oalib
Search Results: 1 - 10 of 100 matches for " "
All listed articles are free for downloading (OA Articles)
Page 1 /100
Display every page Item
Preparación de un conjugado anti IGG de ratón-peroxidasa en cabra
Merlín Linares,Julio C; Villaescusa Blanco,Rinaldo; Guerreiro Hernández,Ana M; González González,Juan M; González Sampedro,Renée; Arce Hernández,Ada A;
Revista Cubana de Hematolog?-a, Inmunolog?-a y Hemoterapia , 1999,
Abstract: se preparó un conjugado con peroxidasa a partir de los anticuerpos específicos aislados de un antisuero de cabra anti igg de ratón (molécula completa). los anticuerpos se aislaron por cromatografía de afinidad y el conjugado se preparó por el método de oxidación con peryodato. el conjugado obtenido presentó una relación molar igg/peroxidasa de 1,31, un valor de rz de 0,285 y resultó evaluado satisfactoriamente en cuanto a su especificidad y reactividad en los ensayos inmunoenzimáticos realizados
Preparación de un conjugado anti IGG de ratón-peroxidasa en cabra Preparation of an anti-mouse IgG peroxidase conjugate in goat  [cached]
Julio C Merlín Linares,Rinaldo Villaescusa Blanco,Ana M Guerreiro Hernández,Juan M González González
Revista Cubana de Hematolog?-a, Inmunolog?-a y Hemoterapia , 1999,
Abstract: Se preparó un conjugado con peroxidasa a partir de los anticuerpos específicos aislados de un antisuero de cabra anti IgG de ratón (molécula completa). Los anticuerpos se aislaron por cromatografía de afinidad y el conjugado se preparó por el método de oxidación con peryodato. El conjugado obtenido presentó una relación molar IgG/peroxidasa de 1,31, un valor de RZ de 0,285 y resultó evaluado satisfactoriamente en cuanto a su especificidad y reactividad en los ensayos inmunoenzimáticos realizados
Obtención de un conjugado peroxidasa-antígeno de superficie del virus de la hepatitis B Obtention of a peroxidase-hepatitis B virus surface antigen conjugate  [cached]
Tammy Fernández Romero,Antonio González Griego,Antonio Melchor Rodríguez,Félix J. Fernández Acosta
Revista Cubana de Investigaciones Biom??dicas , 2007,
Abstract: Se preparó un conjugado para la determinación de anticuerpos contra el antígeno de superficie del virus de la hepatitis B por inmunoensayo enzimático tipo sandwich de doble Ag. Se utilizó la peroxidasa, el antígeno de la vacuna cubana contra la hepatitis B y el método de conjugación del periodato. Se evaluó la actividad enzimática, la actividad inmunológica y la actividad específica del conjugado. La enzima y el antígeno conservaron su actividad luego de la conjugación y se escogió la dilución óptima de trabajo 1/200. Se concluyó que el conjugado obtenido presentaba adecuada especificidad, detectabilidad y reactividad, y podía considerarse apto para su utilización. A conjugate was prepared for the determination of antibodies against the surface antigen of hepatitis B virus by double Ag sandwich ELISA. Peroxidase, the antigen of the Cuban vaccine against hepatitis B, and the periodate-conjugation method were used. The enzymatic activity, the immunological activity and the specific conjugate activity were evaluated. The enzyme and the antigen conserved their activity after conjugation, and the optimal working dilution 1/200 was selected. It was concluded that the conjugate obtained had an adequate specificity, detectability and reactivity, and could be considered apt for its use.
Obtención de un conjugado peroxidasa-anti-antígeno de superficie del virus de la hepatitis B Obtention of a peroxidase-anti-hepatitis B virus surface antigen conjugate  [cached]
Tammy Fernández Romero,Antonio González Griego,Antonio Melchor Rodríguez,Félix J. Fernández Acosta
Revista Cubana de Investigaciones Biom??dicas , 2007,
Abstract: Se preparó y evaluó un conjugado para la detección del antígeno de superficie del virus de la hepatitis B por inmunoensayo enzimático tipo sandwich de doble anticuerpo. Se utilizaron anticuerpos policlonales de burro contra el antígeno de superficie del virus de la hepatitis B, la peroxidasa y el método de conjugación del periodato. Se evaluó la actividad enzimática, la actividad inmunológica y la actividad específica del conjugado. La enzima y los anticuerpos conservaron su actividad luego de la conjugación y se escogió el rango de diluciones 1/400-1/1 400 como óptimo para el trabajo. Se concluyó que el conjugado obtenido presentaba adecuada especificidad, detectabilidad y reactividad, y podía considerarse apto para su utilización. A conjugate was prepared and evaluated for the detection of hepatitis B virus surface antigen by double antibody sandwich ELISA. Donkey polyclonal antibodies against the hepatitis B virus surface antigen, peroxidase and the periodate conjugation method were used. The enzymatic, immunological and specific activity of the conjugate were evaluated. The enzyme and the antibodies conserved their activity after conjugation, and the dilution range 1/400-1/1400 was chosen as optimal for the work. It was concluded that the conjugate obtained presented an adequate specificity, detectability and reactivity, and that it could considered apt for its use.
