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ilvBNC操纵子协同cimA基因过表达提高Corynebacterium glutamicum YILW L-异亮氨酸产量的研究

- , 2016, DOI: 10.13982/j.mfst.1673-9078.2016.2.005
Abstract: L-异亮氨酸是人和动物八种必需氨基酸之一,在生命活动中具有重要地位。乙酰羟基酸合成酶(acetohydroxyacid synthase, AHAS)是L-异亮氨酸合成途径的关键酶(由ilvBN编码),α-酮基丁酸是L-异亮氨酸合成的重要前体。因此强化ilvBN的表达以及增加α-酮基丁酸的供应理论上可提高L-异亮氨酸的合成。cimA编码的甲基苹果酸合成酶可以催化丙酮酸和乙酰-CoA快速生成L-异亮氨酸前体α-酮基丁酸,从而增强主代谢流通量。本文采用基因重组手段将L-异亮氨酸生产菌株Corynebacterium glutamicum YILW ilvBNC操纵子中的启动子替换为强启动子Ptac获得C.glutamicum YILWPtac。摇瓶发酵结果显示该菌株L-异亮氨酸产量和转化率分别较出发菌株提高了14.8%和18.6%。在此基础上过表达cimA基因,获得C. glutamicum YILWPtacpXMJ19cimA,其L-异亮氨酸酸产量和糖酸转化率分别较出发菌株提高了14.5%和42.4%。本研究可为氨基酸生产菌株的选育提供依据。
L-isoleucine is one of the eight essential amino acids for humans and animals, and it plays a vital role in numerous life functions. α-Ketobutyrate is the key precursor of L-isoleucine, and acetohydroxy acid synthase (AHAS; encoded by ilvBN) is the key enzyme in L-isoleucine synthesis. Therefore, L-isoleucine production can be theoretically increased either by increasing the supply of α-ketobutyrate or ilvBN expression. Citramalate synthase, encoded by cimA, catalyzes the generation of α-ketobutyrate from pyruvate and acetyl-CoA. α-Ketobutyrate is a direct precursor of L-isoleucine; thus, increasing cimA expression increases the metabolic flux of L-isoleucine synthesis. In the present study, the promoter of the ilvBNC operon in the L-isoleucine-producing strain Corynebacterium glutamicum YILW was replaced by the potent tac promoter to construct a recombinant strain, C. glutamicum YILWPtac, which overexpresses ilvBNC. Shake flask fermentation experiments showed that L-isoleucine production and glucose (Yp/s) conversion in the recombinant strain were increased by 14.8% and 18.6%, respectively. To further increase L-isoleucine production and Yp/s, a construct containing the cimA gene under the control of a strong promoter was introduced into C. glutamicum YILWPtac to construct C. glutamicum YILWPtacpXMJ19cimA. Compared to the original strain, in C. glutamicum YILWPtacpXMJ19cimA, L-isoleucine production and Yp/s were increased by 14.5% and 42.4%, respectively. Thus, the findings of this study provide a basis for constructing new and improved amino acid-producing C. glutamicum strains.
钢桁架优化设计中稳定及收敛问题的有效解法
任治章,伟力,
力学与实践 , 2007, DOI: 10.6052/1000-0992-2006-234
Abstract: 在超静定型钢桁架满应力优化设计中,压杆的稳定性,即计算迭代中压杆的稳定许用应力,提高迭代过程的收敛速度,是两个关键问题,迄今为止尚未得到有效地解决,从而影响了满应力优化设计方法在桁架结构中的应用.为解决上述两问题,首先建立了两个拟合函数,建立了型钢截面积与惯性半径及压杆的稳定,系数与柔度之间的函数关系,继而导出了压杆稳定许用应力的计算方法,归纳出了加速收敛的有效措施------面积平均法.算例证明了本文方法的可靠性,供有关结构设计人员参考.
researchinastronomyandastrophysics的国际化发展实践
亚媛?,蓉?
