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孕哺期铝暴露对仔鼠海马LTP及Glu含量影响  [PDF]
靳翠红,巫生文,逯晓波,刘秋芳,唐秋实,蔡原
中国公共卫生 , 2011, DOI: 10.11847/zgggws2011-27-12-37
Abstract: ?目的研究孕哺期染铝对仔鼠长时程增强(LTP)和谷氨酸(Glu)含量影响,探讨铝对发育中中枢神经系统毒性作用及机制。方法Wistar大鼠怀孕起染AlCl3至仔鼠哺乳期结束,共计6周,原子吸收石墨炉法测定血铝和脑铝含量;细胞外微电极技术测定LTP;免疫组化法测定海马谷氨酸含量。结果0.2%AlCl3组仔鼠血铝和脑铝分别为(47.43±14.38)mg/L、(13.86±6.60)mg/g;0.4%AlCl3组血铝和脑铝为(55.56±19.07)mg/L、(18.79±5.18)mg/g,与对照组[(33.89±8.74)mg/L,(7.61±3.44)mg/g]比较,血铝、脑铝含量均明显增加(P<0.05);CA1区LTP的诱导和维持明显受到抑制,其群体峰电位幅值增强率明显低于对照组(P<0.01)。孕哺期铝暴露使仔鼠海马内谷氨酸含量下降(P<0.05)。CA1区对照组,0.2%AlCl3组和0.4%AlCl3组谷氨酸平均吸光度(A)值分别为(0.35±0.02)、(0.33±0.02)、(0.29±0.03),阳性面积比分别为(5.06±1.36)、(4.70±0.56)、(1.71±0.23)。结论孕哺期铝暴露可以使仔鼠海马CA1区LTP的诱导和维持受到抑制,谷氨酸水平下降。
猪乳铁蛋白在4种重组乳杆菌中的表达及抑菌活性比较  [PDF]
于慧?,姜艳平?,崔文?,武啸?,何佳?,乔薪瑗?,李一经?,唐丽杰?
生物工程学报 , 2014, DOI: 10.13345/j.cjb.130616
Abstract: 为了获得优化的猪乳铁蛋白乳杆菌表达系统,并比较重组猪乳铁蛋白的抑菌活性,根据乳杆菌使用密码子的偏嗜性优化合成猪乳铁蛋白成熟肽编码序列,将其克隆到乳杆菌表达载体ppg612.1的xhoⅰ/bamhⅰ位点,获得了plf乳杆菌表达载体质粒ppg612.1-plf。将获得的重组质粒分别电转化入干酪乳杆菌atcc393、戊糖乳杆菌klds1.0413、植物乳杆菌klds1.0344和副干酪乳杆菌klds1.0652细胞内,获得4种表达猪乳铁蛋白的重组乳杆菌。经木糖诱导,通过westernblotting和激光共聚焦检测重组猪乳铁蛋白的表达,用elisa方法检测和比较4种重组菌上清中表达猪乳铁蛋白的量,并用琼脂孔穴扩散抑菌法检测4种重组乳杆菌表达乳铁蛋白的抑菌活性。结果表明,乳铁蛋白在4种重组乳杆菌中均得到正确表达,其产物分子量约73kda,重组干酪乳杆菌、重组戊糖乳杆菌、重组植物乳杆菌和重组副干酪乳杆菌的重组猪乳铁蛋白表达量分别为9.6μg/ml、10.8μg/ml、12.5μg/ml、9.9μg/ml。重组猪乳铁蛋白对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、鼠伤寒沙门氏菌、巴氏杆菌和李氏杆菌均有一定的抑菌作用,对金黄色葡萄球菌的抑菌作用最强,且4种重组乳杆菌中重组植物乳杆菌表达产物的抑菌效果优于其他重组菌的表达产物。结果表明在4种乳杆菌中重组猪乳铁蛋白的最佳表达系统为植物乳杆菌,该结果为猪乳铁蛋白的乳杆菌表达系统进一步开发与应用奠定了基础。
孕哺期铅暴露及补钙对仔鼠学习记忆能力影响  [PDF]
魏慈,李玲,王树松,郭宗成
中国公共卫生 , 2009, DOI: 10.11847/zgggws2009-25-01-42
Abstract: ?国内外研究(1)报道,宫内铅暴露对出生后儿童的认知能力、学习记忆能力及神经系统发育均有一定的不良影响,一些发达国家视儿童铅中毒为首要的儿童环境健康问题。很多学者(2)致力于儿童铅中毒的预防及干预研究,他们认为预防铅中毒,除了环境干预,如推广无铅汽油,杜绝使用含铅制品包装或存放食物,营养因素在预防中的作用也不容忽视。赵微等(3)曾报道补钙对中度铅中毒(血铅200~449μg/L)的儿童有显著的治疗作用。本文对孕哺期铅染毒对仔鼠学习记忆能力的影响及其与钙的相互作用进行了研究,并通过观察海马组织中精氨酸加压素(AVP)表达的改变,探讨钙对铅污染的预防机制。
关中黑猪和八眉猪泌乳性能的研究  [PDF]
柳万生?,路兴中?,刘孝惇?