Estudio comparativo de la inervación coroidea en el hombre y en el conejo (oryctolagus cuniculus) A comparative study of choroidal innervation in the human and the rabbit (oryctolagus cuniculus)  [cached]
R. De Hoz,J.J. Salazar,A.I. Ramírez,B. Rojas
Archivos de la Sociedad Espa?ola de Oftalmología , 2006,
Abstract: Objetivo: Analizar las diferencias morfológicas entre la inervación coroidea del hombre y el conejo, especie frecuentemente utilizada como modelo experimental de enfermedades oculares. Método: Se estudiaron montajes planos de coroides (12 humanas y 12 de conejo albino) con la técnica de inmunohistoquímica indirecta de la peroxidasa-antiperoxidasa, utilizando un anticuerpo frente al neurofilamento de 200 kD. Resultados: Las fibras nerviosas coroideas pueden ser perivasculares e intervasculares. Las perivasculares rodeaban las arterias formando una red que estaba más desarrollada en la coroides del conejo. En el humano, las fibras intervasculares se concentraban principalmente en el polo posterior donde formaban un plexo más denso y organizado que en el conejo, el cual no tenía una localización preferencial. Las células ganglionares eran más numerosas en el humano, concentrándose en un área circunferencial correspondiente a la entrada de las arterias ciliares cortas posteriores y en el área submacular. En el conejo estas células se situaban sólo en la periferia. Conclusiones: Existen diferencias entre la inervación coroidea humana y del conejo. En el humano, la abundancia de células ganglionares y su distribución, podrían ser necesarias para mantener un flujo sanguíneo constante en el área central de la coroides. La falta de organización nerviosa en el polo posterior del conejo podría estar asociada a la ausencia de mácula. Estas diferencias, junto a las diferencias anatómicas de la vascularización retiniana, deberían ser tenidas en cuenta al utilizar el conejo como modelo experimental para estudiar enfermedades oculares en las que esté implicada la regulación del flujo sanguíneo coroideo. Objective: To analyze morphological differences between the choroidal innervation of the human and the rabbit, the latter being a species frequently used as an experimental model of human ocular diseases. Methods: Twelve human and 12 rabbit choroidal whole mounts were processed using an indirect immunohistochemical technique, peroxidase-anti-peroxidase and antibodies against 200 kD neurofilament. Results: Choroidal nerve fibers were perivascular and intervascular. Perivascular fibers surrounded all arteries forming a network that was more developed in the rabbit. In humans, intervascular fibers were mainly concentrated at the posterior pole where they formed a denser and more highly organized plexus than in the rabbit, which did not exhibit a preferential location for these fibers. Human choroidal ganglion cells were far more numerous than in the rabbit and were concent
Evaluación de un conjugado anti-IgG de ratón-fluoresceína mediante técnicas de inmunofluorescencia indirecta y citometría de flujo  [cached]
JUAN CARLOS VILASECA,LILIANA PéREZ,CLARA SAVóN,DANAY CHACóN
Revista Cubana de Medicina Tropical , 1997,
Abstract: Se purificó una inmunoglobulina G de ratón a partir de suero por cromatografía de afinidad en proteína A. Con esta preparación se inmunizaron los conejos cuyos sueros fueron capaces de reconocer al antígeno inyectado mediante inmunodifusión doble. Los anticuerpos fueron precipitados del suero de conejo y purificados mediante cromatografía de intercambio iónico. Esta preparación fue conjugada a isotiocianato de fluoresceína según la tecnología convencional. El conjugado obtenido fue evaluado con las cepas de referencia de virus Parainfluenza 1, 2, 3; Adenovirus; virus sincitial respiratorio y virus influenza A y B, por una técnica de inmunofluorescencia indirecta y muestras positivas de VIH mediante citometría de flujo. En ambos casos se utilizaron anticuerpos monoclonales específicos. Se evaluaron muestras clínicas de pacientes con infección respiratoria aguda. An immunoglobulin G of mouse was purified from sera by affinity chromatography in protein A. The rabbits whose sera were able to recognize the antigen injected by double immunodiffusion were immunized with this preparation. The antibodies were precipatated from the rabbit's serum and purified by ion exchange chromatography. This preparation was conjugated to fluorescin isothiocyanate according to the conventional technique. The conjugated obtained was evaluated with the reference strains of Parainfluenza virus 1, 2, 3; Adenovirus; respiratory syncytial virus; and influenza virus A and B, by an indirect immunofluorescence technique and HIV positive samples by flow citometry. Specific monoclonal antibodies were used in both cases. Clinical specimens of patients with acute respiratory infection were evaluated.
