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Estandarización del aislamiento y caracterización de células estromales de decidua y útero murinos
Cadavid,Lina; ávila,Cristina; Cadavid,ángela;
Revista Colombiana de Ciencias Pecuarias , 2009,
Abstract: stromal cells are the most abundant cell population present in decidual tissue; they are involved in key processes during embryo implantation, fetal nutrition and the pregnancy maintenance. described procedures for stromal cells isolation require the use of many monoclonal antibodies due to contamination with another cell types in the decidua; besides, some markers of stromal cells show variability during the days of gestation. in this study, we standardized a procedure for isolation by enzymatic digestion, density gradient and adherence to plastic. murine stromal cells were characterized by exclusion of markers that are expressed in macrophages (f4-80), epithelial cells and trophoblast (cytokeratin-7), yielding a 98% of negative cells for these markers that correspond to stromal cells. this isolation procedure permits to obtain stromal cells with less expensive and high efficiency methods that provide a useful cellular model to study the physiology of gestation in different species.
ACTIVIDAD IN VITRO DE FLAVONOIDES AISLADOS DE ESPECIES MEDICINALES ARGENTINAS SOBRE LA PROLIFERACION DE LINFOCITOS MURINOS  [cached]
Valeria Sülsen,Flavia Redko,Jerónimo Ulloa,Liliana Muschietti
Boletín Latinoamericano y del Caribe de Plantas Medicinales y Aromáticas , 2007,
Abstract: El propósito de este trabajo fue evaluar la bioactividad de los flavonoides hispidulina y santina, aislados de Ambrosia tenuifolia Sprengel (Asteraceae) y de Eupatorium buniifolium H. et Arn. (Asteraceae) respectivamente, sobre la proliferación celular (ensayo de captación 3H-timidina) y viabilidad (técnica de exclusión con azul Tripán) de linfocitos murinos normales. Los resultados obtenidos: captación de 3H- timidina (% de incremento respecto al basal) (X ± ESM): santina 344 ± 30; hispidulina: 80 ± 6 y la concentración efectiva media (CE50 X ± ESM): santina: 0,014 ± 0,001 mg/ml* hispidulina: 0,10 ± 0,008 mg/ml, demostraron que ambos flavonoides aumentan significativamente la proliferación celular en una relación concentración-respuesta. La santina ejerció la mayor actividad estimulante siendo además el flavonoide de mayor potencia. Es la primera vez que se informa la actividad proliferativa de estos flavonoides.
Cultivo de células estromales de rata. Influencia del suero fetal bovino Stromal rat cell culture. Influence of fetal calf serum
Karelys de la Cuétara-Bernal,Alain García-Varona,Bertha Beatriz Socarrás-Ferrer
Revista Cubana de Hematolog?-a, Inmunolog?-a y Hemoterapia , 2012,
Abstract: Las células madre estromales humanas y de roedores cultivadas pueden ser inducidas a diferenciarse en neuronas, enfatizando su utilidad potencial en la terapia celular neurorrestaurativa. Los sistemas de cultivo para la expansión de estas células describen el uso de diferentes proporciones de suero fetal, lo que motivó a estudiar qué concentración de suero fetal bovino era capaz de garantizar un adecuado rendimiento celular. Las células de la médula ósea de rata se cultivaron en medio a-MEM suplementado con 10 y 20 % de suero fetal bovino y se subcultivaron hasta 3 veces. La viabilidad celular de los cultivos primarios y los subcultivos estuvo por encima del 98 % en ambos experimentos. Los cultivos primarios demoraron 17,4 días en confluir y los subcultivos 7,7 días. La concentración de suero fetal al 20 % no aumentó significativamente la velocidad de multiplicación celular; no obstante, se obtuvo un mayor número de células estromales. El sistema de expansión in vitro podría utilizarse en estudios futuros para la expansión de las células estromales humanas, lo que sienta mejores bases para su aplicación clínica. Cultured human and rodents stromal stem cells can be induced to differentiate into neurons, emphasizing its potential use in neurorestorative cell therapy. Cropping systems for the expansion of these cells describe the use of different ratios of fetal serum, which led to study what concentration of fetal calf serum was able to ensure an adequate cell yield. Cells from rat bone marrow were cultured in medium supplemented with a-MEM 10 and 20 % fetal bovine serum and subcultured up to 3 times. Cell viability of primary cultures and subcultures was above 98% in both experiments. Primary cultures converge delayed in 17.4 days and 7.7 days subcultures. The concentration of 20 % fetal calf serum did not significantly increase the speed of cell division, however, we obtained a greater number of stromal cells. The expansion in vitro system could be used in future studies for the expansion of human stromal cells, which feels better basis for clinical application.
