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Overexpression of a Sweet Protein Monellin in Escherichia coli
甜蛋白Monellin基因在大肠杆菌中的高效表达

CHEN Zhong-Jun,CAI Heng,LU Fu-ping,DU Lian-xiang,
陈忠军
,蔡恒,路福平,杜连祥

生物工程学报 , 2005,
Abstract: According to the amino acid sequence of monellin, a single chain 294bp monellin gene was synthesized and inserted into vector pET-22b to yield the recombinant secretion plasmid pETMO. The single-chain monellin gene was designed based on the biased codons of E.coli so that its expression would be then optimized. Under the expressing conditions, monellin was produced accounting for 44.8% of total soluble proteins. The E.coli-expressed single-chain monellin is 3000 times sweeter than sucrose. The thermal-stability and acid-resistance of the protein are higher than the natural monellin.
甜蛋白monellin基因在大肠杆菌中的高效表达  [PDF]
陈忠军 蔡恒 路福平* 杜连祥
生物工程学报 , 2005,
Abstract: 据已报道的单链monellin甜蛋白的氨基酸序列,采用细菌偏爱密码子,人工合成了全长294bp的monellin基因。插入到大肠杆菌表达载体pet_22b中,构建重组分泌型表达载体petmo。经iptg诱导petmo所含有的甜蛋白基因可在大肠杆菌bl21(de3)中高效表达,表达量占菌体可溶性蛋白的44.8%。且经纯化后测定其甜度是蔗糖的3000倍。得到的甜蛋白热稳性及耐酸性均比天然产物有所提高。
monellin-egfp融合蛋白在毕赤酵母中的表达  [PDF]
金筱耘,赵爱春,李军,李镇刚,王茜龄,吴存容,余茂德
食品科学 , 2012,
Abstract: ?根据已报道的monellin甜蛋白氨基酸序列,结合毕赤酵母与桑树密码子的偏好性,人工设计合成单链monellin基因,并与增强型绿色荧光蛋白egfp基因连接,构建融合表达载体。采用电击转化法成功将表达载体导入毕赤酵母gs115中,并获得高效表达的重组子ppic9k-m-e。经pcr检测,sds-page和westernblot杂交证实已表达出融合蛋白,该蛋白经纯化与盲测实验,结果显示其甜度约为标准蔗糖的500倍。
甜蛋白大肠杆菌工程菌株发酵条件的优化及重组蛋白纯化方法的研究  [PDF]
陈忠军,蔡恒,路福平,李正英,杨志华
华北农学报 , 2006, DOI: 10.7668/hbnxb.2006.S3.005
Abstract: 将带有monellin基因的重组分泌型表达载体pETMO转入大肠杆菌BL21(DE3)。得到重组工程菌株BLC01。研究不同的表达条件对甜蛋白表达水平的影响,得到优化发酵条件:装液量为50ml/250ml三角瓶,当培养液OD值达0.8时,添加诱导剂IPTG至浓度为0.9mM,32℃诱导5h。此时,甜蛋白monellin表达量可高达细菌可溶性蛋白的45.2%。超声破碎细胞后,利用热处理和酸处理结合的方法有效去除宿主蛋白,透析后利用SephadexG-50进行柱层析,得到纯化重组甜蛋白monellin。monellin基因在重组大肠杆菌中的表达产物具有生物活性。
宜宾糟蛋  [PDF]
高元庆
食品科学 , 1982,
Abstract: ?宜宾糟蛋是四川省宜宾地区传统土特产品之一,是用粉糟(米酒)泡制而成。蛋质软嫩,气味芳香,味鲜美而微甜,入口有酒香,深受群众欢迎,在港澳和东南亚市场上享有一定盛誉,也是宴会席上别具一格的风味食品。营养
生防技术对甜樱桃果蝇诱杀效果研究  [PDF]
韦欣伶,郑有强,吕秀兰,陈仲刚,龚荣高,何昊
北方园艺 , 2012,
Abstract: 采用不同类型诱捕器、不同种类及浓度的性诱剂与杀虫剂对汶川县海拔为1600、1800与2000m3个地方的甜樱桃果蝇进行诱杀效果的比较。结果表明5月下旬至6月上旬为甜樱桃果蝇发生高峰期,海拔1800m地方的甜樱桃果蝇数量最多,应加大防治力度;甜樱桃果蝇诱杀效果以自制诱捕器C(在矿泉水瓶中部对称划开2个1.2cm的十字开口,诱芯为脱脂棉球)+98%诱蝇酮1.5mL+1.0%敌百虫(杀虫液其余成分为红糖3.0%,52°白酒5.0%,陈醋1.0%,盛200mL于诱捕器中)的组合最好。
立春时节话竖蛋  [PDF]
刘延柱
力学与实践 , 2013, DOI: 10.6052/1000-0992-20130125
Abstract: 从立春竖蛋的习俗谈起,叙述哥伦布竖蛋,特斯拉利用电磁感应的哥伦布蛋,以及用手捻鸡蛋直立旋转等现象.解释竖蛋现象的力学原理.
蛋鸭的产蛋机制及其营养调控  [PDF]
动物营养学报 , 2010, DOI: 10.3969/j.issn.1006-267x.2010.05.004
Abstract: 目前国内外关于蛋鸭产蛋机制、蛋鸭营养调控方面的研究均落后于养鸭生产的需要,相关的文献报道也比较少。本文将对国内外相关文献报道进行汇总,结合蛋鸡等产蛋机制方面的研究报道,重点综述蛋鸭的产蛋机制研究现状及营养调控措施。
诱集物对金龟子诱集作用  [PDF]
李仲秀,刘春芹,王庆雷,崔景岳
华北农学报 , 1995, DOI: 10.3321/j.issn:1000-7091.1995.z1.033
Abstract: 研究表明,从日本金龟子中提取性诱集物对我国北方丽金龟中Popillia属有很强诱集力,其中对四纹丽金龟、琉璃丽金龟诱集量最大;从玫瑰花中提取诱集物对我国北方花金龟中白星花金龟和小青花金龟等诱集力最强,尤以后者为甚。这两种诱集物可作为上述金龟子预测预报和防治手段。
电子测压蛋  [PDF]
祖静,张文栋
兵工学报 , 1991,
Abstract: ?本文介绍了一种新型火炮膛压测试装置——电子测压蛋的工作原理和结构设计特点,给出了电子测压蛋在实弹测试中所获得的数据及压力曲线,并将其与铜柱测压器所测得结果进行了分析对比。
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