Immunolocalization of HB-EGF in Human Skin by Streptavidin-Peroxidase (HRP) Conjugate Method Inmunolocalización de HB-EGF en Piel Humana por el Método de Conjugado Estreptavidina-Peroxidasa (HRP)
P Castrogiovanni,V Mazzone,R Imbesi
International Journal of Morphology , 2011,
Abstract: EGF family growth factors consists of growth factors, such as transforming growth factor (TGF)-a, heparin-binding EGF-like growth factor (HB-EGF), amphiregulin (AR) and epiregulin, autocrine growth factors in normal human keratinocytes. HB-EGF is mitogen for epithelial cells and like other members of the EGF family, HB-EGF exerts its biological effects via interaction with the EGF receptor (EGFR). HB-EGF is an autocrine growth factor for human keratinocytes, and has a possible role as a paracrine growth factor for fibroblast. Our report concerning immunohistochemical localization of HB-EGF in normal skin by using the streptavidin-peroxidase (HRP) conjugate method, confirms previous data, revealing specific patterns of HB-EGF localization. Identification of HB-EGF in cells of epithelial origin suggests its autocrine and/or paracrine roles in epithelial cell maintenance. Our report especially wants to give a technical contribution, easy to manage and with evident results. A simple technique that does not require use of sophisticated equipment. La familia factores de crecimiento EGF se compone de representantes como el factor de crecimiento transformante (TGF)-a, factor epidérmico vinculante a la heparina (HB-EGF), anfiregulina (AR) y epirregulina, factores autocrinos de crecimiento en queratinocitos humanos normales. HB-EGF es mitógeno para células epiteliales y al igual que otros miembros de la familia EGF, HB-EGF ejerce sus efectos biológicos a través de la interacción con el receptor de EGF (EGFR). HB-EGF es un factor de crecimiento autocrino de queratinocitos humanos, y tiene un posible papel como factor de crecimiento paracrino de los fibroblastos. Nuestro reporte sobre la localización inmunohistoquímica de HB-EGF en la piel normal mediante el método de conjugado estreptavidina-peroxidasa (HRP), confirma datos anteriores, revelando patrones de localización específicos para HB-EGF. La identificación de HB-EGF en las células de origen epitelial sugiere su papel autocrino y/o paracrinos en el mantenimiento de las células epiteliales. Nuestro informe quiere dar una contribución técnica, fácil de manejar y con resultados evidentes. Una técnica simple que no requiera el uso de equipo sofisticado.
Normalización y validación de ensayos inmunoenzimáticos para cuantificar IgG humana antileptospira serovares canicola canicola, canicola, icterohaemorrhagiae copenhageni y pomona mozdok  [PDF]
Xenia Ferriol,Rolando Ochoa,Yoandra Rodríguez,Ana Margarita García
Vaccimonitor , 2001,
Abstract: Con el objetivo de evaluar la respuesta inmune inducida por la vacuna cubana vax-SPIRAL se desarrollaron tres ELISAs de tipo indirecto para la cuantificación de IgG humana antileptospira, en el cual se emplearon como antígenos de captura las células enteras de Leptospira interrogans de los serovares canicola canicola,icterohaemorrhagiae copenhageni y pomona mozdok, inactivadas con formaldehído y posteriormente desecadas a 33 °C durante 16-20 h en placas para ELISA. Para la cuantificación se empleó un suero estándar al que se le asignaron unidades rbitrarias,correspondientes al recíproco del título obtenido por microaglutinación (MAT).Estos fueron 31, 12 y 58 U/mL respectivamente para los tres serovares se alados que se incluyen en el preparado vacunal. Se utilizó un conjugado anti IgG humana-peroxidasa, el cual se une a los anticuerpos específicos contra cada serovar, la reacción se evidencia por la acción de la enzima sobre la mezcla sustratocromógeno (ortofenilendiamina) que genera color. El método normalizado se validó para los tres serovares; la precisión intra e interensayos fueron excelentes, con coeficientes de variación inferiores al 10%. Las desviaciones de la recuperación y linealidad fueron también inferiores al 10%. El suero control se ubicaron paralos tres serovares en la zona de mayor interés para las muestras. Los ELISAs mostraron un 100% de sensibilidad para los tres serovares y se obtuvieron valores de 93,33% de especificidad para los serovarescanicola canicola e icterohaemorrhagiae copenagheni y de 100% para el serovar pomona mozdok. El límite de detección para cada uno de los serovares fue de 0,478; 0,127 y 0,632 U/mL respectivamente.