中国科技期刊研究 , 2015, DOI: 10.11946/cjstp.201412211221
Abstract: 摘要【目的】探索实现我国科技期刊国际化的途径,提供一些国际化办刊思路。【方法】以researchinastronomyandastrophysics(raa)走向国际化的努力为例,重点介绍raa建设国际化编委队伍、争取国际优秀稿源、实现国际化审稿,并在出版发行方面开展国际化合作等方面采取的一系列措施。【结论】raa通过全方位的国际化努力,进一步扩大了期刊的宣传力,加强了期刊的影响力,从而提高了期刊的影响因子。
Phytoplankton community and its relationship with environment factors in the Yalujiang River Estuary
鸭绿江口浮游植物群落特征及与环境因子的关系

张晓举,,于海洋
海洋科学 , 2012,
Abstract: In order to study the structure of the phytoplankton community of the Yalujiang River and its influencing factors, phytoplankton samples were collected from the Yalujiang River Estuary and its adjacent waters in March, 2009. A total of 48 phytoplankton species were identified, including forty-one diatoms, six dinoflagellates and one golden-brown alga. Phytoplankton species can be divided into three ecological groups: eurythermal taxa, warm water taxa and warm temperature taxa, and the eurythermal taxa was the dominant group. The average number of phytoplankton cell was 4.67 × 108/ m3, and the cell number decreased from the inner section of the Yalujiang River estuary to open sea. The survey results showed that the structure of phytoplankton community was simple with Skeletonema costatum as the main dominant species. From the correlation analysis, it is concluded that temperature and salinity were the major limit factors for the number of phytoplankton cells, and the Yalujiang River runoff had made a great impact on the number of phytoplankton cells.
弹性液舱内液体晃荡实验研究
蒋梅荣,,鸿杰,王永学
海洋工程 , 2013,
Abstract: 通过物理模型实验,对水平简谐激励下弹性矩形液舱内液体晃荡问题进行了研究。实验中给出了不同液深和不同激励振幅下弹性液舱内液体最低阶固有频率。采用影像采集与分析系统获得液舱内自由液面的形状和高度,通过压力采集系统得到舱壁上的压力分布。实验中分析了不同液深、不同激励频率下弹性和刚性液舱内自由液面高度和晃荡压力的变化特性。比较了弹性和刚性液舱内不同位置处自由液面高度随外界激励频率的变化规律,以及舱壁上不同位置处的压力峰值随外界激励频率的变化规律。结果表明:非共振情况下,弹性和刚性实验结果及理论值三者的波高和压力较为接近。共振情况下,弹性和刚性波高基本相等,在近舱壁处二者明显大于理论值,而在远离舱壁处二者与理论值存在一定差别;弹性压力较刚性压力略小,但二者与理论值差别较大。
升压灵注射液的加速稳定性试验
孔令东,尧林,,陈廉
中国中药杂志 , 2000,
Abstract: 升压灵注射液是长期临床实践经验总结出治疗厥脱证的经验方,系由陈皮、人参2味中药经提取、精制而成的静脉注射液,具行气通脉、扶正固脱功效,在中医临床上可作为急症制剂[1,2]。药理实验结果表明升压灵注射液可明显提升休克状态下的动物和病人的血压,增加冠脉血流量和改善心率作用,其中陈皮中辛弗林类似肾上腺素能α受体兴奋剂,为主要升压活性成分。本文应用化学动力学原理,对升压灵注射液进行恒温加速试验,考察其颜色、澄明
噪声方差未知条件下的视频目标跟踪
陈金广,,马丽丽,