Utilización de modelos murinos en ciencias biomédicas
Angel Céspedes Rubio
Iatreia , 2005,
Abstract: Se define como modelo al animal producido y mantenido bajo condiciones controladas de bioterio, que posee claros antecedentes genéticos y microbiológicos comprobables, del cual pueden obtenerse respuestas fragmentarias de significado bológico fiable y reproducible.
Impacto del volumen del fagosoma en la producción de óxido nítrico por parte de macrófagos murinos activados  [cached]
Ni?o Andrea,Camacho Marcela
Acta Biológica Colombiana , 2004,
Abstract: Macrófagos murinos infectados por Leishmania amazonensis, presentan desactivación en la producción de óxido nítrico, el cual constituye un importante mecanismo microbicida. Por una parte, se plantea que el fenómeno de desactivación observado se debe a una serie de alteraciones en la se alización celular, generadas por el parásito como una adaptación para evadir los mecanismos de defensa de la célula hospedera, no obstante, se ha presentado evidencia que sugiere la importancia de factores no específicos de la infección, como son: el volumen del fagosoma y la carga fagocítica en el proceso de desactivación. En este trabajo se evaluó la incidencia del volumen del fagosoma en la desactivación de macrófagos murinos evaluando cinco grupos diferentes: macrófagos activados, macrófagos no activados, macrófagos infectados por L. amazonensis (volumen de fagosoma: 134 ± 12μm3), macrófagos que han fagocitado partículas de látex de 6μm de diámetro (volumen de fagosoma: 136 ± 23μm3) macrófagos infectados por Leishmania braziliensis (volumen de fagosoma: 48 ± 2μm3). Macrófagos infectados por L. amazonensis y macrófagos que han fagocitado partículas de látex de 6μm, registran volúmenes de fagosoma similares y una desactivación equivalente (50%) en la producción de óxido nítrico. Macrófagos infectados por L. braziliensis, pese a exhibir un volumen de fagosoma menor, presentan una desactivación equivalente a los grupos anteriormente descritos. Estos hechos indican que el volumen del fagosoma juega un papel importante en la desactivacion de macrófagos infectados por L. amazonensis; en el caso del fagosoma generado por L. braziliensis, es posible que este haya superado un punto crítico después del cual se observa desactivación o que existan otros factores específicos de la infección que incidan en el proceso.
Diseminación tisular de Cryptosporidium SPP en hospedadores murinos experimentalmente inmunosuprimidos
María Antonia de la Parte-Pérez,Elizabeth Bruzual,Pilar Hurtado,Lucila Arcay
Archivos Venezolanos de Farmacología y Terapéutica , 2008,
Abstract: Cryptosporidium spp. es un protozoario parásito perteneciente al Phylum Apicomplexa, el cual ha sido estudiado ampliamente a nivel humano y veterinario por ser el causante de la criptosporidiosis. En este trabajo estudiamos la diseminación tisular del parásito utilizando dos grupos de hospedadores murinos: uno constituido por ratones infectados y tratados con ciclofosfamida (CPA) por su efecto inmunosupresor y el segundo por animales infectados, no tratados. El análisis de las muestras del grupo parasitado y tratado presentó una amplia diseminación en el intestino, la tráquea, el pulmón, el bazo, en ganglios linfáticos, glándula tiroides, además del hígado, mientras que el grupo control mostró diseminación solamente en el intestino. Los resultados obtenidos en los roedores inmunosuprimidos sugieren resultados semejantes en cuanto a diseminación en el humano inmunodeficiente y la importancia de enfocarse hacia la prevención de la infección intestinal por este Coccidia en individuos con alteraciones del sistema inmune. Cryptosporidium spp. is a protozoan parasite icluded in the Phylum Apicomplexa, that has been well studied in humans and animals for being the agent that causes cryptosporidiosis. In this experiment we studied the parasite dissemination to organs and systems in two groups of murine hosts: one constituted by infected mice treated with cyclophosphamide (CPA) to produce immunosuppression and the group control, which included infected animals not treated with CPA. The analysis of tissue specimens pertaining to the group of infected and treated animals, showed wide dissemination of the parasite in intestine, trachea, lung, spleen, lymph nodes, thyroid gland and liver, while tissue specimens from controls showed scarce dissemination to the intestine. Observations in organs and systems of the immunosuppressed mice suggest similar parasite behaviour in the immunodeficient human being, therefore the importance for the application of the preventive measures for the infection by this Coccidia in cases of immunodeficient individuals.
