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双水相系统在抗生素提取和合成中的应用
朱自强,,李勉
化工学报 , 2001,
Abstract: 论述了双水相萃取在各类抗生素浓缩、分离中的应用,表明双水相萃取技术不仅能用于生物大分子的分离,而且也能用来浓缩含生物小分子物质的发酵液.概述了双水相系统中的热力学模型和传质研究进展.提出只有加强药物化学、生物化学、化工工艺和化学工程诸学科间的相互渗透,实现学科杂交,才是提高传统抗生素产品分离科技含量的正确方向和解决实际问题的重要途径.对于水溶性产品,如抗生素、糖、糖肽等的合成,需在水相中进行,此处利用双水相系统有其明显优势.介绍了双水相系统与固定化酶相结合的动力学控制合成头孢力新的实例,充分说明了新方法的特点和介绍了实验方法的梗概.结果表明,双相合成远优于单相合成,主要体现在降低了产物头孢力新的水解程度,有效地提高了其合成收率
大肠杆菌二硫键形成蛋白a(dsba)研究进展
罗曼?,,姚善泾?
生物工程学报 , 2007,
Abstract: 二硫键形成蛋白a(disulfidebondformationproteina,dsba)是存在于大肠杆菌周质胞腔内的一种参与新生蛋白质折叠过程中催化二硫键形成的折叠酶。综述了dsba三维结构、进化过程、协助蛋白质体内外复性方面的研究进展。dsba比硫氧还原蛋白具有更强的氧化性,其强氧化性来自于cys30残基异常低的pka值和不稳定的氧化型结构,通过定点突变的研究表明了cys30残基是dsba活性中心最关键的氨基酸残基之一。dsba不论在体内与目标蛋白融合表达还是在体外以折叠酶形式添加,都能有效地催化蛋白质的折叠复性,同时dsba还具有部分分子伴侣的活性。
SA/CS-CaCl2/PMCG微胶囊的生物相容性研究
张立央,,姚善泾
生物工程学报 , 2002,
Abstract: 介绍了一种新型多组份生物微胶囊体系——SA/CS-CaCl2/PMCG微胶囊。考察了PMCG和SA/CS-CaCl2/PMCG微胶囊体系对大肠杆菌和酿酒酵母生长的影响,并用SA/CS-CaCl2/PMCG生物微胶囊进行了固定化培养大肠杆菌和酿酒酵母的研究。结果表明,与其它合成聚阳离子类似,PMCG组分对细胞生长有明显的抑制作用,但是在制胶囊过程中以及在用SA/CS-CaCl2/PMCG微胶囊对大肠杆菌和酿酒酵母培养过程中,都显示了良好的生物相容性,因此作为整个体系来说,该微胶囊可用于微生物细胞的固定化培养。  
超临界溶液浸渍法制备缓释药物
,余金鹏,姚善泾,朱自强
化工学报 , 2010,
Abstract: 超临界溶液浸渍法(supercriticalsolutionimpregnation,SSI)是一种将小分子物质负载到聚合物中的过程技术,主要是利用超临界流体的高扩散系数、低黏度及其对聚合物的溶胀作用,使小分子物质通过分子扩散作用迅速进入溶胀的聚合物并包裹于其中。近年来该技术已用于制备缓释药物/聚合物复合微球、薄膜和纤维等。该法的主要优点在于载体结构灵活,拓展了超临界技术在控释药物制备中的应用。本文主要介绍了SSI法的原理、流程及其在缓释药物制备中的应用,并展望了SSI法的发展趋势。
加压二氧化碳对大肠杆菌的存活影响及其致死效果
吴垠,姚善泾,
化工学报 , 2006,
Abstract: 加压二氧化碳对E.coli有明显的致死作用,按照致死速率的快慢,整个过程可分为两个阶段:缓慢死亡期和迅速死亡期.CO2进入水相和细胞的速率控制着缓慢死亡期的持续时间和致死速率.提高压力和温度有利于提高加压CO2对E.coli的致死效果.较低的初始环境pH可以加快E.coli在加压CO2下的死亡.考察了搅拌和泄压方式对加压二氧化碳使E.coli致死效果的影响,结果表明改善二氧化碳的传质速率是提高致死效果的关键.不同菌龄的细胞对加压二氧化碳的敏感程度不同,对数生长期的细胞更易致死.
