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基于环氧功能基团的杂化硅胶固定化酶反应器  [PDF]
吴帅宾, 马俊锋, 杨开广, 刘晋湘, 梁振, 张丽华, 张玉奎
中国科学 生命科学 , 2010,
Abstract: 在蛋白质组学研究中,为解决自由溶液酶解时间长、蛋白酶自降解等问题,各种类型的固定化酶反应器引起了人们的关注.采用溶胶凝胶法,在100μm内径毛细管内,以3-(甲基丙烯酰氧)丙基三甲氧基硅烷为功能单体,以四乙氧基硅烷为交联剂,制备了一种新型的杂化硅胶整体材料.并通过在整体柱表面由环氧功能团水解得到的二醇与胰蛋白酶(trypsin)的氨基进行一步反应,实现了胰蛋白酶固定化.利用该IMER,在47s内实现了牛血清白蛋白的酶解;经反相色谱分离和质谱鉴定,序列覆盖率在35%以上,与自由溶液酶解12h的效果相当.结果表明,基于亲水性杂化硅胶整体材料的IMER有望在蛋白质组学研究中发挥重要作用.
固定化酶酸化/UASB两相厌氧有机酸代谢特征  [PDF]
于宏兵,吴睿,段宁,林学钰,黄涛
环境科学 , 2006,
Abstract: 以固定化酶酸化相和UASB产甲烷相为两相厌氧系统进行连续流实验,研究了酸化相和产甲烷相中的有机酸和乙醇的变化特征、变化速率,挥发性有机酸组成,发酵类型以及对COD去除率的影响.结果表明:酸化相的酸化率为28.2%,水解产物组成中乙醇>乙酸>丁酸>丙酸,其中乙醇占44.8%,乙酸占38.4%,丙酸为6.9%,丁酸为9.8%,为乙醇型发酵类型.在产甲烷相中乙醇被去除99.8%,乙酸为92.0%,丙酸为59.1%,丁酸为46.2%,呈乙醇>乙酸>丙酸>丁酸;比较有机酸和乙醇的去除速率呈乙醇>乙酸>丁酸>丙酸,其中乙醇在产甲烷相中去除速率最快为0.21h-1.系统运行稳定,COD去除率达到90%以上,其中对COD去除贡献率顺序为乙醇>乙酸>丁酸>丙酸,
触角状环氧链结构对固定化脂肪酶(YCJ01)酶活的影响  [PDF]
杨长青,郑涛,郁晨晨,周俊,何冰芳,刘晓宁
化工学报 , 2014, DOI: 10.3969/j.issn.0438-1157.2014.05.036
Abstract: 为了改善酶的刚性固定化对酶蛋白构象的负面影响,以原子转移自由基聚合法(ATRP)合成了亲水性、柔性、触角状环氧化酶固定化载体PS-acyl-P(AM-co-GMA),通过改变单体总量与引发剂量比例得到不同链长触角状环氧化酶固定化载体,并将其用于耐有机溶剂脂肪酶(YCJ01)的共价柔性固定化,重点考察了链长对固定化酶酶活的影响。结果表明,链长(增重率不超过3200%)越长,酶活越高。
亲水性环氧聚合物磁性微球的制备及其固定化青霉素酰化酶  [PDF]
薛屏,刘海峰,杨金会
化工学报 , 2008,
Abstract: 通过设计反相悬浮聚合体系,制备了聚甲基丙烯酸缩水甘油酯(GMA)-甲基丙烯酸羟乙酯(HEMA)-N,N′-亚甲基双丙烯酰胺(MBAA)亲水性磁性聚合物GHM微球。球中的Fe3O4微晶呈倒立尖晶石结构,在微球表面存在着大量环氧基和亲水性的羟基及酰胺等基团,这些功能性基团为青霉素酰化酶(PGA)的固定化提供了适宜的微环境;同时,GHM微球具有的大孔结构和较高的比表面积,使其制备的固定化酶的载酶量高,这些有利因素使得固定化酶PGA/GHM在37℃下水解青霉素G钾合成6-氨基青霉烷酸的表观活性达748IU·g-1。PGA/GHM经15次重复使用,其催化活性未出现明显的衰减,在使用中,固定化酶在磁场的作用下能够快速沉降与产物分离。
砷化镓和其它砷化物对大豆种子萌发和异柠檬酸裂解酶(ICL)及超氧物歧化酶(SOD)活性的影响  [PDF]
农业环境科学学报 , 1994,
