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Concentración mínima inhibitoria de Kanamicina para callos de cuatro variedades colombianas de arroz
-Granados D.,Cristina Diaz; -Giraldo,, Alejandro Chaparro;
Revista Colombiana de Biotecnología , 2011,
Abstract: kanamycin (km) is an antibiotic that has been used in the production of transgenic rice plants as a selective agent. in this study, we evaluated the antibiotic sensitivity of seed derived callus in four varieties of colombian rice (fedearroz 2000, fedearroz 50, 369 and cica fedearroz 8). it was induced callus formation from mature sedd in a specific medium, it were resulting in percentages of callus formation greater than 90%. later callus were subsequently taken to a regeneration medium, which are important variations in the rate of regeneration, between 62% (f2000) and 11% (f369). seven different concentrations of kanamycin (0 mg/l, 100 mg/l, 200 mg/l, 300 mg/l, 400 mg/l, 500 mg/l and 600 mg/l) were tested added to the regeneration medium. it was observed differential response to the antibiotic. f369 to f2000 and from 500 mg/l showed no regenerating, while for f50 and cica 8 was from 300 mg/l.
Concentración mínima inhibitoria de higromicina B en callos embriogénicos de arroz (Oryza sativa L.)  [cached]
Barbosa Cepeda Iván Darío,Chaparro Giraldo Alejandro
Revista Colombiana de Biotecnología , 2011,
Abstract: Título en ingles: Minimum inhibitory concentration of higromycin B in rice embryogenic calli (Oryza sativa L.) RESUMEN Uno de los elementos imprescindibles en la ingeniería genética de plantas es un sistema de selección eficiente. El propósito de este trabajo fue evaluar la sensibilidad al marcador de selección higromicina B, de callos embriogénicos obtenidos a partir del escutelo de semilla de tres variedades colombianas de arroz (FEDEARROZ 2000, FEDEARROZ 50 y FEDEARROZ 369). Además, se validó la respuesta de estas variedades al protocolo de regeneración empleado. Se probaron cuatro concentraciones del antibiótico (25 mg/L, 50 mg/L, 75 mg/L y 100 mg/L) más un control sin higromicina B. Los resultados obtenidos mostraron que una concentración de 50 mg/L de antibiótico en el medio de regeneración es adecuada para la selección. Con esta concentración se impide la formación de brotes, aunque los callos no mueren completamente. Por otra parte, se estableció que el protocolo de regeneración utilizado es de baja eficiencia y, por consiguiente, es necesario optimizarlo para poder usarlo en procesos de ingeniería genética de cultivares colombianos de arroz. Palabras clave: variedades colombianas de arroz, FEDEARROZ 2000, FEDEARROZ 50, FEDEARROZ 369, sistema de selección, antibiótico. ABSTRACT An efficient selection system is one of the most important elements of plant genetic engineering. The purpose of this study was to evaluate the sensitivity of scutellum-derived embriogenic calli obtained from three colombian rice varieties (FEDEARROZ 2000, FEDEARROZ 50 and FEDEARROZ 369), to the selection marker hygromycin B. Aditionally, the response of these varieties to the regeneration protocol was measured. Four antibiotic concentrations were tested (25 mg/L, 50 mg/L, 75 mg/L and 100 mg/L) plus one control without hygromycin B. The results show that 50 mg/L of antibiotic in the regeneration medium is adequate for selection. This concentration prevents the formation of shoots, though the calli do not die. It was also established that the regeneration protocol is a low-efficiency system and it needs to be improved, in order to use it for colombian rice genetic engineering. Key words: rice Colombian varieties, FEDEARROZ 2000, FEDEARROZ 50, FEDEARROZ 369, selection system, antibiotic.
Efecto sinérgico de penicilina G y Kanamicina en septicemia neonatal por estafilococo
Espino,María; Couto,. María J.; Lee,Mario; Páez,Natasha; Meri?o,Elisa;
Revista Cubana de Pediatr?-a , 1995,
Abstract: sesenta y tres pacientes con diagnóstico de septicemia neonatal, 44 por estafilococo coagulasa negativa y 19 por estafilococo coagulasa positiva recibieron tratamiento con penicilina g y kanamicina. el 72, 7 % de las cepas de estafilococo coagulasa negativa y el 61,3 % de las cepas de estafilococo coagulasa positiva aisladas, fueron resistentes a ambos antibióticos individualmente. se observó sinergismo marcado en 27 cepas de estafilococo coagulasa negativa y 12 de estafilococo coagulasa positiva, cuya media geométrica de los valores del índice de concentración fraccionaria inhibitoria (cfi) fue de 0,39 y 0,11 respectivamente. en el resto de las pruebas realizadas se observó adición. al considerar a todos los pacientes juntos, la efectividad del tratamiento fue mayor cuando el germen era sensible a ambos antibióticos, que cuando sólo era sensible a uno de los 2. para los resultados sinérgicos, el 82 % de los pacientes tuvieron una salida clínica efectiva, así como también el 62,5 % de los resultados aditivos. la efectividad general de la combinación fue del 74,6 %. el estudio sugiere que el uso rutinario de la combinación de penicilina g y kanamicina que haya demostrado sinergia o adición in vitro, deberá ser considerado para el tratamiento de infecciones por estafilococos.
