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抗番鸭呼肠孤病毒(mdrv)单克隆抗体的制备及应用

, PP. 41-46

Keywords: 番鸭呼肠孤病毒,单克隆抗体,间接免疫荧光

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【目的】制备抗番鸭呼肠孤病毒(mdrv)的单克隆抗体,建立番鸭呼肠孤病毒病的间接免疫荧光(ifa)快速诊断方法。【方法】制备mdrv抗原,用之免疫babl/c小鼠,取免疫小鼠脾细胞和sp2/0骨髓瘤细胞进行融合,采用ifa和elisa筛选阳性杂交瘤细胞株,体内诱生腹水法制备单克隆抗体,检测其生物学特性,应用制备的单克隆抗体建立mdrvifa快速诊断方法。【结果】筛选到237-11,45-12和3-h33株特异性好并能稳定分泌抗mdrv单克隆抗体的杂交瘤细胞株,其中45-12株单抗为igm亚型,237-11和3-h3株单抗为igg3亚型。45-12和3-h32株单抗具有elisa特性,效价分别为10-4和10-5;237-11株单抗具有ifa特性,效价达103。特异性测定结果显示,3株单抗仅与mdrv反应,而与正常细胞培养物(mdef)、番鸭细小病毒(mpv)、鹅细小病毒(gpv)、禽呼肠孤病毒(arv)、鸭副黏病毒(pmv)和鸭肝炎病毒(dhv)均无交叉反应。应用抗mdrv单抗建立的ifa方法与病毒分离法(vi)的符合率为91%。【结论】筛选到2株具有elisa特性、1株具有ifa特性且能分泌抗mdrv单克隆抗体的杂交瘤细胞株,建立了mdrvifa快速诊断方法,为番鸭呼肠孤病毒病的快速诊断奠定了基础。

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