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-  2017 

2型猪链球菌溶血素多克隆和单克隆抗体制备及鉴定
Preparation and identification of polyclonal and monoclonal antibody of Suilysin in highly virulent strains of Streptococcus suis serotype 2

Keywords: 2型猪链球菌,溶血素,多克隆抗体,单克隆抗体

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目的 制备并鉴定2型猪链球菌(Streptococcus suis serotype 2,S.suis 2)四川分离菌株 05ZYH33 的溶血素(Suilysin,SLY)多克隆和单克隆抗体。方法 利用重组 SLY 蛋白制备 SLY 兔多抗,优化间接 ELISA 体系检测多抗效价,Western blot 分析 SLY 多抗特异性,检测 SLY 兔多抗对人外周血杀菌作用的影响。利用杂交瘤细胞融合技术制备 SLY 单抗,筛选杂交瘤细胞株并制备小鼠腹水,间接 ELISA 和 Western blot 鉴定 SLY 单抗的效价和特异性。结果 间接 ELISA 显示 SLY 多抗效价高达1∶204 800,Western blot 显示 SLY 多抗有较高的特异性和免疫反应性,人外周血杀菌试验显示,SLY 多抗能加强人外周血对 05ZYH33 的杀伤作用。间接 ELISA 检测杂交瘤细胞 2B6 和 5F7 培养上清效价分别是1∶800和1∶3 200,单抗效价都为1∶204 800。间接 ELISA 和 Western blot 鉴定显示,单抗 2B6 和 5F7 具有很强的特异性和免疫反应性。结论 成功制备了效价高、特异性强的 S.suis 2 05ZYH33 SLY 多克隆和单克隆抗体。

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