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重组大肠杆菌高效分泌表达β-木糖苷酶发酵条件的优化

Keywords: β-木糖苷酶,胞外分泌,大肠杆菌,表达优化

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【目的】嗜热拟青霉β-木糖苷酶基因在大肠杆菌中高效分泌表达重组β-木糖苷酶摇瓶发酵条件优化, 及5 L发酵罐放大培养。【方法】通过单因素试验对诱导剂种类及其添加量、诱导起始OD600、培养温度、培养时间进行优化研究。【结果】摇瓶优化结果表明: 2%乳糖为诱导剂、培养温度为33 °C、OD600控制在0.8?0.9时诱导为最佳产酶条件, 在此条件下培养48 h后胞外酶活达到103.9 U/mL, 胞外分泌的比例高达99%以上。进行5 L发酵罐放大培养, 发酵48 h胞外酶活达到最高值392.5 U/mL, 蛋白含量为10.1 g/L。【结论】该重组大肠杆菌高效分泌β-木糖苷酶, 具有较好的工业化生产前景。

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