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生姜蛋白酶的分离纯化
,黄雪松
食品科学 , 2003,
Abstract: ?生姜蛋白酶能够特异地水解p2位置是脯氨酸(pro)的肽和蛋白质,这种对pro的特异性使生姜蛋白酶成为一种非常有前途的用于蛋白质测序和蛋白质中稳定结构域识别的工具酶。中国传统食品“姜撞奶”采用姜汁作为凝乳剂,其中的凝乳因子已被证明是生姜蛋白酶。生姜蛋白酶的凝乳性质使之有望成为奶酪生产中小牛皱胃酶的替代品。此外,生姜蛋白酶在工业上还有更广阔的应用前景。本研究针对生姜蛋白酶的特点,制订一套简便有效的纯化方案,为进一步的基础研究和应用研究提供合格的样品酶。经过实验确立了以下纯化方案:将生姜制成丙酮粉,然后用20倍(w/v)0.1mol/l,ph8.0的磷酸缓冲液提取;上清液加硫酸铵至40%饱和度,其间控制ph>7.0,离心弃去沉淀,上清液继续加硫酸铵至80%饱和度,离心,取沉淀;将沉淀先对0.1mol/l的氨水透析2h,然后对蒸馏水透析至无so42-检出,最后对层析初始缓冲液进行延长透析至内外离子强度相等;上deae-纤维素de-52柱;层析初始缓冲液为0.01mol/l,ph8.0tris(含0.5mmol/ldtt,0.2mol/lnacl),0.05~1mol/lnacl梯度洗脱,柱1.55.0cm,流速0.75cm3/min,收集速度3ml/管,收集酶活峰,得到在sds-page上表现为一条带的样品c1和c2。
基因重组糖蛋白-人尿激酶原糖基化修饰的质谱测定
,李晓海,蔡耘,钱小红
分析化学 , 2005,
Abstract: 酶法结合生物质谱技术测定了基因重组糖蛋白-人尿激酶原(rhProUK)的N-糖含量、唾液酸含量分别为9%和5%。糖蛋白/肽先经ConA凝集素亲和富集,肽:N-糖苷酶F(PNGaseF)对N-糖基化位点进行特异性质量标记,然后利用LC-MS/MS技术测定出N-糖基化位点在第302位天冬酰胺残基上。
基质辅助激光解吸附电离-飞行时间串联质谱研究重组人促红细胞生成素一级结构
卢庄,王杉,,王京兰,张养军,应万涛,徐友宣,钱小红,吴侔天,蔡耘
分析化学 , 2006,
Abstract: 建立了生物质谱研究rhEPO一级结构的系列方法,包括分子量、唾液酸含量以及N-糖含量等糖基化性质的测定方法,并用于4种国产rhEPO样品的分析;在此基础上优化酶切条件,使测定的肽质量指纹谱(PMF)的覆盖率均达到98%,成功鉴定了4个样品中的全部N-糖基化位点以及对分子中两对二硫键进行了结构确证,测定4个样品分子量分别为27754.1±27.4Da、27941.4±23.2Da、27682.5±22.0Da和27914.7±22.5Da;唾液酸含量分别为5.0%、4.8%、5.6%和5.4%;糖含量分别为34.3%、34.7%、34.1%和34.6%。此外还对4种产品在O-连接糖型及N-连接糖型上的区别做了初步探讨。
非饱和土二维广义固结非线性数值模型

岩石工程学报 , 1992,
Abstract: 膨胀性或湿陷性非饱和土一般存在四种变形效应,即力效应、水效应、温度效应和流变效应。本着简单实用的原则,本文研制了一个考虑孔隙水、气运动,土骨架非线性弹性变形及其相互耦合作用,非热、汽效应和流变效应的二维广义固结数值模型。通过室内试验验证和应用实例分析表明,该数值模型不但可以模拟外力作用下产生的土体变形,而且能追踪非饱和土体水分迁移和变化以及伴随而来的变形,该模型具有乐观的应用前景。
也谈土力学研究的理论与实践——李广信、杨光华文章读后