Efecto de la Equilibración y la Tasa de Enfriamiento sobre la Viabilidad Post Vitrificación de Embriones Murinos Effect of Equilibration and Cooling Rate on the Post Vitrification Viability of Murine Embryos
Pedro Cabrera,Andrés González,Karelhia García,Adriana Fernández
Revista de la Facultad de Ciencias Veterinarias , 2011,
Abstract: La técnica de criopreservación de embriones por vitrificación ha adquirido gran relevancia a nivel mundial debido a lo fácil de su ejecución, a los costos reducidos en equipos requeridos y, además por los altos niveles de viabilidad de embriones post vitrificación. Sin embargo, existe gran variabilidad entre los protocolos reportados, en especial en relación a las etapas de equilibración y enfriamiento. Con el objeto de contribuir al dise o de un protocolo estándar de vitrificación para la criopreservación de embriones murinos, se plantearon los siguientes experimentos: Experimento 1, se estudió el efecto de la tasa de enfriamiento (rápida y muy rápida) y el volumen de la solución (2μL y 1μL) sobre la viabilidad de embriones murinos post vitrificación, no observando efecto alguno del volumen de la solución (p>0,05), pero sí un efecto estadísticamente significativo (p<0,05) de la tasa de enfriamiento. Resaltando, que se obtuvo mejor resultado (81,3% de embriones viables), cuando se utilizó el protocolo de vitrificación Rápido-1 μL. Experimento 2, se evaluó la influencia del número de pasos y tiempo de equilibración sobre la viabilidad de embriones murinos, combinando protocolos de 4 pasos de exposición a los crioprotectores (1, 2, 3 y 4 pasos) y 4 tiempos de equilibración (5, 10, 15 y 20 min). La mayor tasa de viabilidad (p<0,05) fue obtenida empleando el protocolo 2 pasos-10min (93,8%). En conclusión, la presente investigación aporta detalles para la optimización del protocolo de vitrificación de embriones murinos. The technique of cryopreservation of embryos by vitrification has acquired great relevance world-wide because of the easiness of the process, the low cost of the equipment, and the high levels of viability of the embryos after vitrification. Nevertheless, a great variability exists among the reported protocols, especially in relation to the steps of equilibration and cooling. In order to contribute to the design of a standard protocol of vitrification for murine embryos, the following experiments were conducted. Experiment 1 studied the effect of cooling rate (fast and very fast), and the volume of the solution (2μL and 1μL) on the viability of murine embryos post vitrification. No effect of the volume of the solution (p>0.05) was observed, but a significant (p<0.05) effect of the cooling rate was shown. Understanding that the best results (81.3% of viable embryos) were obtained when the Fast - 1μL protocol of vitrification was used. Experiment 2 evaluated the influence of the number of steps and the equilibration time on the viability of mur
Tumores estromales gastrointestinales: enfoque actual Presentación de seis casos Gastrointestinal stromal tumors: current management and report of six cases
Manuel Santiago Mosquera Paz,Akram Kadamani Abiyoma,Gabriel Sánchez de Guzmán,Luis Jaime Téllez
Revista Colombiana de Cirugía , 2004,
Abstract: Se presentan seis pacientes con diagnóstico inmuno-histoquímico de tumores estromales gastrointestinales y extragastrointestinales localizados en diferentes órganos del tracto digestivo y otras áreas, estudiados e intervenidos en nuestra institución a partir del a o 2000, con seguimiento en su evolución clínica hasta la fecha por los servicios de hemato- oncología y cirugía; a excepción de una paciente. En su mayoría sin diagnóstico claro en su preoperatorio o con alta sospecha de presentar tumores mesenquimales complicados por masa compresiva, oclusión intestinal o sangrado. Se plantean de manera concreta los aspectos relevantes en su diagnóstico y clasificación patológica, manejo quirúrgico y tratamiento en relación a la literatura actual, exponiendo algunas de las controversias existentes. Además de fijar nuestra posición como grupo terapéutico frente a esta neoplasia, con base en la revisión realizada y nuestra limitada experiencia. We hereby report six patients with inmunohistochemical diagnosis of GIST located in different organs of the gastrointestinal tract and other areas, who were managed at our institution, except one case, starting in 2000 and followed until now in the services of hemato-oncology and surgery. The majority of these patients did not have a clear preoperative diagnosis or presented with high suspicion of a mesenchyunal tumor, complicate by a compressing mass, intestinal obstruction, or bleeding. We describe the most relevant aspects pertinent to diagnosis and pathologic classification, surgical management in the context of current literature reports, with emphasis on the ongoing controversies. Furthermore, we define our policy as a group on the basis of the literature review and the careful analysis of our limited experience.
