的最低。相同土类的不同亚类土壤生长植株间2种次生代谢产物含量的差异程度,会超过不同土类间的。植株总咖啡酸酯和灯盏乙素含量与土壤P和K含量没有显著相关关系,但与土壤速效N含量及植株含N量则都有极显著负相关关系。不同土壤生长植株叶片的最大光能转换效率(Fv/Fm)值与灯盏乙素和总咖啡酸酯含量都表现出极显著负相关关系。土壤类型对短葶飞蓬次生代谢影响规律与碳素/营养平衡假说(CNB)及资源获得假说(RA)的预测一致。
应急交通疏散中的逆向车道操作方法
,蔡靖,程霄楠,谢天生
科技导报 , 2013, DOI: 10.3981/j.issn.1000-7857.2013.h2.006
Abstract: 逆向车道操作方法是应急交通疏散研究的重要课题。以元胞传输模型(CTM)理论为基础,以最小化总行程时间为目标函数,构建了逆向车道操作数学模型。将模型应用于实例,利用MathProg语言和Lp_solve求解器对模型进行数值求解,利用微观交通仿真软件VISSIM对疏散过程进行微观仿真,并通过数值结果与仿真结果的比较,对模型进行了验证,从而使应急交通疏散的研究更贴近于实际情况。研究结果表明,该模型的逆向车道操作方法可显著提高疏散路网容量和疏散效率。
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