SA/CS-CaCl2/PMCG新型生物微胶囊的扩散与截留性能
张立央,姚善泾,
化工学报 , 2004,
Abstract: 通过测定不同相对分子质量的PEG传递透过SA/CS-CaCl2/PMCG生物微胶囊的性能,确定了SA/CS-CaCl2/PMCG膜的截留相对分子质量在2000左右。同时又测量了小分子物质葡萄糖、乳糖、乙醇和谷氨酸在3种SA/CS-CaCl2/PMCG微胶囊中的扩散性能,并用数学模型计算出了这些物质在不同微胶囊的混合扩散系数Dm以及相应的微胶囊膜层中扩散系数D1。结果表明:Dm随PMCG浓度的增大先增大而后呈减小趋势,而D1则随PMCG浓度的增大而增大;并且D1《Dm,说明微胶囊中的传质阻力主要在微胶囊膜层中。
重组人γ-干扰素包涵体稀释复性
靳挺,,费峥峥,姚善泾
化工学报 , 2004,
Abstract: 采用稀释法研究了重组人γ-干扰素包涵体复性条件,如温度、pH值、蛋白浓度、复性液中脲浓度,同时对加样操作方式进行了考察,得到了较为适宜的复性条件.结果表明,脲能有效地抑制复性过程中蛋白质的聚集,合适的脲浓度随复性蛋白浓度的增加而有所增大,在4℃、pH值8.0、脲浓度1.0mol?L-1、蛋白浓度0.1mg?ml-1及脉冲加样操作方式等条件下,复性后重组人γ-干扰素的活性为2.39×105IU?ml-1,比活达2.21×107IU?mg-1.
超临界辅助雾化制备适于气溶胶给药的药物微粒
朱自强,,姚善泾
化工学报 , 2005,
Abstract: 超临界流体辅助雾化法(SAA)是一种新型的以超临界流体为基础的固体微粒制备工艺,既能用于水溶性,也可用于脂溶性的溶质.该工艺能制备出适用于气溶胶给药要求的微粒,预期可在药物行业内得到应用.综述了SAA过程的形成和特色、工艺流程和操作条件以及相应的造粒结果.评述了6种药物微粒的粒度、粒度分布及其形貌.经SAA加工后的药物质量未见变化,目前该工艺已进入中试阶段,展示出较快的发展速度.比较了SAA和现有的主要以超临界流体为基础的微粒制造工艺.展望了加强应用基础研究的必要性,进一步分析了SAA的机理和过程实质.
疏水层析法复性重组人γ-干扰素
,潘海学,姚善泾
化工学报 , 2005,
Abstract: 重组人γ-干扰素(rhIFN-γ)在大肠杆菌中高效表达,并形成包涵体.利用疏水作用层析(HIC)法对rhIFN-γ进行复性.采用了等尿素梯度和线性尿素梯度两种复性方法,考察了线性尿素梯度下尿素梯度长度、尿素终浓度、流速和上样量对rhIFN-γ复性的影响.在优化的线性尿素梯度复性条件下,尿素浓度在10个柱体积内从6mol?L-1下降到2mol?L-1,流速为1ml?min-1、上样量为0.568mg时,rhIFN-γ的活性收率比稀释复性法提高6.5倍,蛋白质量收率为36%,比活达1.9×108IU?mg-1.
重组瑞替普酶包涵体制备及其体外复性
王俊雄,,姚善泾
化工学报 , 2015, DOI: 10.11949/j.issn.0438-1157.20141141
Abstract: 将携带重组瑞替普酶(reteplase,rt-PA)的质粒成功转化到大肠杆菌BL21(DE3)后,诱导表达获得包涵体,考察了诱导剂浓度、培养温度和培养时间等条件对目标蛋白表达量的影响。在此基础上,对高效表达的rt-PA包涵体体外复性过程进行了详细研究。首先利用单因素实验考察了复性液pH、GSH浓度、GSH/GSSG比例、蛋白浓度等各种复性条件对复性效果的影响;并结合正交实验设计,进一步研究了高蛋白浓度下复性后rt-PA酶活变化情况。以0.2mmol·L-1IPTG诱导,在33℃下培养6h,每升发酵液约可获得1.7g粗制包涵体。适宜的复性条件为蛋白浓度50mg·ml-1,pH10.0,GSH浓度1mmol·L-1,GSH/GSSG比例8,复性收率为87.2%。影响高蛋白浓度下rt-PA复性的关键因素为复性液初始pH及GSH浓度,在800mg·ml-1蛋白浓度下复性后rt-PA比活可达7.54×104IU·mg-1,荧光光谱分析结果表明复性后rt-PA恢复了其天然态结构。
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