Gastric stromal tumors: clinical presentation and surgical options Tumores estromales gástricos: formas de presentación y opciones quirúrgicas  [cached]
C. Pardo Martínez,J. Mayol Martínez,C. Hernández Pérez,J. álvarez Fernández-Represa
Revista Espa?ola de Enfermedades Digestivas , 2004,
Abstract: Stromal tumors represent 1-3% of all primary gastric neoplasms. These tumors can occur at any age and display different clinical manifestations, but they rarely reach over 10 cm in size. Currently they are designed as gastrointestinal stromal tumors (GIST) but their classification is still controversial. Surgery is the treatment of choice, and the extension of surgical resection depends on the tumor size, neoplastic involvement of adjacent organs, and the presence of metastatic disease. In selected cases minimally invasive surgery can provide excellent results. We present four new patients with GIST who exemplify the different clinical forms of presentations of GISTs and their diverse treatment options. Los tumores estromales representan el 1-3% de las neoplasias gástricas primitivas. Se pueden presentar a cualquier edad, bajo muy diversas formas clínicas, siendo raro que alcancen un tama o superior a los 10 cm. Estos raros tumores se encuadran en la actualidad dentro de los denominados tumores del estroma gastrointestinal (GIST′s) , cuya clasificación continúa siendo controvertida. La cirugía es el tratamiento de elección y su extensión viene determinada por el tama o del tumor, la afectación de órganos vecinos y la presencia o no de metástasis. En casos seleccionados, la cirugía mínimamente invasiva puede llevarse a cabo con excelentes resultados. Presentamos cuatro casos que resumen las distintas formas de presentación clínica de estos tumores así como su manejo terapéutico.
Survival of vitrified mouse blastocysts loaded into glass micro-capillaries¤ Sobrevivencia embrionaria de blastocistos murinos vitrificados en microcapilares de vidrio Sobrevivência embrionária de blastocistos murinos vitrificados em micro capilares de vidro
Paula Rodríguez V,Felipe Ongaratto,Daniela Scherer,Berenice de ávila Rodrigues
Revista Colombiana de Ciencias Pecuarias , 2010,
Abstract: The purpose of this study was to determine the in vitro expansion and hatching rates of vitrified mouse blastocysts loaded into glass micro-capillaries (Brand - 5 μL). Early morning on day 4 of pregnancy, blastocysts were collected from donors, morphologically evaluated, and then allocated in three groups: Group 1 (Control): embryos were transferred into 100 μL of KSOM medium drops and in vitro cultured during 72 h; Groups 2 and 3: embryos initially exposed to the equilibration solution (PBSm + 10% EG + 10% PROH and 0.5% PVA) for 1 min, and then to vitrification solution (PBSm + 20% EG + 20% PROH + 0.5% PVA) for 30 sec. After that, blastocysts were loaded into glass micropipettes (GMP) or glass microcapillaries (GMC) and plunged into super-cooled liquid nitrogen (-200 °C). Embryo warming and cryoprotectant dilution were carried out into 500 μL droplets of PBSm supplemented with 0.25 M sucrose maintained at 37 °C. After 5 min embryos were transferred to 100 mL droplets of KSOM medium and cultured in vitro for 72 h. Blastocyst expansion rates after in vitro culture were 77% (138/177) and 74% (131/175), for blastocysts vitrified in GMP and GMC, respectively. Blastocyst hatching rate (control group) was 91% (134/146), which was higher than for embryos loaded in GMP 61% (108/177) and GMC 53% (93/175). ICM number in control group embryos contained 25.7 ± 2.5 cells and did not differ from the mean cell number observed in vitrified embryos loaded in GMP (24.2±2.3) or GMC (22.5±2.59). Regarding the trophoectoderm cell number, Group 1 embryos displayed 63.1±3.0 cells, and also not differ from the cell numbers of the embryos loaded into GMP (58.0±1.8) or GMC (58.0±.3.7). In conclusion, manufactured GMC (Brand ) tested in this study showed same efficiency as GMP for vitrification of mouse blastocysts. El objetivo de este estudio fue determinar las tazas de expansión y eclosión in vitro de los blastocistos murinos vitrificados en micro-capilares de vidrio (Brand - 5 μL). En el día 4 de pre ez, los blastocistos eran colectados de las donantes, evaluados morfológicamente y localizados en tres diferentes grupos: Grupo 1 (Control): compuesto por los embriones que eran transferidos a gotas de 100 μL de medio KSOM y cultivados in vitro por un periodo de 72 h; Grupos 2 y 3: compuesto por los embriones que eran expuestos inicialmente a la solución de equilibrio (PBSm + 10% EG + 10% PROH and 0.5% PVA) por 1 min, y posteriormente a la solución de vitrificación (PBSm + 20% EG + 20% PROH + 0.5% PVA) por un periodo de 30 seg. Posteriormente, los blastocistos, eran almacenados d
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