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菌物学报  2013 

Transformation of large DNA fragment of Panax ginseng into Ganoderma lucidum
人参大片段DNA(100kb)转化灵芝的研究

Keywords: Ganoderma lucidum protoplasts,electroporation,binary bacterial artificial chromosome,transformants
灵芝原生质体,电击法,双元细菌人工染色体,转化子

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Abstract:

为探讨人参大片段DNA转化灵芝的可能性,通过电击法将双元细菌人工染色体(BIBAC)载体上的100kb人参大片段DNA转化到灵芝原生质体内。研究发现,在电极间距为4mm,电压强度为240V时,将5μL的人参大片段DNA转化到75μL的灵芝原生质体,在选择培养基上获得了具有再生能力的转化子。根据克隆载体两侧的序列设计两对引物,对转化子进行PCR分析。试验结果表明人参大片段DNA已经转化到灵芝的基因组中。

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