岩石工程学报 , 1992,
Abstract: <正>一、前言岩土工程学报1991年第5期发表了“关于土力学理论发展的一些看法”(简称“看法”)和“岩土类材料的多重势面弹塑性本构模型理论”(简称“多重势面理论”)两篇文章,文章耐人寻味,笔者读后颇受启发。岩土工程学报能开展这样的讨论是很可喜的,它将引起广大青年学者的关注和思考。“看法”一文,不仅在学术上,而且就科学研究方法展开讨论,提出了这样一个严肃的问题,即“有志于岩土工程和岩土力学工作的青年学者们应当走一条什么样的道路,才能不浪费自己的才华和精力,从而在此学科中作出自己的贡献。”笔者现就自己由此而感发的几点想法奉献给岩土工程学报和广大青年读者。这些想法未必成熟和全面,不妥之处恳望前辈、同行批评指正。
非饱和土弹塑性应力应变特性模拟

岩石工程学报 , 1995,
Abstract: 简单地回顾了非饱和土应力应变本构模型的研究概况,就非饱和膨胀性土、黄土和击实土等的变形特性作简介。在此基础上,根据硬化塑性理论和临界状态概念,提出了一个描述非饱和土应力应变特性的一般本构理论框架。该理论框架包含了几个不同的模型,能够以统一的方式描述非饱和土性的许多基本方面
为了明天,为了下一代———对建设华西亚高山植物园的探索

生物多样性 , 1995,
Abstract:
液相色谱-质谱联用方法用于严重急性呼吸系统综合症冠状病毒结构蛋白质的研究
张养军,王京兰,蔡耘,应万涛,郝运伟,李蕾,李晓海,戴舒佳,,贺福初,钱小红,王杰,魏开华
分析化学 , 2004,
Abstract: 通过高效液相反相色谱、毛细管反相色谱-串联质谱联用方法对SARS病毒攻击细胞的研究,鉴定出了N、S和M3种SARS结构蛋白质,并准确测定了N蛋白质的分子量。由分子量结果和生物信息学推断的N蛋白质的理论分子量比较,可以确定N蛋白质不存在常见的磷酸化修饰和糖基化修饰或含量很低。进一步的研究表明:N蛋白质可能存在降解现象,其降解机理尚需探索。另外,通过对样品直接酶切后进行两维毛细管分离和串联质谱鉴定与对样品先进行分离,然后再进行毛细管反相分离串联质谱鉴定方法比较,表明两种方法在蛋白质组学研究中各具优缺点,可根据不同目的选择使用
非饱和土—维固结简化计算
,沈珠江
岩石工程学报 , 1991,
Abstract: <正>一、前言众所周知,岩土工程中常用的固结理论有太沙基固结理论,比奥固结理论及中ⅱophh,b·a.固结理论等,所有这些理论只适用于理想饱和土或孔隙气体呈封闭状态的准饱和土。对于广泛存在于大自然中的孔隙气和孔隙水能独自流动的各种非饱和土,目前尚无相应可行的固结理论。
非饱和土孔隙气、水、汽、热耦合运动之模拟(英文)
,沈珠江
岩石工程学报 , 2000,
Abstract: 旨在介绍一个描述非饱和土孔隙气、水、汽、热耦合运动的理论模型。该模型假定孔隙气和孔隙水运动分别遵循达西定律,而影响水蒸汽运动的两种主要因素分别是分子扩散和孔隙气运动,其中受分子扩散影响的孔隙水蒸汽运动可用fick定律描述。热转移则主要包括了三种形式,即传导、对流和汽化潜热。根据有限单元法,编制了一个三维的计算机程序用以模拟非饱和土孔隙气、水、汽、热的耦合运动。通过数值分析与干沙试验结果之比较,验证了文中之理论模型和计算机程序的可靠性
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