中国图象图形学报 , 2015, DOI: 10.11834/jig.20150706
Abstract: 目的基于卡尔曼滤波的视频目标跟踪算法需要事先获得过程噪声和观测噪声方差,但在实际应用中,无法得知这两种噪声方差的准确值。此外,由于目标运动的随机性和视频场景中背景的复杂性,噪声方差也会随时间发生动态变化。如果设定的噪声方差不准确,跟踪精度会受影响,严重时会导致目标跟踪失败。考虑到上述问题,提出一种新的解决方法。方法将带遗忘因子的推广递推最小二乘法(EFRLS)运用到视频目标跟踪研究领域。在该算法中,无需使用噪声方差,首先利用MeanShift算法获得目标位置的初步估计,再利用EFRLS算法估计下一帧目标的位置。结果该算法明显好于传统MeanShift算法,并且与Kalman结合MeanShift算法的跟踪性能相当。此外,在目标发生严重遮挡时,该算法优于Kalman结合MeanShift算法,具有较好的跟踪性能。结论本文算法无需设置噪声参数,可以实现目标在发生严重遮挡和遮挡后目标重新出现的情况下的准确跟踪,提高了跟踪的鲁棒性,具有一定的工程使用价值。
肝纤维化过程中calpain2与caspase-3表达变化及意义
谢汝佳,,杨婷,静静,杨勤
中国公共卫生 , 2014, DOI: 10.11847/zgggws2014-30-01-25
Abstract: ?目的探讨大鼠肝纤维化过程中钙激活中性蛋白酶2(calpain2)与半胱氨酸天冬氨酸酶3(caspase-3)表达变化及其在肝纤维化发生发展中作用。方法雄性Wistar大鼠40只,随机分为对照4、8周组和肝纤维化模型4、8周组,每组各10只;肝纤维化组按0.3mL/100g皮下注射40%CCl4植物油溶液,每隔3d注射1次,对照组给予等量植物油;测定肝脏指数、血清谷丙转氨酶(ALT)及谷草转氨酶(AST)含量,苏木素伊红(HE)染色观察肝组织病理学改变;免疫组织化学法及westernblot检测肝组织中calpain2与活化的caspase-3蛋白表达含量;聚合酶链反应检测肝组织中calpain2mRNA表达。结果肝纤维化4、8周组大鼠血清ALT、AST分别为(727.00±249.70)、(1260.00±579.25)和(616.00±209.98)、(1167.00±318.18)U/L,均高于对照组(P<0.01);肝纤维化组大鼠肝组织发生明显的纤维化改变,其中以8周组更为明显;与对照组比较,肝纤维化8周组大鼠肝组织中calpain2蛋白(23.1±3.77)和mRNA(167.93±50.39)表达均升高(P<0.01),而在肝纤维化4、8周组活性caspase-3蛋白表达[(18.76±3.54)、(25.46±4.77)]均增加(P<0.01)。结论calpain2与caspase-3在蛋白及基因水平表达变化,可能参与了肝纤维化的发生发展过程。
鸭绿江口浮游植物群落特征及与环境因子的关系
张晓举,,于海洋
海洋科学 , 2012,
Abstract: 于2009年3月对鸭绿江河口进行了10个站的浮游植物生态调查,分析了该海域浮游植物的种类组成、优势种类、群落结构以及水平分布等特征参数。本次调查共鉴定浮游植物48种,其中硅藻种类最多,达41种,甲藻其次,为6种,金藻1种。浮游植物可划分为广温类群、暖水类群和暖温类群3个生态类群,以广温类群为主。浮游植物细胞数量平均4.67×108个/m3,细胞数量自河口向外海逐渐降低。其中,中肋骨条藻(Skeletonemacostatum)占据绝对优势。浮游植物群落优势种单一且优势度较大,群落结构相对简单。相关性分析表明温度和盐度是浮游植物细胞数量的主要限制性因子。浮游植物数量受鸭绿江径流的影响较大。
渤海湾南部水域春秋季强壮滨箭虫摄食压力变化的初步研究
张晓举,,于海洋
海洋通报 , 2013, DOI: 10.11840/j.issn.1001-6392.2013.04.011
Abstract: 于2010年5月和10月在渤海湾南部进行了10个站位的浮游动物生态调查,分析了强壮滨箭虫对浮游动物的摄食压力,结果表明,春季强壮滨箭虫(Aidanosagittacrassa)的数量分布受控于温度和盐度,强壮滨箭虫的生物量为279mg/m3,丰度为33.8ind/m3,摄食率为0.95mgC/m2·d,强壮滨箭虫对浮游动物总生产力和现存量的摄食压力分别为6.98%和0.21%,优势种中华哲水蚤(Calanussinicus)的数量分布与强壮滨箭虫呈现显著相关,相关系数为0.648,中华哲水蚤是强壮滨箭虫主要的食物来源之一。秋季,强壮滨箭虫生物量和丰度分别为66mg/m3和30.5ind/m3,摄食率为0.50mgC/m2·d,强壮滨箭虫对浮游动物总生产力和现存量的摄食压力分别为3.43%和0.72%,强壮滨箭虫的数量与桡足类的数量呈显著相关,中小型桡足类是强壮滨箭虫的主要食物来源。研究表明,温度和黄海海流是强壮滨箭虫摄食压力变化的主要因素。
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