Determinación de anticuerpos IgG contra el ADN de doble cadena mediante ELISA utilizando como recubrimiento ADN xenógeno y alógeno Determination of IgG antibodies versus dsDNA by ELISA using xenogenous and halogenous DNA coating  [cached]
Gipsis Suárez Román,Antonio Mario González Griego,Tammy Fernández Romero,Victoria Esther González Ramírez
Revista Cubana de Investigaciones Biom??dicas , 2007,
Abstract: Se evaluó la utilidad del ADN alógeno como antígeno de recubrimiento para detectar los anticuerpos IgG contra el ADN de doble cadena. El ADN xenógeno empleado como recubrimiento de un enzimoinmunoensayo indirecto, para la determinación de estos anticuerpos, es de difícil obtención y muy costoso. Se empleó como recubrimiento ADN de timo de ternera y ADN de 6 sujetos supuestamente sanos. El análisis de la presencia de los anticuerpos se realizó en suero de 16 individuos con diagnóstico de lupus eritematoso sistémico. Se obtuvo 100 % de coincidencia en los resultados, así como pocas diferencias en la capacidad de discriminación del método con el empleo de los 2 tipos de ADN. Según lo anterior se concluyó que el ADN humano es útil como recubrimiento de este enzimoinmunoensayo. La obtención de este antígeno es menos costosa que la del ADN de timo de ternera. The usefulness of allogenous DNA as a coating antigen to detect IgG antibodies versus dsDNA was evaluated. The xenogenous DNA used as a coating of an indirect immunoenzimatic assay for determining these antibodies is difficult to obtain and very expensive. Calf thymus DNA and DNA from 6 apparently sound subjects was utilized for coating. The analysis of the presence of antibodies was made in serum from 16 individuals with diagnosis of systemic lupus erythematosus. 100 % of coincidence was obtained in the results. A few differences in the discrimination capacity of the method with the use of two DNA types were observed. According to the above, it was concluded that human DNA is useful as a coating of this enzymoimmunoassay. The obtention of such antigen cost less than that of the calf thymus.
Detección de anticuerpos IgG contra el ADN de doble cadena mediante ELISA utilizando como recubrimiento ADN xenógeno, alógeno y autólogo Detection of IgG antibodies to ELISA-double-chain DNA using xenogenous, allogenic and autologous  [cached]
Gipsis Suárez Román,Antonio Mario González Griego,Tammy Fernández Romero,Mónica Romero Sáez
Revista Cubana de Investigaciones Biom??dicas , 2009,
Abstract: El ADN xenógeno empleado como recubrimiento de un enzimoinmunoensayo indirecto, para la detección de anticuerpos IgG contra el ADN de doble cadena es de difícil obtención y muy costoso. OBJETIVO: evaluar la utilidad del ADN alógeno y autólogo como antígeno de recubrimiento para determinar estos anticuerpos. MéTODOS: se empleó como recubrimiento ADN de timo de ternera, ADN de dos sujetos supuestamente sanos y ADN de cuatro pacientes con diagnóstico de Lupus Eritematoso Sistémico. El análisis de la presencia de los anticuerpos se realizó en suero de los cuatro individuos enfermos. RESULTADOS: se obtuvo un 100 % de coincidencia en los resultados, así como pocas diferencias en la capacidad de discriminación del método con el empleo de los tres tipos de ADN. CONCLUSIONES: el ADN humano (alógeno y autólogo) es igualmente útil como recubrimiento de este enzimoinmunoensayo que el ADN xenógeno. Xenogenous DNA used as coating of an indirect enzyme-immunoassay for detection of IgG to double-chain DNA is very difficult to obtain and it is very expensive. OBJECTIVE: To assess usefulness of allogenic and autologous DNA coating antigen to determine these antibodies. METHODS: We used as coating the DNA from calf thymus, DNA from two subjects supposedly healthy, and DNA from 4 patients diagnosed with systemic lupus erythematosus (DLE), Analysis of antibodies presence was carried out in serum from 4 sick subjects. RESULTS: We achieved a 100% of coincidence in results, as well as a few differences in method discrimination ability using the three types of DNA. CONCLUSIONS: Human DNA (allogenic and autologous) is also useful as coating of this enzyme-immunoassay that the xenogenous DNA one.
Page 1 /100
Display every page Item


Home
Copyright © 2008-2017 Open Access Library. All rights reserved.