Efecto sinérgico de penicilina G y Kanamicina en septicemia neonatal por estafilococo
María Espino,. María J. Couto,Mario Lee,Natasha Páez
Revista Cubana de Pediatr?-a , 1995,
Abstract: Sesenta y tres pacientes con diagnóstico de septicemia neonatal, 44 por estafilococo coagulasa negativa y 19 por estafilococo coagulasa positiva recibieron tratamiento con penicilina G y kanamicina. El 72, 7 % de las cepas de estafilococo coagulasa negativa y el 61,3 % de las cepas de estafilococo coagulasa positiva aisladas, fueron resistentes a ambos antibióticos individualmente. Se observó sinergismo marcado en 27 cepas de estafilococo coagulasa negativa y 12 de estafilococo coagulasa positiva, cuya media geométrica de los valores del índice de concentración fraccionaria inhibitoria (CFI) fue de 0,39 y 0,11 respectivamente. En el resto de las pruebas realizadas se observó adición. Al considerar a todos los pacientes juntos, la efectividad del tratamiento fue mayor cuando el germen era sensible a ambos antibióticos, que cuando sólo era sensible a uno de los 2. Para los resultados sinérgicos, el 82 % de los pacientes tuvieron una salida clínica efectiva, así como también el 62,5 % de los resultados aditivos. La efectividad general de la combinación fue del 74,6 %. El estudio sugiere que el uso rutinario de la combinación de penicilina G y kanamicina que haya demostrado sinergia o adición in vitro, deberá ser considerado para el tratamiento de infecciones por estafilococos.
Evaluación morfológica de brotes regenerados de callos de arroz (variedad IACuba-28) resistentes a higromicina Morphological Evaluation of Shoots Regenerated from Hygromycin-Resistant Rice Callus (cv IACuba-28)  [cached]
Pérez Bernal Maylin,Delgado Rigo Magalis,Hernández Díaz Carlos Alberto,Armas Ramos Raúl
Revista Colombiana de Biotecnología , 2007,
Abstract: Se estableció un sistema de evaluación de brotes de arroz regenerados de callos resistentes a higromicina, que permitió relacionar las características morfológicas de dichos brotes con su resistencia al antibiótico. Callos embriogénicos de arroz se transformaron con Agrobacterium tumefaciens (EHA105/ pCAMBIA1300), con el gen de la higromicina-fosfotransferasa como marcador de selección. Después de dos semanas en medio de cultivo con higromicina, los callos resistentes fueron transferidos a regeneración. Durante 30 días se realizaron extracciones sucesivas de brotes emitidos de los callos, en seis intervalos de cinco días cada uno. Estos brotes se clasificaron según su morfología en: clase I – brote vigoroso con una estructura bipolar típica, de ápice y raíz con longitudes proporcionales; clase II – brote con raíz peque a respecto al ápice, o sin raíz; clase III – brote con alteraciones fenotípicas, albinismo, hojas muy anchas o enrolladas. Los brotes clasificados se transfirieron a medio MS con higromicina para evaluar su viabilidad. Los de clase I, que predominaron en las primeras extracciones, presentaron la mayor viabilidad durante el enraizamiento y crecimiento del follaje. En las últimas dos extracciones ocurrió una drástica reducción de los brotes clase I, y aumentaron los de clases II y III, simultáneamente disminuyó la viabilidad de estos últimos en MS con higromicina. Este resultado puede aplicarse para mejorar la eficiencia de obtención de plantas transgénicas de arroz en estas condiciones, debido a que precisa el momento óptimo para lograr brotes con características morfológicas normales y que sean resistentes a higromicina. An evaluation system based on the morphological characteristics of regenerated hygromycin-resistant rice callus shoots was established for correlating such characteristics with shoot viability on hygromycin. Embryogenic rice calli were transformed by Agrobacterium tumefaciens (EHA105/ pCAMBIA1300), containing the hygromycin-phosphotransferase gene as selection marker. After two weeks on selection medium, hygromycin-resistant calli were transferred to regeneration medium. Regenerated shoots were extracted every 5 days (over a 30-day period) and classified into three classes according to their morphological structure: class I: vigorous shoot having typical bipolar structure; class II: shoot having small root compared to apical length, or shoot without roots; class III: shoots having an abnormal appearance, such as malformed leaves or albinism. Individualised shoots were transferred to MS medium containing hygromycin for eva
Concentración mínima inhibitoria de higromicina B en callos embriogénicos de arroz (Oryza sativa L.)