Abstract: 以砷化物为污染源,研究砷对大豆种子萌发及生理活性物质的影响,结果表明:砷化镓(GaAs)和砷酸钠(Na_3AsO_3三价砷和Na_2HAsO_4五价砷)对大豆种子萌发的影响,在五价砷(GaAs和Na_2HAsO_4)1-5mg/L,三价砷0.1-1mg/L对大豆萌发有促进作用,随着浓度提高,发芽率有所下降;五价砷50mg/L和三价砷10mg/L显著受抑制;五价砷500mg/L和三价砷100mg/L种子萌发完全受抑制,砷化镓与五价砷相类同,砷对异柠檬酸裂解酶(ICL)和超氧物岐化酶(SOD)活性的影响与发芽能力呈正相关,三价砷对ICL和SOD的致钝作用大于五价砷2.5倍,五价砷Na_2HAsO_4大于GaAs。
c-末端酰胺化酶的研究进展  [PDF]
王翔林
中国生物工程杂志 , 1995,
Abstract: c-末端酰胺化酶的研究进展王翔林(沈阳药学院沈阳110015)c-末端酰胺化酶(carboxyl-terminalα-amidatingenzyme,c-ae),又称甘氨肽酰化单氧酶(peptidylglycineα-amidatingmonooxygenase,pam,ec1.14.17.13)是动物体内普遍存在的一种酶。
丙烯酶催化氧化制取环氧丙烷的研究―甲烷菌细胞的吸附固定化  [PDF]
高灿柱,李树本,宁治中,缪德埙
分子催化 , 1991,
Abstract: 用吸附法将甲烷菌整细胞固定在某些有机和无机载体上,制备了丙烯环氧化反应的固定化生物催化剂。不同载体对固定化细胞的催化活性有很大影响,用一填充床流动反应器对吸附在不同载体上的固定化细胞进行了活性考察。结果表明:用有机的疏水载体如聚丙烯,石蜡等制成的固定化细胞具有较高的环氧化催化活性,且不同载体制成的固定化细胞的催化活性大致相同,约在28nmol/mg cell。用无机亲水类载体制成的固定化细胞,其环氧化催化活性差别很大,且大多数这类载体均比有机的疏水载体活性低,但用特殊方法处理过的砂子为载体制成的固定化细胞,其催化活性很高。还发现,用3AK型分子筛和酸处理过的Al_2O_3和3AK型分子筛为载体时,固定化细胞的活性与载体表面酸性有一定关系。
同伦满与同伦单的局部化
沈文淮
科学通报 , 1995,
Abstract: 映射f:X→Y称为同伦满(同伦单),如果对任意空间W及映射u,v:Y→W(u,v:W→X),若u○f(?)v○f(f○u(?)f○v),则u(?)v.本文考虑同伦满与同伦单的局部化,即考虑下述问题.问题 设f:X→Y为同伦满(同伦单),问f的p-局部化f_p:X_p→Y_p是否为同伦满(同伦单)?这里p是素数或0.
大鼠甘氨肽酰化单氧酶在CHO细胞中的活性表达及在体外酰胺化修饰中的应用
江智红,杨宇虹,徐来根杨新颖,夏其昌,李伯良,王德宝
生物工程学报 , 1998,
Abstract: 将大鼠脑cDNA库来源的PAM基因片段,经克隆重组,构建成真核表达质粒pSV—PAM,并转染CH0细胞,获得在cHO中稳定表达活性型口α-酰胺化酶的细胞株DGAE。表达产物为双功能酶,分泌至培养基中的酶活力远高于胞内。体外酰胺化加工研究表明,以α—N—acetyl-Tyr-Val-Gly为底物,该酶催化反应的Km为12.Sμmol/L,Vmax为180μmol/mg/h,而且催化反应中表现有最适铜离子浓度和pH值范围。表达的双功能酶可直接用于合成的多肽和基因工程表达产物的酰胺化加工修饰。
大鼠甘氨肽酰化单氧酶在cho细胞中的活性表达及在体外酰胺化修饰中的应用  [PDF]
江智红 杨宇虹 徐来根杨新颖 夏其昌 李伯良* 王德宝
生物工程学报 , 1998,
Abstract: 将大鼠脑cdna库来源的pam基因片段,经克隆重组,构建成真核表达质粒psv—pam,并转染ch0细胞,获得在cho中稳定表达活性型口α-酰胺化酶的细胞株dgae。表达产物为双功能酶,分泌至培养基中的酶活力远高于胞内。体外酰胺化加工研究表明,以α—n—acetyl-tyr-val-gly为底物,该酶催化反应的km为12.sμmol/l,vmax为180μmol/mg/h,而且催化反应中表现有最适铜离子浓度和ph值范围。表达的双功能酶可直接用于合成的多肽和基因工程表达产物的酰胺化加工修饰。
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