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利用rnai逆转录病毒载体系统对人朊病毒蛋白表达的稳定抑制

, PP. 1022-1027

Keywords: 朊病毒,rnai,逆转录病毒载体,细胞浸润

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朊病毒是引起可传染的致死性海绵状脑病的致病因子,细胞中正常的朊病毒蛋白(prpc)在该疾病病程发展中起着必不可少的作用。同时,prpc已被证明在胃癌、乳腺癌等癌症中发挥着保护癌细胞的作用。根据人源prpc(huprpc)cdna序列,本研究设计了4种19nt的sirna,将其构建成rnai逆转录病毒载体系统,进行了其对huprpc表达的抑制效应的分析,从中获得了能高效稳定抑制huprpc表达的3种靶向序列,其中si626(5¢-ggttgagcagatgtgtatc-3¢)的抑制效果最为明显,其抑制效率可达85%以上。随后,利用筛选出的si292和si626的稳定干扰细胞系进行了细胞浸润性实验,结果发现,prpc干扰细胞系细胞浸润能力显著下降。这为进一步研究朊病毒疾病的基因治疗、以prpc为靶标进行prpc相关癌症的辅助治疗研究奠定了一定的基础。

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