Barbosa Cepeda,Iván Darío; Chaparro Giraldo,Alejandro;
Revista Colombiana de Biotecnología , 2011,
Abstract: an efficient selection system is one of the most important elements of plant genetic engineering. the purpose of this study was to evaluate the sensitivity of scutellum-derived embriogenic calli obtained from three colombian rice varieties (fedearroz 2000, fedearroz 50 and fedearroz 369), to the selection marker hygromycin b. aditionally, the response of these varieties to the regeneration protocol was measured. four antibiotic concentrations were tested (25 mg/l, 50 mg/l, 75 mg/l and 100 mg/l) plus one control without hygromycin b. the results show that 50 mg/l of antibiotic in the regeneration medium is adequate for selection. this concentration prevents the formation of shoots, though the calli do not die. it was also established that the regeneration protocol is a low-efficiency system and it needs to be improved, in order to use it for colombian rice genetic engineering.
CUANTIFICACION DE TAXOL Y BACCATIN III EN CALLOS DE Taxus baccata POR CROMATOGRAFIA LIQUIDA DE ALTA EFICIENCIA (HPLC)  [cached]
YANED M. CORREA,JAIME NI?O,OSCAR M. MOSQUERA
Scientia Et Technica , 2006,
Abstract: Callos de Taxus baccata fueron inducidos a partir de segmentos de agujas y tallos en el medio de cultivo TM5 suplementado con diferentes concentraciones de picloram en combinación con ácido giberélico (GA3) y kinetina. Los segmentos de tallo produjeron callos con tasas de crecimiento más altas que las obtenidas a partir de las agujas. Los mejores medios para la inducción de callos fueron TM5 suplementados con 1 o 6 mg/L de picloram en combinación con 0,1 mg/L de GA3 y 0,1 mg/L de kinetina respectivamente. El análisis por HPLC de los extractos metanólicos de los callos determinó que el rango de concentración de Taxol estuvo entre 1,90 8,75 mg/L y el de Baccatin III entre 4,55 18,90 mg/L.
CAPACIDAD EMBRIOGéNICA DE CALLOS INDUCIDOS EN EJES EMBRIONARIOS CIGóTICOS DE Agave angustifolia Haw  [cached]
Amaury-Martu00EDn Arzate-Fernu00E1ndez,Rafael Meju00EDa-Franco
Revista fitotecnia mexicana , 2011,
Abstract: El uso como explantes de ejes embrionarios cigóticos de semillas de agave mezcalero (Agave angustifolia Haw), permitió inducir embriones somáticos (ES) in vitro, previa formación de callos embriogénicos. Se probaron dos concentraciones de las sales Murashige y Skoog (MS), 25 y 100 % de la original (MS-25 y MS-100), combinados con 0.0, 0.5, 1.0, 2.0 y 3.0 mg L-1 de ácido 2,4-diclorofenoxiacético (2,4-D), con 0.0 y 1.0 mg L-1 de 6-benciladenina (BA), y con 30 y 60 g L-1 de sacarosa. La mitad de los tratamientos fueron incubados bajo un fotoperíodo de 16 h luz (38 mol m-2 s-1) y 8 h de oscuridad, y la otra mitad en completa oscuridad, para un total de 80 tratamientos. La inducción de callo se observó a los 4 días (d) después de iniciado el cultivo (DDIC) en condiciones de luz y a los 5 d en condiciones de oscuridad, independientemente del tratamiento, excepto en donde no se adicionaron reguladores del crecimiento vegetal (RCV) y en los suplementados sólo con BA. La formación de ES se observó a los 100 DDIC; este proceso se vio favorecido en callos embriogénicos previamente inducidos en el medio MS-25 adicionado con 60 g L-1 de sacarosa, 3.0 mg L-1 de 2,4-D y 1.0 mg L-1 de BA, en condiciones de oscuridad. Segar, sin RCV, y se logró regenerar plantas completas de A. angustifolia a los 140 DDIC. logró la germinación de todos los ES en el medio MS-50, 60 g L-1 de sacarosa y 8 g L-1 de agar, sin RCV, y se logró regenerar plantas completas de A. angustifolia a los 140 DDIC.