西北农林科技大学学报(自然科学版) , 1990,
Abstract: 在相同条件下,对关中黑猪和八眉猪经产母猪的泌乳性能作了研究。结果表明:关中黑猪经产母猪60d泌乳量315.178kg,日泌乳量5.25kg,显著高于八眉猪的239.227和3.94kg;两品种猪平均日放乳次数为25.75和23.58次,放乳持续时间12.16和11.42s,放乳后的拱奶时间2.13和2.31min,放乳间隔53.67和58.36min,泌乳行为与导乳量密切相关;仔猪生后20d每公斤增重需要母乳,两品种分别为5.56和5.31kg,生后30d为5.54和5.32kg。
重组猪乳铁蛋白n端的高效表达及抑菌活性检测  [PDF]
哈卓?,赵丽丽?,于晓旭?,宗晓淋?,毛雅元?,张健?,李一经?,葛俊伟?,乔薪瑗?,唐丽杰?
生物工程学报 , 2010,
Abstract: 为获得表达猪乳铁蛋白基因的重组菌株,并检测其表达的重组猪乳铁蛋白抑菌活性,应用rt-pcr方法从泌乳3d后母猪乳腺组织中扩增了猪乳铁蛋白n端1077bp的plf-n基因片段,与genbank上发表的4株猪乳铁蛋白基因序列相比,核苷酸同源性均达到99%以上。为了得到高表达量的plf-n基因,以扩增的plf-n片段为参考模板,经过密码子优化,全基因合成了编码猪乳铁蛋白n端的基因plf-ns。将其定向插入到原核表达载体pet-30b中,转化大肠杆菌bl21,获得了表达plf-ns的重组菌pet-plf-ns/bl21;经iptg诱导,并对表达条件进行优化,以及通过sds-page和westernblotting分析均表明猪乳铁蛋白得到了正确表达,其产物分子量约为42kda,最优表达条件下蛋白表达量占菌体总蛋白的32%,表达产物以包涵体形式存在。包涵体经裂解、纯化、复性处理后纯度达到98%。用琼脂孔穴扩散抑菌法检测表明重组猪乳铁蛋白具有明显的抑菌作用。表明通过基因优化对表达量低的基因进行改造使之高效表达,是一种提高表达效率的有效手段。
猪细小病毒vp2蛋白在干酪乳杆菌表面的表达  [PDF]
徐义刚?,崔丽春?,马广鹏?,唐丽杰?,葛俊伟?,夏春丽?,乔薪媛?,赵丽丽?,李一经?
生物工程学报 , 2007,
Abstract: 将编码猪细小病毒主要免疫保护性抗原vp2基因插入干酪乳杆菌细胞表面表达载体ppg中,构建了重组表达载体ppg-vp2,将其电转化干酪乳杆菌lactobacilluscasei393,获得了表达猪细小病毒vp2蛋白的重组干酪乳杆菌系统,经2%乳糖在mrs培养基中的诱导表达,sds-page检测表明,有约74kd蛋白得到了表达,表达蛋白的大小与理论值相符。western-blot结果分析表明,表达的蛋白可被鼠源ppv抗血清所识别,间接免疫荧光实验结果表明,所表达的蛋白能够在干酪乳杆菌菌体表面检测到。
猪表皮生长因子在植物乳杆菌中的表达及其活性检测  [PDF]
钟泽民?,赖强?,余希尧?,刘德辉?,黄毓茂?
