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一种来源于运动替斯崔纳菌ka081020-065的新型卤醇脱卤酶的表达纯化及性质分析

DOI: 10.13345/j.cjb.140427, PP. 659-669

Keywords: 卤醇脱卤酶,运动替斯崔纳菌,(r)-4-氰基-3-羟基丁酸乙酯

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卤醇脱卤酶(halohydrindehalogenase)不仅对于含氯污染物的生物降解、净化环境具有重要意义,而且在手性医药中间体合成中也是一种重要的生物催化剂,但其数量较少。采用基因挖掘在基因组数据库中获得一种来自运动替斯崔纳菌tistrellamobiliska081020-065的新型卤醇脱卤酶基因hhetm,将该基因克隆、表达在大肠杆菌bl21(de3)中,利用镍柱亲和层析将该酶进行纯化并研究了其酶学性质。hhetm是一种同源四聚体;最适温度为50℃;不同的ph缓冲液对其活性有较大影响;在碱性、30℃以下的条件下稳定性高。在氰根离子存在的条件下,hhetm能够催化(s)-4-氯-3-羟基丁酸乙酯合成(r)-4-氰基-3-羟基丁酸乙酯,为酶法合成阿托伐他汀关键中间体提供了一种新的卤醇脱卤酶。

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