Evaluación in vitro de la actividad inhibitoria de extractos vegetales sobre aislados de Colletotrichum spp  [cached]
Pérez Cordero Alexander,Rojas Sierra2 Johanna,Chamorro Anaya Leonardo,Pérez Palencia Katy
Acta Agronómica , 2011,
Abstract: Se evaluó la actividad inhibitoria in vitro de extractos de hojas de Melissa officinalis, Origanum vulgare,Jatropha gossypilia, Eucalyptus sp., Melia azederach y Mascagnia concinna sobre aislados de hongo delgénero Colletotrichum, causante de la enfermedad antracnosis en el cultivo del ame (Dioscorea alata, D.rotundata) en el departamento de Sucre, Colombia. Para la obtención de extractos etanólicos de hojasde M. officinalis y O. vulgare, se utilizó el método de percolación y para las otras especies vegetales, elmétodo de Soxhlet. Una vez preparados los extractos de hojas, se evaluó su actividad inhibitoria sobreseis aislados de hongo del género Colletotrichum (BVC 279a, BVC 279b, BVC 853, BVC 040, BVC 342 yBVC 507). Para la prueba inhibitoria se utilizó el método de siembra directa sobre la superficie del mediopapa-dextrosa-agar. Sobre las diferentes cepas se adicionaron 250 μl de cada extracto por separado. Seutilizó un control positivo con nistatina (4 mg/ml) y un testigo absoluto sin ningún tipo de tratamiento.La prueba se evaluó midiendo el crecimiento radial de cada cepa con los diferentes tratamientos a 96y 168 h. Se utilizó un dise o de bloques completamente al azar con tres repeticiones, para probardiferencias significativas entre tratamientos, cepas (aislados) y tiempo de inhibición. Los resultadosexpresados en porcentaje de inhibición, mostraron una alta actividad de los extractos obtenidos de lashojas de las plantas de M. azederach y M. concinna, sobre los hongos evaluados y su acción fue similaral control positivo
Evaluación de la dinámica del crecimiento in vitro en callos de Ipomoea batatas
González Paneque Orlando S.,Hernández Espinosa Margarita,Silva Pupo Juan J,Espinosa Reyes ángel
Revista Colombiana de Biotecnología , 2011,
Abstract: Evaluation of the dynamics of the growth in vitro callus of Ipomoea batatas Resumen El cultivo del boniato presenta una gran importancia, ya que se puede emplear en la alimentación humana y animal, así como en la industria; el mismo produce raíces reservantes de gran valor calórico y nutritivo con alto contenido de carbohidratos. Entre las raíces y tubérculos cultivados es el segundo en importancia y representa más del 80% de la producción mundial. El empleo de las técnicas in vitro constituye una poderosa herramienta en la explotación comercial, propiciando el empleo de la micropropagación en diferentes especies. Para desarrollar el presente trabajo se recolectaron raíces tuberosas pertenecientes al clon Inivit B 93-1. Se procedió a la formación de callos potencialmente embriogénicos, para lo cual se emplearon explantes de limbos foliares, desinfectados con hipoclorito de sodio (1%) y sembrados en el medio de cultivo propuesto por Murashige y Skoog (1962), vitaminas MS (10,0 ml/l-1), mioinositol (100 mg/l-1), sacarosa (3%), gelrite (0,2%), 2,4-D (0,25-2,5 mg/l-1) y 6-BAP (0,25-1,0 mg/l-1), el pH fue ajustado a 5,8 ± 0,01 mantenidos en la oscuridad durante treinta días, lográndose los mejores resultados con el uso del 2,4-D (0,50 mg/l-1) y 6-BAP (0,25 mg/l-1), y en los mismos se evaluó la dinámica del crecimiento y se lograron los mejores resultados entre los 28 y 32 días después de la siembra, para lo cual los resultados obtenidos servirán de base a otros estudios y permitirán evaluar, controlar y desarrollar estrategias para la conservación y el uso de los recursos naturales, dando cumplimiento al objetivo referente a estudiar la dinámica del crecimiento en la formación de callos potencialmente embriogénicos en el cultivo del boniato. Palabras clave: boniato, cultivo in vitro, reguladores del crecimiento. The cultivation of the sweet potato presents a great importance, since you can use in the human feeding, animal as well as in the industry, the same one produces roots reservantes of great caloric and nutritious value with high content of carbohydrates. Between the roots and cultivated tubers it is the second in importance and it represents more than 80% of the world production. The employment of the techniques in vitro constitutes a powerful tool in the commercial, propitiated exploitation the employment of the micropropagación in different species. It is for it that you/they were gathered to develop the present work tuberous roots of the clon INIVIT B 93-1. Was realized the formation of callus with embryogenic structures, explantes of leaves
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