生物工程学报 , 2015, DOI: 10.13345/j.cjb.140544
Abstract: 为获得一株高效表达猪表皮生长因子(pegf)的重组植物乳杆菌,并检测其生物活性,从仔猪肠道内容物中分离植物乳杆菌,选择其中生物活性最强的一株(lp-1)为宿主。以商品化乳杆菌表达载体piaβ8为骨架,干酪乳杆菌超强组成型启动子scp、m6前体蛋白信号肽sp、猪表皮生长因子pegf等为元件,构建表达pegf的植物乳杆菌重组表达载体pscpse。用电转化方法(2.0kv,2000ω,25μf,4.0ms)将重组载体pscpse转化入宿主菌lp-1中获得重组植物乳杆菌lp-pscpse。以tricine-sds-page法和pegfelisa特异性检测试剂盒检测目的蛋白的表达;用培养12h的阳性转化子菌体给刚断奶的balb/c小鼠灌胃,2次/天,连续10d,以断奶小鼠的体重、肠绒毛长度和隐窝深度的变化为指标,检测目的蛋白的生物活性。tricine-sds-page检测和小鼠实验结果显示,重组植物乳杆菌的培养上清中出现6kda左右pegf的特异性条带,且表达pegf的重组植物乳杆菌能显著增加(p<0.05)断奶小鼠的体重、肠绒毛高度和肠隐窝深度。以上结果表明,pegf能在植物乳杆菌中成功表达,且具有良好的生物学活性。
Effect of Perinatal PFOS Exposure on Intracellular Free Calcium Concentration in Hippocampus of Rats
孕哺期全氟辛烷磺酸染毒对大鼠海马细胞钙稳态的影响

Liu Xiaohui,Liu Bing,Jin Yihe,
刘晓晖
,刘冰,金一和

生态毒理学报 , 2011,
Abstract: 为了阐明孕哺期全氟辛烷磺酸(perfluorooctane sulfonate,PFOS)染毒对大鼠及其仔鼠海马细胞钙稳态的影响,将妊娠Wistar大鼠30只,从妊娠第1天开始对实验组分别以7.2 mg·kg-1 (low,L)、14.4 mg·kg-1 (high,H) (以饲料中的PFOS计)的PFOS进行染毒至仔鼠生后35 d。 采用固相萃取-高效液相色谱/质谱联机法(HPLC/MS\|MIS)检测脑组织中PFOS浓度,使用Fura\|2/AM荧光探针法测定母鼠和仔鼠海马细胞内游离钙离子浓度(\C
人工合成的植物化猪α乳清蛋白基因在转基因拟兰芥的表达  [PDF]
芦春斌?
热带亚热带植物学报 , 2005, DOI: 10.3969/j.issn.1005-3395.2005.2.010
Abstract: 将一个398bp的植物化的猪α乳清蛋白基因(lactalbumin,la)编码区克隆到带有花椰菜花叶病毒的35s启动子的质粒中。对它们进行pcr检测和序列分析,证实这些阳性克隆是实验预期的重组质粒。随即将35s启动子-α-乳清蛋白基因-终止子这一表达单元克隆到双元载体pcg-cb中,用该重组质粒双元载体pcg-cb-lact转化农杆菌v3101后,以农杆菌法进行拟兰芥植物转化,用除草剂finale对转化植物进行抗除草剂基因筛选,得到一些抗除草剂的转化植株。对这些抗除草剂植株进行猪α乳清蛋白基因pcr分析,成功筛选到带有猪α乳清蛋白基因并且可以在后代稳定遗传的转基因植物。westernblot蛋白质表达分析,表明猪α乳清蛋白在拟兰芥中成功表达,并且猪α乳清蛋白被正确加工成天然蛋白。
泌乳期奶牛乳腺基因表达谱研究
侯晓明,李庆章,黄田英
中国科学 生命科学 , 2010,
Abstract: 从青春期到泌乳期以至干乳期, 奶牛乳腺经历复杂的生物学功能和代谢水平的变化. 通过基因芯片分析奶牛乳腺的基因表达谱, 通过泌乳旺盛的泌乳期与不泌乳的青春期和干乳期相比较, 共筛选出122个差异表达的基因, 其中包括79个泌乳期上调基因和43个泌乳期下调基因. GO分析表明, 在泌乳期奶牛乳腺中上调的基因主要与物质转运、生物合成、信号转导、催化活性、免疫防御、细胞凋亡以及促进发育相关. 这些数据提示了奶牛乳腺泌乳期所发生的分子事件.
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